2.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

與GC-MS相似，HPLC-MS技術(shù)是將高效液相色譜法與質(zhì)譜法相結(jié)合，拓寬了高效液相色譜法的檢測(cè)范圍，是一種集高分理性、高選擇性和高靈敏度于一體的檢測(cè)方法。HPLC-MS可用于測(cè)定GC-MS難以區(qū)分的物質(zhì)，如DINP和鄰苯二甲酸二異癸酯(di-iso-decyl phthalate，DIDP)具有多種同分異構(gòu)體，在GC和GC-MS的色譜圖中為五指峰，不容易準(zhǔn)確定量。徐敦明等采用HPLC-MS進(jìn)行測(cè)定時(shí)，DINP只有一個(gè)峰，易于實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。

此外，HPLC-MS亦適用于多種PAEs的高通量測(cè)定，邵秋榮等利用HPLC-MS法測(cè)定了酒中23種PAEs的殘留量，檢出限為0.1 mg/kg，遠(yuǎn)低于國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)。23種PAEs的加標(biāo)回收率為87～102%，證明了采用HPLC-MS技術(shù)對(duì)食品中PAEs多殘留檢測(cè)的可行性。HPLC-MS方法靈敏度高，定性定量準(zhǔn)確，近年來(lái)在痕量有機(jī)物的檢測(cè)中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，但是HPLC-MS方法仍然存在HPLC檢測(cè)法中操作復(fù)雜的缺點(diǎn)，同時(shí)其所用設(shè)備昂貴，在食品污染物的檢測(cè)應(yīng)用中受限。

2.5 傅立葉變換紅外光譜法

除了有上述檢測(cè)方法之外，傅立葉變化紅外光譜法也被應(yīng)用于PAEs的檢測(cè)。傅立葉變化紅外光譜具有分辨率高、檢測(cè)快速等優(yōu)點(diǎn)，在有機(jī)化學(xué)、無(wú)機(jī)化學(xué)、材料科學(xué)、醫(yī)藥和環(huán)境等領(lǐng)域有較多應(yīng)用。俞雄飛等[31]利用傅立葉變換紅外光譜對(duì)PAEs進(jìn)行了快速鑒定。該方法的不足之處在于靈敏度較低、基體干擾較大，需要對(duì)樣品進(jìn)行較高的分離提純，因此在食品中污染物的檢測(cè)中應(yīng)用較少。

3 快速檢測(cè)法

大型儀器檢測(cè)法在食品中PAEs的檢測(cè)中表現(xiàn)出靈敏、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，但仍存在很多不可避免的問(wèn)題，包括樣品前處理復(fù)雜、儀器昂貴、需要專(zhuān)業(yè)人員操作、有機(jī)溶劑用量大等，無(wú)法滿(mǎn)足對(duì)食品中PAEs實(shí)時(shí)原位快速檢測(cè)的迫切需求。因此快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生，主要有免疫檢測(cè)法、熒光法、電化學(xué)檢測(cè)法、表面增強(qiáng)拉曼光譜法(surface-enhanced Raman spectroscopy，SERS)等。

3.1 免疫檢測(cè)法

免疫檢測(cè)法是利用抗原與抗體的特異性識(shí)別能力對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行快速的定性、定量分析。根據(jù)檢測(cè)模式、載體和標(biāo)記物的不同，免疫檢測(cè)技術(shù)可分為酶聯(lián)免疫分析法、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)免疫分析法、免疫親和層析分析法等。酶聯(lián)免疫法是研究最多的PAEs免疫分析法，SUN等制備了生物素化的DBP多克隆抗體，建立了一種高靈敏的DBP生物素-鏈酶親和素酶聯(lián)免疫檢測(cè)法，該方法對(duì)DBP具有很高的檢測(cè)特異性(<4%)，檢測(cè)濃度范圍為0.45～7.06 mg/L，檢測(cè)限為5 ng/L，對(duì)飲料和飲用水中的檢測(cè)回收率在89.5%～109.5%之間。

