北方偉業(yè)計量集團有限公司
預(yù)實驗分別選擇了超聲與水浴回流提取廣西余甘子中黃酮類成分,結(jié)果發(fā)現(xiàn)水浴回流提取出的黃酮類成分含量較高。隨后采用星點設(shè)計-效應(yīng)面法確定黃酮類成分的最佳提取工藝:乙醇濃度60%、提取溶液量95倍、提取回流時間5.5 h。
圖3生品的聚類分析表明,受不同分布區(qū)地理和氣候因素影響,廣西不同地域所產(chǎn)的余甘子質(zhì)量有差異,結(jié)合表5的測定結(jié)果,廣西玉林產(chǎn)余甘子質(zhì)量較穩(wěn)定。四批廣西梧州同一產(chǎn)地的IC50最大值0.630 mg·mL-1與最小值0.345 mg·mL-1相差近一倍,三批廣西欽州同一產(chǎn)地的IC50最大值1.174 mg·mL-1與最小值0.503 mg·mL-1也相差近一倍。這種同一地域質(zhì)量差異還可能與當(dāng)?shù)氐姆N植栽培條件等因素有關(guān)。建議規(guī)范化種植,保證藥材的質(zhì)量穩(wěn)定。
據(jù)文獻報道,余甘子中黃酮類化合物具有一定的抗氧化活性。余甘子果實中黃酮類化合物與糖以結(jié)合成苷的形式存在,在一定的溫度條件下,果實中所含的分解酶將苷分解成糖和含有黃酮類化合物的苷元,同時食鹽的滲透作用又可促使植物細胞中的化學(xué)成分溶出,使得黃酮類化合物增加。結(jié)合表5中生品鹽炙后IC50值降低,顯示清除DPPH自由基作用增強,說明余甘子鹽炙后清除DPPH自由基作用的增強與黃酮類化合物的增加有關(guān)。
表4中13批鹽炙品中有12批黃酮類成分的HPLC指紋圖譜相似度分析結(jié)果均在0.9以上,說明這12批不同產(chǎn)地的樣品經(jīng)鹽炙后主要化學(xué)成分相差不大。表6鹽炙前指紋圖譜中20個特征共有峰與清除DPPH自由基作用的關(guān)聯(lián)度均大于0.65,表7鹽炙后這20個特征共有峰與清除DPPH自由基作用的關(guān)聯(lián)度均大于0.70,說明鹽炙前后這20個特征共有峰所代表的化學(xué)成分均參與了清除DPPH自由基作用,并且清除DPPH自由基作用是這20個化學(xué)成分組成的化學(xué)成分群共同作用的結(jié)果。表5鹽炙后13批樣品的IC50值均降低,提示鹽炙后清除DPPH自由基作用增強。鹽炙后這20個特征共有峰對清除DPPH自由基作用的貢獻大小發(fā)生了較大變化,說明鹽炙后這20個化學(xué)成分組成的化學(xué)成分群在共同作用的同時,每個化學(xué)成分的含量發(fā)生了改變,使得其對清除DPPH自由基作用的貢獻大小發(fā)生了變化。后續(xù)將對鹽炙前后廣西余甘子中黃酮類特征共有峰進行定性和定量分析,探討這20個化學(xué)成分組成的化學(xué)成分群對清除DPPH自由基作用的量效變化,為廣西余甘子鹽炙品的質(zhì)量控制和評價提供參考。
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分析鹽炙對廣西余甘子中黃酮類成分清除DPPH自由基(1,1-二苯基-2-苦肼基)譜效關(guān)系的影響。方法:采用高效液相色譜法,建立13批廣西不同產(chǎn)地余甘子鹽炙前后黃酮類成分的HPLC指紋圖譜,結(jié)合DPPH自由基體外抗氧化實驗,用改進的灰色關(guān)聯(lián)分析法分析整體的指紋圖譜與藥效之間的關(guān)聯(lián)。結(jié)果:確定了20個特征共有峰,清除DPPH自由基作用是這20個特征共有峰所代表的化學(xué)成分組成的化學(xué)成分群共同作用的結(jié)果,鹽炙后清除DPPH自由基作用增強。結(jié)論:鹽炙后廣西余甘子黃酮類成分的HPLC指紋圖譜與清除DPPH自
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