3-乙?；?2，5-二甲基噻吩(3-Acetyl-2，5-dimethylthiophene，ADP)是一種可以作為咸味香精的食品添加劑，具有燒烤、堅果的氣味，常用于肉類食品加工中。于2002年開始作為食品用香料使用。目前，ADP作為允許使用的食品用香料收錄在GB2760-2014附錄B中。2013年歐洲食品安全管理局公布了對該物質(zhì)重新評估的意見，認為其在體內(nèi)和體外試驗均表現(xiàn)出致突變性，作為食品用香料使用存在安全問題，將其從食品用香料法規(guī)附錄Ⅰ食品中香料清單中刪除。同年8月14日，中國香精香料化妝品工業(yè)協(xié)會發(fā)布了香料香精行業(yè)自律文件，規(guī)定香料生產(chǎn)企業(yè)不得生產(chǎn)用作食品用香料的3-乙?；?2，5-二甲基噻吩，食品用香精生產(chǎn)企業(yè)調(diào)整配方，不得再使用該物質(zhì)。ADP分子式見圖1。

目前對ADP的檢測在國家標準及行業(yè)標準中尚屬空白，針對該物質(zhì)的定量分析研究開展的也不多?，F(xiàn)有的文獻方法有氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS)、高效液相色譜法（HPLC)。氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法抗干擾能力強、靈敏度高，但其操作較為復(fù)雜，成本高，技術(shù)難度較高，使用普及性較差﹔而高效液相色譜法分離效率高、檢測靈敏度高，但定性效果差，容易受到雜質(zhì)、基質(zhì)等因素的干擾。氣相色譜-質(zhì)譜法定性效果較好，準確度、靈敏度高，普及范圍廣。

此外，現(xiàn)有文獻中報道的ADP檢測基質(zhì)一般為香精香料類食品添加劑，文獻報道常用正庚烷、正己烷、無水乙醇直接提取，而由于食品基質(zhì)復(fù)雜，目標物鑲嵌其中，基質(zhì)干擾會對ADP的檢測產(chǎn)生影響。

本文以ADP為研究對象，以氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)為檢測手段，針對含油脂食品、不含油脂食品分別采用不同的前處理方法，建立了簡單、高效的定性和定量檢測食品中ADP的分析方法。

一、實驗部分

1、儀器與試劑

氣相色譜-質(zhì)譜儀（TRACE1310-TSQ8000)﹔美國賽默飛世爾科技公司，電子分析天平(SQP)：北京賽多利斯﹔超純水機（IQ7000，Mili-Q)﹔渦旋混合器(UMV-2)：山東青云實驗耗材有限公司；超聲清洗機(KQ-800DE)：昆山市超聲儀器有限公司；高速離心機（3-18KS)：德國Sigma。甲醇、正己烷均為色譜純：德國默克，3-乙?；?2，5-二甲基噻吩標準品（純度97.3%)：美國CATO公司。

2、前處理方法

（1）含油脂的試樣

膨化食品、火鍋底料或含油調(diào)味醬、肉制品等。

準確稱取試樣5.0g（精確至0.01g)于15mL離心管中，準確加入10mL甲醇，渦旋2min，超聲提取15min，4000r/min離心2min，收集上清液。-20℃冰箱冷凍2h，濾紙過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。

（2）不含油脂的試樣

食品添加劑、水溶性香精、調(diào)味料（醬)、香辛料、方便面調(diào)味包等。

準確稱取試樣5.0g（精確至0.01g)于50mL離心管中，加入5mL蒸餾水，渦旋混勻，再準確加入10mL正己烷，渦旋2min，超聲提取15min，4000r/min離心2min，取上清液，供氣相色譜―質(zhì)譜分析。

3、儀器條件

（1）氣相色譜條件

TG-WaxMS毛細管柱(30m×0.25mm×250um)，柱溫度程序：50℃保持1min，20℃/min升溫至200℃保持3min，25℃/min升溫至240℃保持7min；進樣口溫度：240℃﹔進樣模式：不分流；載氣：氦氣，流速：1mL/min。

（2）質(zhì)譜條件

為電子轟擊離子源，EI，70eV；離子源溫度：300℃﹔四級桿溫度：280℃﹔傳輸線溫度：280℃﹔溶劑延遲：7.5min。

二、結(jié)果與討論

1、提取方式的考察

食品中大多數(shù)為水、脂肪類化合物、有機酸、芳香經(jīng)類等混合物，樣品基質(zhì)成分與提取溶劑之間存在著吸附競爭。ADP不溶于水，易溶于甲醇、乙醇等有機溶劑，可以依靠有機溶劑萃取的方法，而應(yīng)用超聲波萃取可提高提取效率，縮短提取時間。因此，本研究采用溶劑萃取和超聲波萃取結(jié)合的方式，對食品中的ADP進行提取。

2、提取溶劑的選擇

（1）含油脂試樣

簡德威、茅佩卿等人用正庚烷做提取溶劑，徐雪琴等人用正己烷做提取溶劑，提取液經(jīng)濾膜過濾后上機測定。但對于含油脂的試樣來說，提取時油脂會溶解在正己烷、正庚烷中，在色譜分析時大分子油脂的存在會造成基質(zhì)干擾，降低儀器靈敏度，且油脂的存在會縮短色譜柱的使用壽命造成儀器污染。本文采用甲醇作為提取溶劑，利用ADP在甲醇中易溶而油脂難溶的特性，將ADP從油脂中提取出來，并采用冷凍過濾的方法去除提取過程中的油脂及各類雜質(zhì)，保證了組分的純度和質(zhì)量。甲醇提取法檢測快速又節(jié)省試劑，且在色譜分析中極少有雜質(zhì)峰出現(xiàn)，有利于保護色譜柱并延長其使用期限。

（2）不含油脂試樣

選擇正己烷、異辛烷、正庚烷、二氯甲烷等4種不同極性且毒性較低的常見溶劑。準確稱取試樣5.0g（精確至0.01g)于15mL離心管中，準確加入10mL甲醇，渦旋2min，超聲提取15min，4000r/min離心2min，收集上清液。-20℃冰箱冷凍2h，濾紙過濾后供氣相色譜-質(zhì)譜分析。以回收率考察不同溶劑的提取效果。試驗結(jié)果表明：正己烷、正庚烷提取效率相當(dāng)，回收率可達95%以上﹔異辛烷作為提取溶劑時，回收率在80%～90%之間﹔而二氯甲烷提取效率最差，回收率在50%～60%之間。正己烷價格低廉、正庚烷價格略高，綜合考慮提取效果及成本因素，因此試驗選擇正己烷為提取溶劑。結(jié)果見圖2。

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