ZHANG等提出了一種新型的競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫吸附法來(lái)檢測(cè)DBP，該方法基于溶解的Ag+對(duì)牛血清白蛋白催化的抑制作用來(lái)提高檢測(cè)靈敏度，降低DBP的檢測(cè)限，比常規(guī)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)降低了16倍。相對(duì)于其他免疫檢測(cè)技術(shù)，PCR分析法具有較低的檢出限和較高的靈敏度，SUN等建立一種超靈敏的高通量免疫PCR分析方法，用于對(duì)食品中鄰苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate，DEP)的快速實(shí)時(shí)檢測(cè)。研究者將免疫方法與PCR技術(shù)相結(jié)合，大大提升了對(duì)DEP的檢測(cè)能力，其檢測(cè)濃度范圍達(dá)到4 pg/L～40 ng/L，檢出限為1.06 pg/L，該工作為食品中痕量PAEs的測(cè)定提供了方法學(xué)借鑒。免疫親和層析技術(shù)是發(fā)展較為成熟的免疫檢測(cè)技術(shù)，現(xiàn)已有基于免疫親和層析技術(shù)的PAEs檢測(cè)卡的商業(yè)化生產(chǎn)。

免疫檢測(cè)技術(shù)的抗干擾能力較差，易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，其核心試劑抗體屬蛋白類(lèi)物質(zhì)，易受溫度、PH等的影響而失活。

3.2 熒光法

熒光法的原理是利用羥基自由基進(jìn)攻PAEs，使其轉(zhuǎn)變成具有熒光性的羥基鄰苯二甲酸納，通過(guò)對(duì)熒光強(qiáng)度的測(cè)定可間接得到PAEs的含量。此外，可引入外源熒光材料，通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)換實(shí)現(xiàn)PAEs的測(cè)定。KIM等以Po Po3為外源熒光材料，構(gòu)建對(duì)多種PAEs(鄰苯二甲酸二甲酯(dimethylphthalate，DMP)、DEP、DBP、DIBP、BBP、DEHP等)快速檢出的適配子熒光傳感器，可在30 s內(nèi)完成對(duì)目標(biāo)分子的定量測(cè)試。在對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè)中，得到了與GC-MS相關(guān)媲美的檢測(cè)結(jié)果。WANG等報(bào)道了一種利用氨基核酸適配子修飾碳量子點(diǎn)的DBP熒光檢測(cè)方法，該方法在對(duì)酒中DBP的高選擇性和高靈敏檢測(cè)中得到了成功應(yīng)用，其檢測(cè)回收率為93.2%～112.4%。在對(duì)痕量PAEs的測(cè)定中，常將熒光檢測(cè)方法與免疫檢測(cè)法相結(jié)合，以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性和靈敏度。

CUI等成功合成了含氨基的鄰苯二甲酸二異丁酯(diisobutyl phthalate，DIBP)半抗原，并制備了抗鄰苯二甲酸-牛血清白蛋白的多克隆抗體。以該多克隆抗體為基礎(chǔ)，首次建立了一種快速、靈敏的間接競(jìng)爭(zhēng)性熒光免疫分析法用以檢測(cè)食用油樣品中的DIBP。其檢測(cè)濃度范圍為10.47～357.06 mg/L，檢出限為5.82 mg/L，交叉反應(yīng)率小于1.5。ZHANG等開(kāi)發(fā)了一種高靈敏的競(jìng)爭(zhēng)性間接熒光免疫分析法，用以實(shí)現(xiàn)對(duì)鄰苯二甲酸二己酯(dicyclohexyl phthalate，DCHP)的特異性檢測(cè)。該方法以異硫氰酸熒光素為熒光標(biāo)記物，結(jié)合DCHP兔源多克隆抗體建立了DCHP的熒光免疫分析法，達(dá)到了0.1～200 mg/L的檢測(cè)范圍和0.05 mg/L的檢測(cè)限。

采用熒光檢測(cè)法對(duì)非熒光性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，常常涉及熒光物質(zhì)的修飾，操作步驟較為繁瑣，成本較高。此外，熒光檢測(cè)結(jié)果難以長(zhǎng)期保存。

