一、氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)

氣質(zhì)聯(lián)用是應(yīng)用最為廣泛的一種聯(lián)用技術(shù)。四級桿和離子阱質(zhì)譜儀由于結(jié)構(gòu)簡單、價格便宜、掃描速度快，是與氣相色譜聯(lián)用較多的質(zhì)譜儀。采用氣質(zhì)聯(lián)用分析，可得到樣品中各組分準(zhǔn)確的相對分子質(zhì)量及其結(jié)構(gòu)單元信息。

(一)氣質(zhì)聯(lián)用分析中得到的信息

氣質(zhì)聯(lián)用分析中得到的信息主要包括如下幾個方面。

(1)總離子流色譜圖(Total Ion curTent Chromatogram，TIC) ：樣品中各種質(zhì)量的碎片，先被離子光學(xué)系統(tǒng)聚焦，進(jìn)入質(zhì)譜質(zhì)量分析器之前，在離子源與質(zhì)量分析器之問，通過總離子流檢測器，收集離子的信號，經(jīng)數(shù)據(jù)處理得到對應(yīng)于色譜每個峰的信號，即為總離子流色譜圖。總離子流色譜圖中的每個峰，都可同時給出相應(yīng)的質(zhì)譜碎片峰圖，并可由此分析各峰的分子結(jié)構(gòu)組成?？傠x子流色譜圖與氣相色譜圖一樣，可給出各峰的保留時間、峰高和峰面積等參數(shù)，這些信息均可作為峰的定量參數(shù)。一般地，總離子流色譜圖中各峰的靈敏度高于氣相色譜圖中各峰的靈敏度。

(2)質(zhì)量色譜圖(Mass Chromatogram，MC)：質(zhì)譜對色譜中的每個峰掃描后，以一定質(zhì)荷比的離子強(qiáng)度對應(yīng)離子出現(xiàn)時間作圖，就得到質(zhì)量色譜圖。質(zhì)量色譜圖可得到不同質(zhì)荷比的離子對應(yīng)不同組分的色譜圖，因此可對色譜中不同保留時問的峰所對應(yīng)的化合物進(jìn)行定性分析。此外，當(dāng)色譜峰分離不完全時，可將峰中包含不同質(zhì)荷比的組分進(jìn)行分離。

(3)重建總離子流圖(Re—Total Ion current Chromatogram，RTIC)和重建質(zhì)譜圖(Re一Mass Chromatogram，RMC)：質(zhì)量色譜圖中每個峰的極大值對不同掃描序號作圖，就得到重建總離子流圖。重建總離子流圖可消除由于儀器本底、柱流失及色譜峰分離不完全等情況造成的總離子流圖中色譜峰的重疊，得到分辨率更高的總離子流圖。重建總離子流圖中每個峰所對應(yīng)的質(zhì)譜碎片圖，即稱為重建質(zhì)譜圖。重建質(zhì)譜圖得到的質(zhì)譜圖的“純度”和可靠性均高于一般質(zhì)譜圖。

(4)質(zhì)量碎片圖(Mass Fragment，MF)：在氣相色譜／質(zhì)譜聯(lián)用的分析過程中，事先一般不知樣品組分的相對分子質(zhì)量范圍，因此常選擇較大的質(zhì)量范圍進(jìn)行掃描，得到的總離子流色譜圖和各峰的質(zhì)量碎片圖，其中包含了較多的結(jié)構(gòu)信息。若掃描時間過長，則引起總離子流色譜圖的強(qiáng)度較低，對含量低的組分，往往難于檢測，從而某些組分的信息無法得到。質(zhì)量碎片圖是質(zhì)譜分析中最為重要且使用最多的一組數(shù)據(jù)圖譜，其中包含了豐富的物質(zhì)結(jié)構(gòu)信息，可以用于譜庫檢索或推測物質(zhì)結(jié)構(gòu)。但分析過程中，掃描的質(zhì)量范圍不宜過寬。

(5)選擇離子檢測(Select Ion Detector，SID)：當(dāng)對樣品中的一些特定微量組分進(jìn)行分析時，將掃描過程改變?yōu)檫x定一個或數(shù)個質(zhì)量數(shù)，這種方法稱為選擇離子檢測。選擇離子檢測通常用設(shè)定加速電壓的方法實現(xiàn)。選擇離子檢測方法的靈敏度較高，一般高于總離子流色譜法2～3個數(shù)量級，且可以利用碎片質(zhì)量的不同，很好地分析那些色譜分離不完全或未分離的峰。由于選擇離子檢測可多次采樣和掃描，能有效地減少質(zhì)譜分析的誤差，特別適合樣品中微量成分的分析，某些分析的靈敏度甚至可達(dá)Pg的水平。

(二)氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用

采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析了白蘭精油的化學(xué)成分，并用Saturn及NIST譜庫對質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索，共分離、鑒定了57種化學(xué)物質(zhì)。

(1)色譜條件為：CP-SIL8CB低流失柱，30m×0.25mm(id)×0.25μm(df)；載氣：He，流速：0.8mL/min；進(jìn)樣口：250⁰C；進(jìn)樣量：1.01μL；分流比：20:1；柱溫箱程序升溫：120％，維持3min，4℃/min升至250⁰C，維持2min。

