獼猴桃亦稱羊桃、陽(yáng)桃，獼猴桃科，屬于漿果，落葉木質(zhì)藤本植物果實(shí)，維生素 C 含量豐富。食用獼猴桃有降低血中膽固醇濃度、預(yù)防心血管疾病、促消化、降血脂、防治動(dòng)脈硬化、改善心肌功能、防治心臟病、防癌抑腫瘤、增強(qiáng)體質(zhì)等功能。鐵是人體必需微量元素之一，與人類健康有著密切的關(guān)系。鐵離子血紅蛋白的重要組成成分，也是部分氧化還原反應(yīng)所需酶激活劑。羅瑩[1]以磺基水楊酸與鐵的絡(luò)合物為例，研究了磺基水楊酸和鐵可用于檢測(cè)絡(luò)合鐵中鐵離子的濃度。

本實(shí)驗(yàn)采用抗壞血酸為還原劑，鄰二氮菲為顯色劑，用可見法測(cè)定汶川縣三江鎮(zhèn)獼猴桃中鐵元素的含量，并進(jìn)一步探還原劑加入量、顯色劑加入量、放置時(shí)間、反應(yīng)溫度等因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，最后繪制出來了汶川獼猴桃標(biāo)準(zhǔn)亞鐵的標(biāo)準(zhǔn)曲線。本方法操作簡(jiǎn)便，實(shí)用范圍廣，準(zhǔn)確度高、精密度好，重現(xiàn)性好，回收率高。

1 實(shí)驗(yàn)材料與操作

1.1器材及材料選取

材料：獼猴桃 500 g(汶川縣三江鎮(zhèn)農(nóng)戶)：FW-100 高速萬(wàn)能粉碎機(jī)；T6 新世紀(jì)紫外分光光度計(jì)；
DHG-9075AD 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱；DL-1 萬(wàn)用電熱爐；BSM120.4分析電子天平；SX2-4-10 馬弗爐。

試劑：鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.010 mg/mL)：稱取 0.0441 g 鐵粉溶于濃鹽酸 7.0 mL，轉(zhuǎn)移至 1000 mL 容量瓶中，移取 10.0 mL 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液于 100 mL 容量瓶中，稀釋并定容至刻度線，即可獲得 0.010 /mL 的鐵離子濃度。乙酸—乙酸鈉緩沖溶液：稱取 0.32 g 無(wú)水醋酸鈉于燒杯中，加入少許蒸餾水，并加入 5.0 mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 98 %的乙酸，努力攪拌。攪拌均勻后，轉(zhuǎn)移到 100 mL 容量瓶中，稀釋并定容到刻度線，即得。鄰二氮菲溶液(1.5 g/L)：準(zhǔn)確稱取0.15 g鄰二氮菲溶于約2 mL無(wú)水乙醇中，充分混勻后，移入 100 mL 容量瓶中并定容到刻度線，并避光保存。抗壞血酸溶液(5 g/L)：稱取 0.5 g 抗壞血酸溶于一定量的蒸餾水中，轉(zhuǎn)移至 100 mL 容量瓶中并定容到刻度線，即可。

1.2 樣品處理

準(zhǔn)確稱取 1.0000 g 烘干的獼猴樣品于瓷坩鍋中，慢慢用小火在可調(diào)式電爐上炭化至無(wú)煙，隨后移入馬弗爐中，用 800 ℃灰化2 h，再冷卻。在可調(diào)式電爐上小火加熱，需要重復(fù)多次確保能消化完全?；一蠓爬?，用濃度為 4 mol/L 鹽酸將灰化留下的灰分，然后將該消化液移入 25.0 mL 容量瓶中并定容至刻度，搖勻，待測(cè)。

1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

準(zhǔn)備 6 個(gè) 25 mL 的容量瓶，分別移取 0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL 的 0.010 mg/mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后再分別依次加入 5.0 mL 乙酸—乙酸鈉緩沖溶液、1.00 mL 抗壞血酸、2.00 mL鄰二氮菲溶液，加完溶液后用蒸餾水稀釋至刻度線，搖勻，大約放置 15 min 后于 510 nm 處測(cè)各溶液的吸度，以蒸餾水做參比，濃度溶液做空白對(duì)照，扣除空白溶液吸光度后，以吸光度為縱坐標(biāo)，鐵濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，并計(jì)算出該曲線圖的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)。該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明該曲線線性回歸方程為：Y=78.159X，線性相關(guān)系數(shù) R=0.9999，線性相關(guān)良好。

1.4 樣品測(cè)定

準(zhǔn)確移取事先處理好的獼猴桃消化液 5.0 mL，置于 25 mL 容量中，隨后依次加入 1.0 mL 抗壞血酸溶液、5.0 mL 乙酸—乙酸鈉緩沖溶液、2.0 mL 鄰二氮菲溶液，搖勻，加完溶液后用蒸餾水稀釋至刻度線，靜置 15 分鐘。用紫外可見分光光度計(jì)在 510 nm 波長(zhǎng)處以 0.00 mL 鐵標(biāo)液為空白進(jìn)行參比校正，測(cè)定樣品的吸光度，并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出樣品中鐵的含量，平行做三次取平均值。實(shí)驗(yàn)測(cè)得該獼猴桃中鐵的含量為 0.1383 mg/g。

2 影響因素的討論與結(jié)論

2.1 還原劑加入量對(duì)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的影響

取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶，在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液 2.00mL 鄰二氮菲，最后依次分別加入 1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL 抗壞血酸，最后定容至刻線，搖勻放置 15 min 后于 510 nm 處測(cè)其吸光度。

2.2 顯色劑加入量對(duì)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的影響

取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶，在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液、2.00 mL 抗壞血酸、最后分別加入 1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL 鄰二氮菲，定容至刻度線，搖勻，放置 15 min 后于 510 nm 處測(cè)其吸光度。

2.3 放置時(shí)間對(duì)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的影響

取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶，在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液 2.00 mL 抗壞血酸，2.00 mL 鄰二氮菲溶液，最后用蒸餾水定容至刻度，搖勻，分別放置 15 min、20 min、25 min、30 min、35 min、40 min、45 min 后于 510 nm 處測(cè)其吸光度。

2.4 反應(yīng)溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的影響

取 7 個(gè) 25 mL 容量瓶，在每一個(gè)容量中準(zhǔn)確移取 2.00 mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液 2.00 mL 抗壞血酸，2.00 mL 鄰二氮菲溶液，最后用蒸餾水定容至刻度線，搖勻，分別放在 15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃、45 ℃恒溫水浴鍋中，放置 15 min 后于 510 nm 處測(cè)其吸光度。

3 結(jié)語(yǔ)

本方法以抗壞血酸為還原劑，鄰二氮菲為顯色劑，在 510 nm波長(zhǎng)處測(cè)得三江獼猴桃中鐵元素含量為 0.1383 mg/g，說明三江獼猴桃中鐵元素含量較高，該種獼猴桃鐵含量?jī)H次于紅棗中的鐵元素，缺鐵的大眾朋友可以多吃該種獼猴桃來補(bǔ)充鐵元素含量。本方法操作簡(jiǎn)便，實(shí)用范圍廣，準(zhǔn)確度高、精密度好，重現(xiàn)性好，回收率高，為消費(fèi)者和獼猴桃加工企業(yè)提供參考依據(jù)。

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