利用蝙蝠蛾擬青霉進行人工深層發(fā)酵培養(yǎng)所得的菌絲體產物是野生蟲草的常用替代品。本文介紹了蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的研究概況，總結了其液體深層發(fā)酵的研究進展、化學成分與藥理作用，闡述了研究前景，以期為蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的開發(fā)利用提供參考。

冬蟲夏草(Cordycepssinensis)是一種寄生于蝙蝠蛾幼蟲的蟲生真菌及其寄主蝙蝙蝠蛾幼蟲尸體構成的蟲菌復合體，具有益腎補肺、祛痰止咳等功效，為珍貴的中藥材，藥用歷史悠久。冬蟲夏草對咯血、癆嗽、虛喘精、腰膝酸軟、自汗盜汗等病癥均有療效。蝙蝠蛾擬青霉為叢梗孢科瓶梗青霉屬真菌，是從新鮮冬蟲夏草的子座中分離獲得，并經鑒定命名的一種蟲草菌?，F(xiàn)代藥理學證明，發(fā)酵蟲草菌絲體與冬蟲夏草有效成分類似，具有相似的藥理作用。因為發(fā)酵方法成本相對較低且條件易于控制，目前利用液體深層發(fā)酵方法進行工業(yè)化生產菌絲體，已成為解決當前蟲草資源匱乏的重要途徑之一。

1蝙蝠蛾擬青霉菌絲體研究概況

蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyceshepiali)是從新鮮冬蟲夏草中分離所得的隸屬叢梗孢科(Moniliaceae)瓶梗青霉屬(PaecilomycesBain)蟲生真菌。1982年，中國醫(yī)學科學院藥物研究所的研究人員從青?；〔杉男迈r冬蟲夏草中分離得到了Cs-4菌株，經鑒定可知，該Cs-4菌株是蝙蝠蛾擬青霉。此外，1982年，中國中醫(yī)科學院中藥研究所有關學者從云南迪慶采集的冬蟲夏草樣品中分離獲得的菌株，經培養(yǎng)與形態(tài)學研究，可將其鑒定為蝙蝠蛾擬青霉。蝙蝠蛾擬青霉菌絲體是利用蝙蝠蛾擬青霉通過人工深層發(fā)酵培養(yǎng)所得，已作為冬蟲夏草的代用品在中成藥和保健食品中廣泛使用。目前，市場上的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體產品主要為金水寶膠囊。

2蝙蝠蛾擬青霉菌絲體培養(yǎng)方法

當前，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的培養(yǎng)已不僅僅停留在搖瓶和小罐發(fā)酵的試驗水平上，許多菌絲體產品已經步入工業(yè)化大生產。蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的液體深層發(fā)酵培養(yǎng)大多以葡萄糖或淀粉類物質為碳源，動植物蛋白為氮源，并且工業(yè)化生產菌絲體的培養(yǎng)基中含有的天然成分足以滿足營養(yǎng)需求，并不需要再增加氨基酸等。已有很多學者對蝙蝠蛾擬青霉菌絲體液體深層發(fā)酵培養(yǎng)進行研究。

尚靜德等用正交試驗法選出了最佳發(fā)酵培養(yǎng)基，配方為2%葡萄糖、0.8%乳糖、1%氨基酸復合粉、0.1%硫酸鋅、0.1%硫酸鎂、0.1%磷酸二氫鉀、15%馬鈴薯。姜文俠等[7]以20m3發(fā)酵罐進行發(fā)酵培養(yǎng)，對發(fā)酵菌絲體主要成分進行分析檢測可得，菌絲體收率為2.5%，腺苷含量為0.24%，甘露醇含量為8.3%。馮健等采用液體深層發(fā)酵法培養(yǎng)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體，得到了最佳發(fā)酵條件，結果表明，以玉米漿、玉米粉為主要原料，添加硫酸鎂和磷酸氫二鉀為輔助原料，在搖瓶裝量10%、搖床轉速150r/min、培養(yǎng)溫度18～20℃、培養(yǎng)周期72h條件下，菌絲收率最高可達18.1g/L。

張倩等對蝙蝠蛾擬青霉菌絲體高產腺苷液體培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，結果表明，在搖瓶裝量100mL(250mL)、接種量5%、搖床轉速140r/min、溫度25℃、發(fā)酵周期6d的條件下，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體高產腺苷液體發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳配方為2%葡萄糖、2%酵母浸出粉、0.05%硫酸鋅、0.05%硫酸錳，同時該培養(yǎng)基下培養(yǎng)出蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中腺苷含量較優(yōu)化前提高了390%，達到2.85mg/g。

