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免疫檢測(cè)法(immunoassay，IA)是一種利用抗原－抗體特異性反應(yīng)檢測(cè)各種物質(zhì)( 藥物、激素、蛋白質(zhì)、微生物等)的方法。IA 是近幾十年發(fā)展起來(lái)的技術(shù)，主要包括放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附法、熒光免疫測(cè)定法、固相免疫傳感器、膠體金免疫層析技術(shù)、蛋白芯片等。目前研究應(yīng)用較多的是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和膠體金快速檢測(cè)試紙條，該法比放射免疫法安全、方便，固相免疫傳感器剛剛起步，有少量的文獻(xiàn)報(bào)道。

一、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA）：使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA檢測(cè)方法特異性強(qiáng)，靈敏度高，對(duì)試劑的選擇性高，很難同時(shí)分析多種成分，對(duì)結(jié)構(gòu)類似的化合物有一定的交叉反應(yīng)。

二、蛋白芯片法：又稱蛋白質(zhì)微陣列( protein microarray)，是在基因芯片之后發(fā)展起來(lái)的。其原理是指采用原位合成或微量點(diǎn)樣等方法，將多種不同的蛋白分子有序地固化于支持物(如玻片、膜、孔板等載體)的表面，組成密集二維分子陣列，然后與待測(cè)生物樣品中的靶分子結(jié)合，通過(guò)特定的儀器，比如平板掃描儀、激光共聚焦掃描儀等對(duì)芯片信號(hào)的強(qiáng)度進(jìn)行快速、并行、高效地檢測(cè)分析，從而判斷樣品中靶分子的數(shù)量或含量。目前蛋白芯片常用的檢測(cè)方法為標(biāo)記檢測(cè)法，通常使用納米材料，熒光、酶等物質(zhì)標(biāo)記，通過(guò)相應(yīng)的儀器( 平板掃描儀或激光共聚焦芯片掃描儀等)對(duì)信號(hào)進(jìn)行檢測(cè)，從而獲得檢測(cè)結(jié)果。熒光標(biāo)記檢測(cè)法因其靈敏度高，已成為目前使用最多的一種標(biāo)記方法。但需注意的是熒光素的易淬滅和易漂白性。商品化的熒光檢測(cè)設(shè)備己經(jīng)相當(dāng)成熟，所以市場(chǎng)上開發(fā)的蛋白質(zhì)芯片產(chǎn)品大部分以熒光為標(biāo)記物。

蛋白芯片法與傳統(tǒng)ELISA方法比較，具有高通量，樣品用量少，一份樣品可同時(shí)進(jìn)行多指標(biāo)分析，大大降低了檢測(cè)成本，提高了檢測(cè)效率，并且檢測(cè)限與靈敏度等均與ELISA方法相當(dāng)。因此蛋白芯片法逐漸成為免疫分析方法的發(fā)展方向之一，受到越來(lái)越廣泛的重視。