4、操作步驟

吸取夏費(fèi)-索姆吉試劑與還原糖作用生成Cu₂O沉淀，將沉淀用H₂SO₄酸化時(shí)，Cu₂O即溶解成Cu⁺。而夏費(fèi)-素姆吉試劑中的KIO₃與KI在酸化時(shí)生成I₂:

KIO₃+5KI+3H₂SO =3K₂S0₄+3H₂0+3I₂

試劑中的KIO₃是定量加入的，所以生成的I₂也是一定量的。生成的I₂與Cu⁺發(fā)生氧化還原反應(yīng)，消耗一部分I₂。

溶液中與Cu⁺反應(yīng)后所剩余的I₂以淀粉為指示劑，用Na₂S₂O₃標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。

在測定同時(shí)做空白標(biāo)定，以水代替糖試液，由空白標(biāo)定消耗的Na₂S₂O₃毫升數(shù)減去實(shí)測待測液消耗的Na₂S₂O₃毫升數(shù)，查表39.1即得待測液中還原糧的毫克數(shù)。本方法適用于含糖少的蔬菜、牧草等樣品。水溶性糖浸出液(水浸出液或乙醉浸出液)50 mL，于100 mL容量瓶中，逐滴加入鹽酸溶液(試劑1)5mL,置90℃水浴鍋中加熱10min。冷卻后，加酚酞指示劑2滴～3滴，以氫氧化鈉溶液(試劑2)中和至淺紅色，加水定容。此時(shí)蔗糖等雙糖已水解為還原糖:

將轉(zhuǎn)化后的待測液裝入滴定管中，滴定煮沸的費(fèi)林試劑，還原糖與費(fèi)林試劑的作用如下:

① 林試劑(A)與(B)等體積餛合后，產(chǎn)生下列反應(yīng)，形成銅的酒石酸絡(luò)鹽；

② 在煮沸的條件下，銅的酒石酸絡(luò)鹽與還原糖作用，將還原糖氧化和降解：

在用待測液測定一定量的費(fèi)林試劑時(shí)，以亞甲基藍(lán)作為氧化還原指示劑。在滴定過程中，稍過量的還原中使氧化型亞甲基藍(lán)的藍(lán)色消失還原成無色的還原型亞甲基鹽，即達(dá)滴定點(diǎn)。指示劑的變化如下：

還原糖與費(fèi)林試劑反應(yīng)的完全程度與滴定時(shí)條件(如加熱強(qiáng)度、溫度、時(shí)間等)有關(guān)，故必須嚴(yán)格按照規(guī)程操作。由于指示劑也能消耗一定量還原糖，所以每次滴定時(shí)須按規(guī)定加入相同數(shù)量的亞甲基藍(lán)。本法適宜于含糖量高的樣品(15mL～50mL待測液中含糖50mg)。

5、結(jié)果計(jì)算

式中:m1——與10mL費(fèi)林試劑相當(dāng)?shù)倪€原糖質(zhì)量,mg;

V——滴定時(shí)所用待測液體積,mL;

ts——分取倍數(shù)，本操作為 

10^-3——將mg換算成g的系數(shù)。

m——樣品質(zhì)量，g。

參考資料：土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法