2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實驗

2.1.1 料液比對IHP提取率的影響

由圖1可知，IHP提取率隨料液比的增加而提高，其中當(dāng)料液比在小于1:30g:mL時，IHP提取率隨料液比比例的增加而顯著提高（P＜0.05），當(dāng)料液比大于1:30g:mL時，IHP提取率增加不顯著（P＞0.05）。當(dāng)料液比小于1:30g:mL時，由于提取溶劑的量過少，IHP提取液中多糖處于飽和狀態(tài)，粗毛纖孔菌中的多糖無法進(jìn)一步溶出，此時隨著提取溶劑量的增加，多糖不斷溶出，提取率也在增加。但是當(dāng)料液比大于1:30g:mL時，粗毛纖孔菌中多糖已經(jīng)大量溶出至提取溶劑中，而提取溶劑中多糖也沒有達(dá)到飽和狀態(tài)，因此即使增加提取溶劑用量，IHP提取率變化不大，差異性不顯著（P＞0.05），所以選取最佳料液比為1:30g:mL。

2.1.2 超聲時間對IHP提取率的影響

由圖2可知，IHP的提取率隨超聲波作用時間的增加而增加，主要是由于超聲波作用時間增加，粗毛纖孔菌細(xì)胞破裂，多糖不斷溶出，在50min時達(dá)到最大值，60min多糖的提取率略微降低，可能原因是超聲波作用時間過長對多糖的結(jié)構(gòu)會產(chǎn)生影響，會導(dǎo)致多糖降解，影響多糖的生物活性。選取最優(yōu)超聲時間為50min。
 

2.1.3 超聲功率對IHP提取率的影響

由圖3可知，隨著超聲功率的增大，IHP的提取率先增大后減小在200W處達(dá)到最大值，300W處有下降趨勢，但是差異不顯著（P＜0.05），300W之后開始降低，可能是在較大的超聲功率下，超聲波的振動作用、空化效應(yīng)和粉碎作用過強(qiáng)，從而導(dǎo)致多糖結(jié)構(gòu)受到破壞從而損失，導(dǎo)致多糖的提取率降低。陳宇航等研究超聲微波協(xié)同提取豆渣水溶性多糖發(fā)現(xiàn)，超聲功率超過300W，多糖分子在較強(qiáng)的機(jī)械作用下發(fā)生斷裂，從而引起提取率的急劇下降。因此選擇超聲功率為200W作為最佳超聲功率。

2.1.4 微波功率對IHP提取率的影響

由圖4可知，隨微波功率的增加，IHP的提取率增加，微波功率為100～300W時，多糖的提取率增加顯著（P＜0.05），可能是由于微波功率增加，微波作用的強(qiáng)度增大，對細(xì)胞的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜產(chǎn)生破壞作用，促進(jìn)多糖的釋放，從而提高多糖提取率。微波功率為300～600W時，多糖的提取率有所增加，變化不顯著（P＞0.05），趨于平穩(wěn)，主要原因為在微波功率300W時，原料中的多糖已經(jīng)被最大限度提出來，因此多糖提取率不會繼續(xù)升高，與最大值基本保持一致。最佳微波功率選取范圍為200～600W。

2.1.5 微波時間對IHP提取率的影響

由圖5可知，IHP的提取率隨微波作用時間的增加而增加，在微波時間為50s時，提取率達(dá)到最大值，60s時多糖的提取率略微下降，可能是由于微波作用的時間過長，導(dǎo)致多糖發(fā)生熱降解，導(dǎo)致提取率下降。考慮到微波作用時間為60s時，多糖的提取率與50s時多糖的提取率相比，差異性不顯著（P＞0.05），且微波作用時間過長可能對多糖活性有影響，因此選取50s作為最佳微波時間。

2.2 響應(yīng)面試驗結(jié)果

2.2.1 響應(yīng)面優(yōu)化試驗設(shè)計及結(jié)果

綜合單因素實驗結(jié)果，固定超聲功率200W，選取料液比、超聲時間、微波時間和微波功率四個影響因素作為自變量，多糖提取率作為因變量，根據(jù)Box-Behnken的原理，使用DesignExpert8.0軟件進(jìn)行響應(yīng)面分析。實驗共29個試驗點(diǎn)，包括5個中心點(diǎn)。表2是響應(yīng)面優(yōu)化實驗的設(shè)計方案及結(jié)果。

相關(guān)鏈接：多糖，胃蛋白酶，胰蛋白酶

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