2.4 系統(tǒng)進(jìn)化樹分析

對基于核糖體ITS和28SrDNAD2D3區(qū)構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，基于ITS基因序列的進(jìn)化樹中，梔子根結(jié)線蟲種群MH756121、MH756122與海南（KF418369、MT0675599）、越南（MG773551、MG773550）、福建（MT209951、KX823380）、湖南（MT456216）7個象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii）群體位于同一分支，支持率為99%?；?8SrDNAD2D3基因序列的進(jìn)化樹中，梔子根結(jié)線蟲種群MN648519、MN648520與泰國（MT648507）、中國福建（MT193450、MT193449）、中國廣東（MN017119、MN017115）、美國（MH800969）6個象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii）群體位于同一分支上，支持率為85%。此外，基于核糖體ITS和28SrDNAD2D3區(qū)域構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹中，梔子根結(jié)線蟲種群均與南方根結(jié)線蟲（M.incognita）、花生根結(jié)線蟲（M.arenaria）、爪哇根結(jié)線蟲（M.javanica）、擬禾本科根結(jié)線蟲（M.graminicola）等近似種聚類在不同的分支，能明顯與近似種區(qū)分開（圖5，圖6）。該結(jié)果進(jìn)一步證實該病原線蟲為象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii）。
 

3 討論

本研究對廣西賀州市梔子種植基地的根結(jié)線蟲病進(jìn)行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)梔子根結(jié)線蟲病發(fā)生較嚴(yán)重。本研究采用形態(tài)學(xué)結(jié)合分子生物學(xué)的方法，將其病原鑒定為象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii），為梔子根結(jié)線蟲病的診斷及防治奠定了基礎(chǔ)。
根結(jié)線蟲病是梔子生產(chǎn)面臨的一種重要病害，廣東、福建、江西等地相繼報道了該病害，但多數(shù)研究集中于病害發(fā)生情況調(diào)查及藥劑篩選方面，病原相關(guān)報道較少，僅有廣西、福建兩地對其病原進(jìn)行了鑒定。2008年，熊英等采用形態(tài)學(xué)的方法將廣西柳州市鹿寨縣黃梔子種植基地根結(jié)線蟲病的病原鑒定為南方根結(jié)線蟲（M.incognita）。福建省林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院和福建省林業(yè)科學(xué)院將該省梔子根結(jié)線蟲病的病原鑒定為花生根結(jié)線蟲（M.arenaria）。根結(jié)線蟲分布廣且種類繁多，該屬有近100個有效種，同種作物不同地區(qū)其優(yōu)勢種群有差異。許天委等研究發(fā)現(xiàn)海南省土沉香根結(jié)線蟲病的病原為南方根結(jié)線蟲（M.incognita）、花生根結(jié)線蟲（M.arenaria）、爪哇根結(jié)線蟲（M.javanica），其中南方根結(jié)線蟲（M.incognita）是優(yōu)勢種群；而蘇圣淞等對海南澄邁土沉香根結(jié)線蟲病病原鑒定發(fā)現(xiàn)其病原為象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii）。本研究對廣西賀州市梔子根結(jié)線蟲病的病原進(jìn)行鑒定發(fā)現(xiàn)其病原為象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii），這樣的結(jié)果并不矛盾。本研究在之前形態(tài)學(xué)鑒定的基礎(chǔ)上結(jié)合了分子生態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析，其結(jié)果具有更高的準(zhǔn)確性。

1983年，Yang等在我國海南省儋州市象耳豆樹上首次發(fā)現(xiàn)并報道象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii），此后許多國家相繼報道了該線蟲的發(fā)生，到目前為止發(fā)現(xiàn)象耳豆根結(jié)線蟲（M.enterolobii）廣泛分布于四大州的熱帶地區(qū)。在我國，海南省的三亞、瓊海、定安，廣東省的番禺、遂溪，福建省的福州、漳州，湖南永州等地均發(fā)現(xiàn)了該線蟲。研究發(fā)現(xiàn)該蟲可危害中藥材、蔬菜、果樹等經(jīng)濟(jì)作物造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，本研究發(fā)現(xiàn)的茜草科梔子是該線蟲的寄主新記錄。卓侃等認(rèn)為該線蟲寄主范圍廣、毒性強(qiáng)、危害大，是熱帶、亞熱帶地區(qū)重要的病原線蟲。廣西地屬亞熱帶地區(qū)，廣泛種植的西瓜、番茄、番石榴等作物均是象耳豆根結(jié)線蟲的寄主，開展該線蟲的調(diào)查，了解其分布情況及新的潛在寄主，可為有效采取檢疫和防治措施，防止該病原線蟲的傳播擴(kuò)散及危害提供必要的依據(jù)。

相關(guān)鏈接：梔子根，番石榴，蛋白酶K

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