(2)質(zhì)譜條件為:離子源溫度150℃；電離方式：EI；電子能量：70eV；掃描范圍：30～650u。

二、液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)

盡管氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)解決了許多復(fù)雜體系樣品的定性與定量分析的問題，但由于氣相色譜僅對熱穩(wěn)定性好、易揮發(fā)的小分子質(zhì)量化合物有較好的分析效果，因此其所能分析的物質(zhì)僅占有機(jī)物總數(shù)的20％左右。

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)即利用液相色譜對物質(zhì)進(jìn)行分離、質(zhì)譜進(jìn)行物質(zhì)定性的方法對物質(zhì)進(jìn)行分析。由于液相色譜的應(yīng)用范圍較為廣泛，與質(zhì)譜聯(lián)用以后，即可用于分析沸點(diǎn)較高、相對分子質(zhì)量較大的有機(jī)物質(zhì)。

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在有機(jī)物分析中的應(yīng)用始于20世紀(jì)80年代，目前已開發(fā)出了許多類型的液質(zhì)聯(lián)用儀器及其相關(guān)技術(shù)。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的關(guān)鍵在于：如何將液相色譜過程使用的流動相與樣品分開，如何使極性大、難揮發(fā)、相對分子質(zhì)量大的樣品完全離子化并引入質(zhì)譜分析器。

(一)接口技術(shù)

液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的接口技術(shù)中，曾分別采用了熱噴霧(Thermospray，F(xiàn)SP)、粒子束噴霧(Panicle Beam Spray，PBS)和電噴霧(Electrospray Ionisation，ESI)等三種技術(shù)，大氣壓電離式的電噴霧(Atmospheric Pressure Chemical Ionization，APCI)是目前液質(zhì)聯(lián)用過程中較為理想的接口技術(shù)。

電噴霧接口是一種較為新型的接口，其分析物質(zhì)的最大分子質(zhì)量可達(dá)幾十萬，準(zhǔn)確度可達(dá)O.01％，且靈敏度也較高。電噴霧接口的基本原理是：樣品溶液從石英毛細(xì)管引入電噴霧接口中，在毛細(xì)管和電極板之間施加電壓，使樣品溶液形成高度分散的帶電液滴；同時以一定的流速通入高溫、干燥的氮?dú)?，由于壓差的作用，使樣品通過取樣孔進(jìn)入真空區(qū)，帶電霧滴中的溶劑進(jìn)一步蒸發(fā)后成為帶多電荷的溶質(zhì)分子，通過第二個取樣孔而進(jìn)入質(zhì)譜分析器，各種粒子的質(zhì)荷比即被測量并逐個記錄下來。

質(zhì)譜技術(shù)中使用的分析器主要包括：四級桿(Quadinpole，Q)、離子阱(IonTraps，IT)和飛行時間儀(Time 0f Flight，TOF)等。

(二)液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)是多殘留分析及快速篩選的較好方法。液質(zhì)聯(lián)用過程中，首先將混合物分離為單一組分，然后再用質(zhì)譜檢測器進(jìn)行檢測。與其他方法相比，可以排除基質(zhì)的干擾，避免離子抑制現(xiàn)象，并優(yōu)化質(zhì)譜檢測結(jié)果。

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)主要應(yīng)用于動物組織中多種合成抗菌劑的篩選與確認(rèn)，農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥、獸藥殘留以及激素分析等。

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對物質(zhì)分析效果，與被分析物的性質(zhì)、液相分離使用的流動相、緩沖液的種類及流速以及質(zhì)譜的離子化技術(shù)直接相關(guān)。由于每種物質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì)各不相同，因此若樣品中含有的物質(zhì)組分較多時，很難找出一個可以將所有物質(zhì)同時離子化并適合液質(zhì)分析的條件。為了得到準(zhǔn)確的分析結(jié)果，一個樣品通常需要采用幾種不同的離子化方法進(jìn)行分析，與此同時，各種檢測方法應(yīng)有足夠的靈敏度。

綜上所述，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的分析效果受較多因素的影響，諸如分子離子峰、碎片離子峰豐度等分析結(jié)果均可能因操作條件的不同而不同。物質(zhì)通過質(zhì)譜分析得到的結(jié)果一般僅為分子離子峰和部分碎片離子峰，即從液質(zhì)聯(lián)用圖譜中得到的物質(zhì)結(jié)構(gòu)信息是十分有限的，要獲得更多、更為準(zhǔn)確的結(jié)構(gòu)信息，可采用連續(xù)質(zhì)譜技術(shù)(MS/MS)，即通過對分子離子峰的進(jìn)一步碰撞，產(chǎn)生與結(jié)構(gòu)相關(guān)的碎片離子峰。由于液相/質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC/MS／MS)聯(lián)用技術(shù)分析結(jié)果的重現(xiàn)性較好，近年來又相繼開發(fā)出了LC/MS/MS數(shù)據(jù)庫，使該技術(shù)的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，成為目前天然產(chǎn)物篩選和分析的重要手段之一。

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