鞏伯梁等采用響應面法對蝙蝠蛾擬青霉菌絲體液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方進行了優(yōu)化，結果表明，在含有8.25%馬鈴薯、1%蔗糖、0.81%蠶蛹粉、1%玉米粉、0.5%蛋白胨、0.1%磷酸二氫鉀、0.1%硫酸銨、0.1%硫酸鎂等的培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中腺苷含量可達3.44mg/g。殷海松等采用單因素試驗法研究不同培養(yǎng)基成分對胞外多糖生產和蝙蝠蛾擬青霉菌絲體生物量的影響，結果表明，最優(yōu)蝙蝠蛾擬青霉菌絲體液體發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基為土豆200g/L、葡萄糖30g/L、蛋白胨15g/L、MgSO4·7H2O1.5g/L、KH2PO43.0g/L；采用最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基，在搖瓶培養(yǎng)條件下，獲得的最大胞外多糖產量和最大菌絲體生物量分別較優(yōu)化前提高了48.1%、34.6%，含量分別為2.80、24.99g/L。

張命龍等通過液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)，以菌絲體生物量和腺苷含量為主要指標，確定了搖瓶發(fā)酵高產菌絲體和腺苷的培養(yǎng)基配方，最佳配方為葡萄糖5g/L、玉米淀粉40g/L、玉米漿25g/L、磷酸二氫鉀1g/L、硫酸鋅1.5g/L、MgSO4·7H2O1g/L、VB125mg/L；適宜培養(yǎng)條件為搖瓶裝量150mL(500mL)、8%接種量、初始pH值6.0、轉速120r/min、溫度26℃、培養(yǎng)時間7d；在該發(fā)酵條件下，菌絲體生物量為25.2g/L，并對菌絲體中腺苷含量進行高效液相色譜(HPLC)檢測，腺苷含量達到2.76mg/g。

3蝙蝠蛾擬青霉菌絲體的化學成分

蝙蝠蛾擬青霉菌絲體主要含有腺苷、蟲草多糖、蟲草素、甾醇類物質、氨基酸和多種無機元素等。許春燕等系統(tǒng)分析了蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體的主要營養(yǎng)與活性成分，包括13種脂肪酸、18種必需氨基酸以及8種微量元素；此外，在蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中還有較高含量的粗多糖、核苷、多酚(2.59mg/g)和三萜(4.89mg/g)等活性成分。洪志來等采用硅膠柱、凝膠柱、高效液相色譜等技術對用95%乙醇提取蝙蝠蛾擬青霉菌絲體進行分離純化后得到了11個化合物，經鑒定，分別為(22E,24R)-麥角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇、(22E,24R)-麥角甾-7,9,22-三烯-3β-醇、(22E,24R)-麥角甾-6β-甲氧基-7,22-二烯-3β,5α-二醇、環(huán)(亮-色)二肽、環(huán)(異亮-色)二肽、環(huán)(纈-色)二肽、胡蘿卜苷、4-(2-甲?；?5-羥甲基-1-氫-吡咯-1-基)丁酸、4-(2-甲?；?5-甲氧基甲基-1-氫-吡咯-1-基)丁酸、5-羥甲基糠酸和琥珀酸等，其中除了(22E,24R)-麥角甾-6β-甲氧基-7,22-二烯-3β,5α-二醇、環(huán)(亮-色)二肽、5-羥甲基糠酸和琥珀酸以外，其他均為首次從擬青霉屬真菌中分離得到。

樊曉飛等用梯度提取、反復重結晶分離和純化，共分離得到7個化合物，并且采用NMR等譜學方法進行了化學成分的分析，分別檢測出麥角甾醇、β-谷甾醇、4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麥角甾烷、啤酒甾醇、麥角甾醇過氧化物、甘露醇和1-油?；?2-亞油酸-3-棕櫚酸甘油等化合物。采用GC-MS進一步分析石油醚提取物中的油狀組分，經分析鑒定主要為亞油酸和反油酸。于洪飛以腺苷和D-甘露醇為評價指標，并優(yōu)化復合酶法提取工藝對蝙蝠蛾擬青霉菌絲體進行提取，使甘露醇和腺苷的含量分別占提取物的12.56%和2065μg/g。仲偉鑒等比較了蝙蝠蛾擬青霉菌絲體與天然蟲草中的無機元素含量，共檢測出28種無機元素，其中鈣、鉀、鎂、鋅、鎳、硼和鍶等7種元素在蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中的含量高于天然蟲草，其他組分含量的分布趨勢與天然蟲草基本一致。

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