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  1. 細(xì)胞常見污染與防控

    講師: 簡永勝
    時間:2021-04-23 17:26
    本節(jié)課程主要是講解細(xì)胞污染類型及防控方法,涉及到細(xì)胞污染的鑒別、細(xì)胞無菌室打掃滅菌,耗材的滅菌、無菌操作注意事項(xiàng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)菌、霉菌等都可能侵入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境引起污染,污染對細(xì)胞的影響,可因污染源和細(xì)胞的種類不同而表現(xiàn)各異。細(xì)胞培養(yǎng)生物污染是指如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體和其他類型的細(xì)胞都可能侵入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境引起污染。污染總是難以避免,因此有效的預(yù)防與控制是關(guān)鍵。體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細(xì)胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。
  2. MTT法檢測細(xì)胞活力

    講師: BNCC
    時間:2021-04-21 18:52
    本節(jié)課程主要是講解MTT法檢測細(xì)胞活力的原理;并詳細(xì)演示了BNCC實(shí)驗(yàn)室MTT法檢測細(xì)胞活力的詳細(xì)流程。細(xì)胞活性是判斷體外培養(yǎng)細(xì)胞在某些條件下是不是能正常生長及人體肌膚狀態(tài)的1項(xiàng)重要指標(biāo),觸及生物科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、醫(yī)療整形等領(lǐng)域。細(xì)胞活性可以表征人體內(nèi)部化學(xué)反應(yīng)歷程的有序性,受多方面因素調(diào)理,一旦遭到破壞,就會致使人體代謝紊亂,產(chǎn)生疾病,乃至死亡。同時,在我們細(xì)胞培養(yǎng)過程中由組織中分離細(xì)胞后,檢查活力以了解分離過程對細(xì)胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查細(xì)胞活力,了解凍存和復(fù)蘇的效果。MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲臜,用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。
  3. 細(xì)胞STR鑒定

    講師: BNCC
    時間:2021-04-15 16:54
    本節(jié)課程內(nèi)容主要詳細(xì)地講解了以BNCC100916HL-60細(xì)胞為例為大家演示了細(xì)胞STR鑒定的實(shí)驗(yàn)。讓大家清晰地了解STR鑒定整個過程,包括樣本DNA提取、PCR擴(kuò)增反應(yīng)、上機(jī)反應(yīng)以及結(jié)果分析的詳細(xì)流程。在課程的總結(jié)部分也講解了細(xì)胞STR鑒定在科研中的重要性。
  4. 熒光定量PCR擴(kuò)增技術(shù)

    講師: 趙強(qiáng)
    時間:2021-04-15 16:04
    本節(jié)課程內(nèi)容主要詳細(xì)地講解了實(shí)時熒光定量PCR的工作原理,以及在相關(guān)領(lǐng)域的檢測應(yīng)用,并以目前比較熱門的實(shí)驗(yàn)室中新冠核酸質(zhì)粒代替新冠病毒的檢測進(jìn)行了具體的實(shí)踐操作。本課程在具體操作過程中詳細(xì)介紹了配置體系相關(guān)的試劑及操作要求,具有較好的指導(dǎo)意義。熒光定量PCR儀進(jìn)行了現(xiàn)場的操作,詳細(xì)介紹了儀器及軟件的使用,程序的設(shè)置保存、反應(yīng)位置的設(shè)置保存以及反應(yīng)結(jié)果位置的保存,反應(yīng)結(jié)束對結(jié)果的分析。整個流程從儀器工作原理、體系配置、儀器操作到結(jié)果分析自然流程,邏輯性強(qiáng),在課程的總結(jié)部分,技術(shù)老師對操作過程中的注意事項(xiàng)進(jìn)行了總結(jié),并解答了同學(xué)們的相關(guān)疑問。
  5. 瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)

    講師: BNCC
    時間:2021-04-09 17:01
    本節(jié)課程主要是講解瓊脂糖凝膠電泳的原理;并詳細(xì)演示了BNCC實(shí)驗(yàn)室瓊脂糖凝膠電泳的詳細(xì)流程。瓊脂糖凝膠電泳是以瓊脂或瓊脂糖為支持介質(zhì)的一種電泳方法,常用來分離、鑒定和純化大分子核酸、病毒等物質(zhì),制備容易,分離范圍廣,可區(qū)分相差100bp的DNA片段。 瓊脂糖凝膠電泳以瓊脂凝膠作為支持物,在電場的“電荷效應(yīng)”和“分子篩”作用下,不同分子量DNA 片段在電場中表現(xiàn)出不同的遷移速率,從而達(dá)到分離混合物的目的。 瓊脂糖凝膠具有的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),會使物質(zhì)在電泳遷移過程中受到阻力,也就是我們所說的“分子篩作用”,通常分子越大的物質(zhì)受到的阻力越大;另外物質(zhì)在電泳緩沖液不同PH下所帶的電荷量不同,在電場中受力不同,所帶電荷越多,在電場中遷移速度越快,因此,物質(zhì)在“分子篩作用”和“電荷效應(yīng)”共同作用下達(dá)到分離的目的。
  6. 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化

