北方偉業(yè)計量集團有限公司
培養(yǎng)基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,氯化鈉:10.0,瓊脂:15.0,鏈霉素:50mcg/mL,四環(huán)素:20mcg/mL,氯霉素:50mcg/mL,pH:7.0±0.2(25℃) |
傳代方法 | 1.BL21 CodonPlus (DE3)-RIPL化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。 2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入0.9 mL 室溫LB培養(yǎng)基。 4.30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時, 30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化controlPUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘。) 5.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。 6.將平板倒置放于30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。(若轉(zhuǎn)化controlPUC19 計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃培養(yǎng)過夜) |
生長條件 | 37℃;18-24h;好氧; |
存儲條件 | -80℃ |
安全等級 | 0 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 |
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