目標(biāo)化合物比對(duì)NIST譜庫(kù)后的得分高低、箱線圖分散性大小，并不能完全成為確立目標(biāo)化合物的僅有數(shù)據(jù)，化合物在對(duì)齊期間還存在條目標(biāo)注錯(cuò)誤以及統(tǒng)計(jì)分析期間結(jié)果假陽(yáng)性的可能，此時(shí)需要提取采集的原始數(shù)據(jù)信息來(lái)驗(yàn)證所選的目標(biāo)化合物是真實(shí)存在的化合物。圖5為4個(gè)目標(biāo)化合物在15個(gè)原始數(shù)據(jù)中的提取色譜圖，由圖可知4個(gè)目標(biāo)化合物在摻加花生油香精大豆油與大豆油和花生油中均具有明顯差異，其中a）中2，3，5-三甲基吡嗪的提取色譜圖在3種植物油的峰面積上差異較為明顯，不僅在花生油中存在，且在6種摻加花生油香精大豆油中均存在。王李平等、胡為等分別使用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件、Matlab軟件編程的方法對(duì)氣相質(zhì)譜GC-MS得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行研究分析，得出包括2，3，5-三甲基吡嗪在內(nèi)的花生油香精特征成分組。于叢叢等、喻晴等的研究表明，2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中也是廣泛存在的。以上研究結(jié)果與本文的研究結(jié)果相吻合。通過(guò)以上分析，將目標(biāo)化合物2，3，5-三甲基吡嗪確立為最終的定量標(biāo)記化合物。

3、目標(biāo)化合物的方法學(xué)確證

用大豆油稀釋2，3，5-三甲基吡嗪標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，制作濃度梯度分別為10、30、100、500、1000、5000、10000、20000、50000μg/L的標(biāo)準(zhǔn)曲線并使用合適的條件測(cè)定，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為：Y=338.992X-453.751，線性相關(guān)系數(shù)（r2）為0.997。平行測(cè)定20次大豆油的2，3，5-三甲基吡嗪空白值，根據(jù)GB/T27404-2008計(jì)算得出測(cè)定低限為26.507μg/L。

由于2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中也是廣泛存在的，測(cè)定花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的本底值就是測(cè)定方法建立的關(guān)鍵一環(huán)。測(cè)定26個(gè)花生油的2，3，5-三甲基吡嗪的響應(yīng)值，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線得出濃度值的平均值為253.948μg/L，計(jì)算26個(gè)數(shù)據(jù)的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差與斜率（3*SD/k）的比值為363.940μg/L，本文認(rèn)為用兩者之和表征花生油的2，3，5-三甲基吡嗪擬定本底值較為合理，本底值為618μg/L（表3）。對(duì)擬定本底值和花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量進(jìn)行t檢驗(yàn)分析，結(jié)果顯示t=13.42＞2.09（t0.025/19），P＜0.05，說(shuō)明在95%置信水平下，擬定本底值和26個(gè)花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量差異顯著，也就是說(shuō)，擬定的本底值具有代表性。測(cè)定6個(gè)摻加花生油香精大豆油中2，3，5-三甲基吡嗪的濃度值，計(jì)算所得平均值為5458.601μg/L，標(biāo)準(zhǔn)偏差為3465.126μg/L，平均值約為花生油平均值的21.5倍，約為擬定本底值的8.8倍。對(duì)擬定本底值和摻偽植物油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量進(jìn)行t檢驗(yàn)分析，結(jié)果顯示t=3.42＞2.57（t0.025/5），P＜0.05，說(shuō)明在95%置信水平下，擬定本底值和摻偽植物油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量差異顯著，擬定的本底值具有代表性。

根據(jù)GB/T27404-2008，選取測(cè)定低限、本底值、5000μg/L三個(gè)水平進(jìn)行重復(fù)6次的2，3，5-三甲基吡嗪濃度值測(cè)定，計(jì)算得出變異系數(shù)參見(jiàn)表3，以上精密度的數(shù)據(jù)均符合GB/T27404-2008的方法學(xué)要求。對(duì)以上三個(gè)水平的數(shù)據(jù)計(jì)算加標(biāo)回收率，回收率范圍參見(jiàn)表3，均符合GB/T27404-2008的方法學(xué)要求。

4、實(shí)際樣品測(cè)定

對(duì)購(gòu)買(mǎi)于市場(chǎng)的6個(gè)花生油中2，3，5-三甲基吡嗪的含量進(jìn)行測(cè)定，不同種類(lèi)的花生油香精最佳使用濃度范圍，制定合適的濃度梯度，用大豆油稀釋花生油香精到適合的濃度，在50mL離心管中混和均勻，備用。選取10位評(píng)鑒員，獨(dú)立進(jìn)行嗅覺(jué)檢驗(yàn)法的感官實(shí)驗(yàn)，評(píng)選出最適應(yīng)普遍嗅覺(jué)系統(tǒng)的濃度值，也就是最接近日常銷(xiāo)售花生油嗅覺(jué)的濃度值。測(cè)定結(jié)果參見(jiàn)表4，由表中可知，2，3，5-三甲基吡嗪的含量均低于本底值618μg/L。綜上所述，以2，3，5-三甲基吡嗪的本底值為618μg/L來(lái)考量，6個(gè)花生油均不是以2，3，5-三甲基吡嗪為主要增香成分的含有花生油香精的摻偽花生油。

三、結(jié)論

本文采用頂空氣相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)花生油、大豆油和摻加花生油香精大豆油的揮發(fā)性成分進(jìn)行采集，結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)分析的組學(xué)分析方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行逐步過(guò)濾和分析研究，確定出響應(yīng)強(qiáng)度高、線性關(guān)系好、定量準(zhǔn)確性高、測(cè)定相對(duì)最為穩(wěn)定的差異化合物2，3，5-三甲基吡嗪作為花生油中花生油香精摻偽的定量標(biāo)記化合物，2-乙酰噻唑、乙酰吡嗪和2-乙酰基吡啶作為定性標(biāo)記化合物參考使用。并計(jì)算出了2，3，5-三甲基吡嗪在花生油中的本底值，進(jìn)而建立一個(gè)通過(guò)測(cè)定花生油中2，3，5-三甲基吡嗪含量來(lái)判斷花生油是否進(jìn)行以2，3，5-三甲基吡嗪為主要增香成分的香精類(lèi)摻偽的可行的測(cè)定方法，并進(jìn)行了方法學(xué)確證。本文建立的方法具有可操作性強(qiáng)、試劑使用少、便捷快速、準(zhǔn)確性高、應(yīng)用范圍廣的優(yōu)點(diǎn)，為香精類(lèi)的花生油摻偽判斷提供一種可行的測(cè)定方法，也為花生油的原料采購(gòu)、企業(yè)生產(chǎn)、質(zhì)量控制和市場(chǎng)監(jiān)管提供一定的應(yīng)用價(jià)值和技術(shù)支持，更為其他類(lèi)的植物油香精類(lèi)摻偽提供可行的參考。

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