    講師: 吳越
    時間:2021-04-08 17:49
    本節(jié)課程主要是講解質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的原理和用途;并詳細(xì)演示了BNCC實(shí)驗(yàn)室質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的詳細(xì)流程。講解了實(shí)驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)。質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化是微生物分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),在進(jìn)行基因克隆時,裸露的外源DNA直接導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)稱為轉(zhuǎn)化。載體與外源目的基因構(gòu)成的重組載體可以通過轉(zhuǎn)化直接導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而實(shí)現(xiàn)基因在異源細(xì)胞的表達(dá)。
  7. 感受態(tài)細(xì)胞的制備

    講師: 吳越
    時間:2021-04-06 11:14
    本節(jié)課程主要是講解制備感受態(tài)細(xì)胞的意義與目標(biāo);并詳細(xì)演示了BNCC實(shí)驗(yàn)室制備感受態(tài)細(xì)胞的的詳細(xì)流程。感受態(tài)細(xì)胞的制備是分子生物實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要的一步,首先需要了解感受態(tài)細(xì)胞的定義:細(xì)胞能夠從周圍環(huán)境中攝取DNA分子,并且不易被細(xì)胞內(nèi)的限制性核酸內(nèi)切酶分解時所處的一種特殊生理狀態(tài)稱感受態(tài)。 感受態(tài)的目的是增加細(xì)胞的通透性,以便外源基因進(jìn)入宿主細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的目的。將構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行表達(dá),不僅可以檢驗(yàn)重組載體是否構(gòu)建成功,最主要的是感受態(tài)細(xì)胞作為重組載體的宿主可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),如蛋白質(zhì)表達(dá)純化等工作。
  8. 食品微生物檢驗(yàn)樣品的采集和保存

    講師: 北納生物
    時間:2021-04-05 16:12
    本節(jié)課程內(nèi)容主要參考國標(biāo)GB4789標(biāo)準(zhǔn)文件,詳細(xì)講解了食品微生物檢驗(yàn)樣品采集和保存的基本流程和注意事項(xiàng),并以偉業(yè)計量四樓超市作為采樣地點(diǎn)進(jìn)行了現(xiàn)場食品采樣,演示了樣品采集的實(shí)際操作步驟,讓大家對整個樣品采集流程和保存方式比較清晰直觀。在課程的后半部分,技術(shù)負(fù)責(zé)人對食品微生物檢驗(yàn)樣品的采集和保存的重點(diǎn)知識進(jìn)行了總結(jié),并且強(qiáng)調(diào)了實(shí)操過程中的常見問題和注意事項(xiàng)。
  9. 菌落總數(shù)的測定

    講師: 北納生物
    時間:2021-04-03 13:11
    本節(jié)課程根據(jù)GB4789.2-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)中的食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn),以豆?jié){為例,講解了食品微生物檢測的意義,樣品的預(yù)處理操作步驟、菌落總數(shù)測定的具體實(shí)驗(yàn)過程,以及菌落總數(shù)的統(tǒng)計和計算。整個課程完整地展示了國標(biāo)中要求的實(shí)驗(yàn)流程,詳細(xì)地介紹了實(shí)驗(yàn)操作細(xì)節(jié)及注意事項(xiàng)。
  10. 食品微生物檢驗(yàn)的基本程序

    講師: 北納生物
    時間:2021-04-02 11:14
    本節(jié)課程內(nèi)容講解了食品微生物檢驗(yàn)的基本程序,涵蓋取樣、樣品處理、選擇檢測標(biāo)準(zhǔn)到報告的形成。主要參考國標(biāo)GB4789標(biāo)準(zhǔn)文件。演示了相關(guān)的實(shí)際操作步驟,整個食品微生物檢驗(yàn)的流程比較清晰直觀。在課程的后半部分,技術(shù)負(fù)責(zé)人對食品微生物檢驗(yàn)的基本程序重點(diǎn)知識進(jìn)行了總結(jié),并且強(qiáng)調(diào)了實(shí)操過程中的常見問題和注意事項(xiàng)。
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