3.3 電化學(xué)檢測(cè)法

電化學(xué)檢測(cè)法是現(xiàn)今發(fā)展最快速的食品安全檢測(cè)技術(shù)之一，是一種根據(jù)待檢溶液中物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)及其變化規(guī)律對(duì)物質(zhì)組分進(jìn)行定性和定量檢測(cè)的儀器分析手段，具有檢測(cè)快速、成本低廉、操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、選擇性好、便于實(shí)現(xiàn)對(duì)液態(tài)樣品的實(shí)時(shí)原位檢測(cè)等諸多優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)電極識(shí)別元件的不同，電化學(xué)傳感器可分為適配體電化學(xué)傳感器、分子印跡電化學(xué)傳感器、電化學(xué)免疫傳感器、納米材料電化學(xué)傳感器等。WU等采用指數(shù)富集配體進(jìn)化技術(shù)篩選了對(duì)DBP特異性結(jié)合的適配體，以適配體為DBP捕獲元件，進(jìn)一步構(gòu)建了DBP的電化學(xué)適配體傳感器，實(shí)現(xiàn)了對(duì)DBP的選擇性高靈敏檢出，為塑化劑適配體的篩選和選擇性檢測(cè)提供了新的方法。

陶強(qiáng)等以DINP為檢測(cè)目標(biāo)物，制備了DINP分子印跡聚合物，將之修飾于玻碳電極表面得到了可對(duì)DINP選擇性高靈敏檢出的分子印跡電化學(xué)傳感器。該傳感器可直接用于市售白酒樣品中DINP的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，無(wú)需樣品前處理，其檢測(cè)濃度范圍為50 nmol/L～1μmol/L，檢測(cè)限為27 nmol/L。適配體、分子印跡聚合物作為識(shí)別或富集元件在電化學(xué)檢測(cè)中具有其局限性，如適配體的修飾和分子印跡聚合物的低導(dǎo)電性等。對(duì)PAEs具有選擇性催化能力的功能納米材料常代替上述識(shí)別材料或與其相集合，用于對(duì)食品中PAEs的快速檢測(cè)。XIAO等構(gòu)建了一種以二茂鐵樹(shù)枝狀聚合物-氧化石墨烯修飾玻碳電極的鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)酯(dimethoxyethyl phthalate，DMEP)電化學(xué)傳感器。其中，樹(shù)枝狀高分子結(jié)構(gòu)為氧化石墨烯的負(fù)載提供了致密的基底，氧化石墨烯為二茂鐵樹(shù)枝狀聚合物氧化還原探針的沉積提供了大的比表面積，并提高了復(fù)合材料的導(dǎo)電性。

該傳感器依托優(yōu)異的納米材料實(shí)現(xiàn)了對(duì)白酒中DMEP的成功檢測(cè)，檢測(cè)范圍為0.06～1200μmol/L，最低檢出限為0.04 mol/L。LIANG等研制了一種新型的簡(jiǎn)單、無(wú)標(biāo)記的DBP電化學(xué)阻抗免疫傳感器，該傳感器的檢出限較低(7μg/L)，選擇性較高，抗環(huán)境干擾能力較強(qiáng)，具有對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行實(shí)時(shí)原位檢測(cè)的潛力。然而，如上文免疫檢測(cè)法所述，酶的穩(wěn)定性較低，易失活。

電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)具有原位檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)，但僅適用于液態(tài)樣品，且要求樣品具有良好的導(dǎo)電性。開(kāi)發(fā)新的電極材料與電極形式，提高電化學(xué)檢測(cè)的穩(wěn)定性和抗干擾能力是實(shí)現(xiàn)食品中PAEs快速原位檢測(cè)的有效途徑。

