對得到的多元線性回歸模型進(jìn)行方差分析和顯著性檢驗，結(jié)果見表4，魔芋分、酵母浸粉和硫酸錳對酶活有極為顯著（p＜0.01模型的擬合度(R-Squared)為0.9958，測量信噪比(AdeqPrecision)為48.993大于4；模型的矯正決定系數(shù)(AdjR-Squared)為0.9903且Pred-R-Squared為0.9323，兩者之間的差距小于0.2。

從以上分析可有，該模型與實際試驗擬合良好，試驗誤差小，證明本實驗采用響應(yīng)面法優(yōu)化培養(yǎng)基是可行的。

（2）響應(yīng)曲面圖分析

三因素之間的響應(yīng)曲面見圖6，從中可以看出三者之間有明顯的交互作用。在試驗設(shè)計范圍之內(nèi)，從圖6-a和圖6-b可以看出，在酵母浸粉和硫酸錳的添加量固定不變的情況下，產(chǎn)酶活力隨著魔芋粉添加量的增加而增大；從圖6-a和圖6-c可以看出，在魔芋粉和硫酸錳添加量固定的情況下，酶活力隨著酵母浸粉添加量的增加先上升后開始下降；從圖6--b和圖6-c可看出，在魔芋粉和酵母浸粉添加量固定不變的情況下，產(chǎn)酶活力隨著硫酸錳添加量的增加先上升后開始下降。

在本試驗取值范圍之內(nèi)，以最大酶活為目標(biāo)，根據(jù)軟件Design-Expert10.0.7分析，培養(yǎng)基的最佳配比為:魔芋粉3.0%、酵母浸粉2.734%、硫酸錳0.439%，預(yù)測酶活力為6.187U/mL，期望值為0.997。結(jié)合實際操作便利，將培養(yǎng)基添加量改為:魔芋粉3.00%、酵母浸粉2.70%、硫酸錳0.45%，在此條件下進(jìn)行三次驗證實驗，測得酶活力平均值為6.179U/mL，與理論值的相對誤差很小，說明本實驗采用響應(yīng)面法對培養(yǎng)基成分進(jìn)行回歸分析，達(dá)到了參數(shù)優(yōu)化的目的。

三、結(jié)論與討論

以甘露聚糖為唯一碳源，從魔芋種植土壤中篩得一株產(chǎn)耐酸性β-甘露聚糖酶的菌株，所產(chǎn)酶在pH4酸性緩沖液中處理一小時后酶活力僅降低13%。通過16SrDNA測序并進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析可知該菌為路德維希腸桿菌。對該菌的培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，最終將該菌搖瓶發(fā)酵后粗酶液酶活從2.050U/mL提高到6.179U/mL，提高了三倍。

本研究分離得到的路德維希腸桿菌于2005年由HaraldHoffmann等人發(fā)現(xiàn)并命名，多用于對水中重金屬污染和土壤農(nóng)藥殘留的治理，也有報道該菌具有植物的促生長性，還有報道該菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶和β-木糖苷酶等。國內(nèi)外對該菌的研究較少，鑒于其對環(huán)境污染的治理與對植物的促生長作用及產(chǎn)各種酶，因此該菌在未來還是有不錯的研究及應(yīng)用前景。本研究得到的路德維希腸桿菌從目前的實驗來看產(chǎn)酶活力不高且耐酸性不強(qiáng)，可通過誘變、改變代謝流等手段提高其產(chǎn)酶活力和耐酸性；鑒于該菌可應(yīng)用于諸多領(lǐng)域，也有必要對該菌的生理生化特性等內(nèi)容進(jìn)行深入研究，為進(jìn)一步研究該菌和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

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