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雙水相體系萃取純化紫甘藍(lán)色素(二)

發(fā)布時(shí)間:2021-03-09 12:59 編輯者:周世紅

(2)PEG的質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)選擇性系數(shù)k的影響

在50mL離心管中加入5.4g硫酸銨(硫酸銨的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18%),4.2g色素粗提液,分別加入9.0g、10.5g、12.0g、13.5g、15.0gPEG原液,調(diào)節(jié)體系pH為5,雙水相萃取后的選擇性系數(shù)和花青素與糖類(lèi)雜質(zhì)的分配系數(shù)結(jié)果如圖2所示。
 

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由圖2可知,隨著PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加,花青素與糖類(lèi)雜質(zhì)的分配系數(shù)都呈下降的趨勢(shì),花青素的降低幅度更大一些,選擇性系數(shù)k存在先下降后上升再下降的趨勢(shì),在PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)為16%達(dá)到最高。

(3)pH對(duì)選擇性系數(shù)k的影響

在50mL離心管中加入5.4g硫酸銨,12.0gPEG6000原液(PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)為16%),4.2g色素粗提液,分別調(diào)節(jié)體系pH為1、2、3、4、5,雙水相萃取結(jié)果如圖3所示。
 

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如圖3可知,隨著pH的增大,選擇性系數(shù)先升高后降低,在pH為3時(shí)達(dá)到最高,原因可能是因?yàn)樽细仕{(lán)色素屬于矢車(chē)菊類(lèi)色素,在pH為3時(shí)色素大多呈分子狀態(tài)存在,更易被萃取到上相中,因此使得測(cè)得的K花最大。

(4)料液加入量對(duì)選擇性系數(shù)k的影響

在50mL離心管中加入5.4g硫酸銨,12.0gPEG6000原液(PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)為16%),調(diào)節(jié)體系pH為3,分別加入1.8g、2.4g、3.0g、3.6g、4.2g色素粗提液,雙水相萃取結(jié)果如圖4所示。


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如圖4可知,隨著料液加入量的增多,選擇性系數(shù)呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì),在料液加入量為12%時(shí),選擇性系數(shù)達(dá)到最高。當(dāng)料液加入量超過(guò)12%時(shí),下相當(dāng)中花青素的含量開(kāi)始上升,導(dǎo)致K開(kāi)始下降,選擇性系數(shù)k開(kāi)始呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

2、正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

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從上表可以看出,硫酸銨的添加量依然是越多,選擇性系數(shù)越高,但實(shí)驗(yàn)過(guò)程不宜再增加了,原因是一方面過(guò)高的硫酸銨濃度容易在下相析出結(jié)晶,另一方面增加了生產(chǎn)成本和在上相色素中的殘留量,因此確定為20%。四個(gè)因素的影響次序?yàn)椋捍痔嵋旱挠昧浚緋H>硫酸銨的用量>PEG的用量,綜合單一因素實(shí)驗(yàn),最佳實(shí)驗(yàn)條件:粗提液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%,硫酸銨質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%,pH為3.5,PEG的質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%,花青素的選擇性系數(shù)為750.26。

三、結(jié)論

采用PEG/硫酸銨雙水相體系萃取純化紫甘藍(lán)中花青素。正交實(shí)驗(yàn)最佳的萃取條件為:粗提液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%,硫酸銨質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%,pH為3.5,PEG的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%,花青素的選擇性系數(shù)為750.26。雖然使用PEG6000/硫酸銨雙水相體系對(duì)紫甘藍(lán)色素有很好的選擇性,能夠?qū)崿F(xiàn)紫甘藍(lán)色素與其糖類(lèi)物質(zhì)的分離,并且花青素的分配系數(shù)K對(duì)選擇性系數(shù)的影響程度遠(yuǎn)大于多糖的分配系數(shù)K,但后續(xù)如何實(shí)現(xiàn)聚合物和花青素的分離仍是企業(yè)生產(chǎn)所面臨的難題。

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