3.4 表面增強(qiáng)拉曼光譜法

SERS屬于分子振動(dòng)光譜，可反映分子的特征結(jié)構(gòu)，具有對(duì)目標(biāo)分子選擇性識(shí)別的作用，被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境檢測(cè)、化學(xué)成分分析、生物化學(xué)傳感、疾病診斷等研究領(lǐng)域。SERS檢測(cè)條件溫和、操作簡(jiǎn)單且無(wú)需樣品前處理，具有原位快速檢測(cè)的潛力，受到國(guó)內(nèi)外研究者的廣泛關(guān)注。金屬元素金、銀、鉑、銣等對(duì)SERS具有顯著的增強(qiáng)效果，常被用于對(duì)食品中PAEs的SERS檢測(cè)。周亞茹等利用液-液自組裝技術(shù)制備了金納米三棱柱，其在乙醇與正己烷之間緊密排列形成膜狀結(jié)構(gòu)，再以硅片為其載體可制備便攜式SERS基底，該基底對(duì)BBP和DEHP均達(dá)到了較低的檢出限，分別為0.1 mg/kg和0.05 mg/kg。

利用該SERS基底成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)酒中BBP的檢出。王欣如等以金納米三角片為模板制備了金-銀核層納米結(jié)構(gòu)(Au@Ag納米三棱錐)，并以該材料為SERS活性基底，結(jié)晶紫為探針，實(shí)現(xiàn)了對(duì)酒中BBP和DEHP的高靈敏檢測(cè)，檢測(cè)限分別為1 nmol/L和100 nmol/L。胡小燕等采用液-液界面自組裝技術(shù)，制備了金納米棒二維SERS基底膜(2D-SERS)，并以結(jié)晶紫為探針?lè)肿訉?duì)所構(gòu)建的2D-SERS進(jìn)行了測(cè)試，結(jié)果表明其對(duì)BBP的檢測(cè)具有良好的重現(xiàn)性和較高的靈敏度，檢測(cè)限可達(dá)50 nmol/L，該方法被成功應(yīng)用于市售白酒中中毒劑量BBP的檢測(cè)，表現(xiàn)出潛在的實(shí)際中應(yīng)用性。拉曼散射強(qiáng)度容易受光學(xué)系統(tǒng)參數(shù)等因素的影響，且易出現(xiàn)不同振動(dòng)峰重疊的現(xiàn)象，影響測(cè)試準(zhǔn)確性。

4 食品中PAEs檢測(cè)的難點(diǎn)

盡管食品中PAEs的檢測(cè)技術(shù)已有大量報(bào)道，如何實(shí)現(xiàn)PAEs的高效監(jiān)控，保障食品安全仍然面臨諸多挑戰(zhàn)：

樣品前處理工作復(fù)雜，無(wú)法實(shí)現(xiàn)大批量、現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

快速檢測(cè)技術(shù)有待加強(qiáng)。不僅要提高快速檢測(cè)方法的靈敏度，還應(yīng)該擴(kuò)大快速檢測(cè)方法的應(yīng)用范圍。

食品中17種常見(jiàn)的PAEs的限量標(biāo)準(zhǔn)尚未公布，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)者對(duì)檢測(cè)結(jié)果的判定，也不利于市場(chǎng)監(jiān)管。因此合理制定限制PAEs的標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)也是目前急需解決的問(wèn)題。

5 結(jié)束語(yǔ)

食品中PAEs的有效監(jiān)控對(duì)防止食品污染，保障人們飲食安全具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文對(duì)目前常用的食品中PAEs檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行了總結(jié)分析。傳統(tǒng)大型儀器檢測(cè)法具有檢測(cè)靈敏、準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)也存在設(shè)備昂貴、儀器操作復(fù)雜等不足之處；快速檢測(cè)技術(shù)具有檢測(cè)快速、成本低廉、適于原位檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)，也具有準(zhǔn)確性低、適用范圍受限等缺點(diǎn)。食品種類(lèi)繁多，不同種PAEs物理化學(xué)性質(zhì)亦有差異，根據(jù)不同的檢測(cè)需求靈活選擇合適的檢測(cè)方法，或者采用多種檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合的方式是實(shí)現(xiàn)食品中PAEs高效檢測(cè)的有效手段。同時(shí)，發(fā)展更為完善的PAEs檢測(cè)新模式并加以推廣應(yīng)用將成為未來(lái)食品中PAEs檢測(cè)的主要發(fā)展方向。

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