2.1.3 樣品液pH對試紙吸附性質的影響

分別用0.05mol/LpH為2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0的乙酸銨緩沖液，配制0.5mg/mL的花青素和0.5%葡萄籽紅紅色人工合成色素溶液，分別用快速檢測試紙吸附七種溶液中的花青素及人工合成色素，觀察現象，檢測結果及分析，見表3所示。

由表3可知，樣品液pH范圍在4.0～9.0時，該快速檢測試紙可以良好的吸附樣品液中的人工合成色素，且不吸附花青素。是該試紙的最佳使用pH范圍。當樣品液pH≥10.0或pH≤3.0時，試紙雖然不吸附花青素，但是對人工合成色素吸附性減弱。

2.2 快速檢測試紙性能參數

2.2.1 檢測下限

取50組黑枸杞樣品，按照1.3.5方法提取樣品液中色素，用2mL甲醇將試紙上離子液體洗脫到比色皿中，得到50組待測液體，于紫外分光光度計540nm下分別測定50組液體吸光度，計算50組吸光度相對標準偏差為s=0.041，10倍相對標準偏差（n=50份）對應的濃度為本方法檢測下限。10倍相對標準偏差對應濃度為2.4μg/mL。本方法處理樣品為20倍稀釋，計算得出本方法樣品檢出限為50μg/g。

2.2.2 假陽性率

稱取固態(tài)樣品5.0g，加入20mL蒸餾水，沸水浴提取10min，冷卻至室溫，吸取提取液2mL，加入蒸餾水10mL，得到有顏色且透明的樣品液，將試紙條一端浸潤在樣品液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。加入10mL水。將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。水浴加熱除去酒精，加入10mL水，將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化。處理一批次（n=100份）陰性樣品中，其中得到陽性結果為假陽性，假陽性率=假陽性數/100份。處理100份液相色譜確證無色素陰性黑枸杞樣品后，得到2張試紙出現淡紅色，其他試紙不顯色。假陽性個數為2，假陽性率為2%。

2.2.3 假陰性率

稱取固態(tài)樣品5.0g，加入20mL蒸餾水，沸水浴提取10min，冷卻至室溫，吸取提取液2mL，加入蒸餾水10mL，得到有顏色且透明的樣品液，將試紙條一端浸潤在樣品液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。加入10mL水。將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。水浴加熱除去酒精，加入10mL水，將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化。方法處理一批次（n=100份）陽性樣品中，其中得到陰性結果為假陰性，假陰性率=假陰性數/100份。處理100份液相色譜確證含有色素陽性黑枸杞樣品后，得到3張試紙不顯色，其他試紙出現粉紅色。假陰性個數為3，假陰性率為3%。

2.2.4 準確性

稱取固態(tài)樣品5.0g，加入20mL蒸餾水，沸水浴提取10min，冷卻至室溫，吸取提取液2mL，加入蒸餾水10mL，得到有顏色且透明的樣品液，將試紙條一端浸潤在樣品液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。加入10mL水。將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。水浴加熱除去酒精，加入10mL水，將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化，處理一批次（n=100份）陰性樣品和一批次（n=100份）陽性樣品中，其中得到陰性結果為真陰性，陽性結果為真陽性，準確性=（真陽性+真陰性）/200份。處理100份液相色譜確證含有色素陽性黑枸杞樣品和液相色譜確證無色素陰性黑枸杞樣品后，得到真陽性結果97個，真陰性結果95個，準確性為96%。

2.3 實際樣品檢測

從甘肅省蘭州市各個超市、農貿市場、小攤販等場所，隨機抽取黑枸杞樣品4份，黑米樣品4份，葡萄汁樣品4份，黑枸杞飲料及保健品4份，葡萄酒樣品4份，稱取固態(tài)樣品5.0g，加入20mL蒸餾水，沸水浴提取10min，冷卻至室溫，吸取提取液2mL，加入蒸餾水10mL，得到有顏色且透明的樣品液，將試紙條一端浸潤在樣品液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。加入10mL水。將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化。稱取液態(tài)樣品10g。水浴加熱除去酒精，加入10mL水，將制備好的試紙條浸潤在上清液中，保持30s后取出觀察顯色變化，使用快速檢測試紙，鑒別上述樣品中是否含有人工添合成色素。結合高效液相色譜，檢測樣品中花青素含量和人工合成色素含量。對比并分析快速檢測試紙與高效液相色譜檢測結果。具體結果見表4所示。

由表3可知花青素真?zhèn)慰焖贆z測試紙的檢測結果，與液相色譜檢測結果相吻合。

2.4 保存條件實驗

取120份快速檢測試紙，分為6組，每組20份。分別置于6種不同的條件下，放置6個月，在此對5組試紙的檢測效果進行評價。具體結果見表5所示。

有表5證明，該快速檢測試紙在零下20℃-常溫下都可以在空氣中保存6個月。這是由于離子液體具有很強的物理及化學穩(wěn)定性。固相載體玻璃纖維濾紙同樣屬于不變質、腐敗的材料。

3 結論

本發(fā)明試紙條制造成本低，在弱酸性、中性及弱堿性環(huán)境中對人工合成色素和染料吸附性強，對天然花青素不產生吸附。該試紙條能快速有效的從樣品水溶液中吸附人工合成色素及染料而顯色，而不吸附花青素，不顯色。根據試紙的特殊性質可以區(qū)別含花青素的樣品中，是否含有人工添加的色素和染料。成本試紙廉價，方便，快捷，操作簡單，現象明顯。適合非專業(yè)人員及現場執(zhí)法人員使用。適用于食品中花青素定性快速檢測試驗。

該方法操作簡單，吸附速度快，檢測耗時短，現象明顯，成本極低。適合任何環(huán)境下，不借助其他儀器設備的情況下，快速定性判定樣品中花青素的真假。由于混合離子液體具有耐高溫，結構性質穩(wěn)定，沸點極高，蒸汽壓幾乎為零的特點，涂覆在玻璃纖維濾紙上的混合離子液體不易揮發(fā)，不易散失，可以在無需隔絕空氣情況下，長時間常溫常壓下保存很長時間。

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