2.5 FS ext對(duì)ACh和KCl誘導(dǎo)的家兔離體空腸收縮的松弛作用

FS ext能濃度依賴性地抑制由ACh誘導(dǎo)的腸管收縮，EC50=0.99 mg/ml(0.91～1.02 mg/ml,n=6），最大抑制率為84.75%，其量-效關(guān)系曲線變化見圖5A。此外，F(xiàn)S ext也能夠以濃度依賴的方式抑制由KCl誘導(dǎo)的腸管收縮，EC50=0.63 mg/ml(0.58～0.67 mg/ml,n=6），最大抑制率為91.45%，其量-效關(guān)系曲線變化見圖5A。FS ext對(duì)ACh和KCl誘導(dǎo)的家兔離體空腸平滑肌收縮的松弛作用與維拉帕米在0.001～3.000μmol/L時(shí)相似，EC50值分別為0.25μmol/L(0.20～0.29μmol/L,n=6）和0.041μmol/L(0.033～0.047μmol/L,n=6），其量-效關(guān)系曲線變化見圖5B。

2.6 FS ext對(duì)CaCl2誘導(dǎo)的空腸收縮的影響

FS ext以濃度依賴的方式抑制CaCl2誘導(dǎo)的腸管收縮，最大抑制率為52.13%，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，隨著FS ext劑量的增加，形成的CaCl2量-效關(guān)系曲線向右下方移動(dòng)，這與維拉帕米引起的CaCl2量-效關(guān)系曲線變化類似，見圖6。

3 討論

在蓖麻油誘導(dǎo)的小鼠急性腹瀉模型中，蓖麻油通過刺激小腸，損傷小腸黏膜細(xì)胞，促進(jìn)炎性遞質(zhì)合成和釋放，導(dǎo)致腸腔內(nèi)積液而出現(xiàn)急性腹瀉；此外，蓖麻油能減少Na+和K+主動(dòng)吸收，降低小腸和結(jié)腸Na+-K+ATP酶活性。蓖麻油中含有的蓖麻油酸能夠引起局部刺激和腸黏膜炎癥，從而導(dǎo)致前列腺素釋放，增強(qiáng)胃腸動(dòng)力。蓖麻油誘導(dǎo)小鼠腹瀉實(shí)驗(yàn)中，試驗(yàn)組與陰性組相比，小鼠EI明顯降低，初始半固體糞便時(shí)間延長(zhǎng)。根據(jù)植物化學(xué)分析，F(xiàn)S ext中含有黃酮類化合物。因?yàn)檩葡ⅫS酮類化合物和萜類化合物可以抑制自體蛋白和前列腺素的釋放，所以根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)，F(xiàn)S ext中可能含有抑制前列腺素釋放的物質(zhì)，從而抑制小鼠蓖麻油性腹瀉。

通過探究FS ext對(duì)家兔離體空腸平滑肌自發(fā)性收縮的影響，發(fā)現(xiàn)其表現(xiàn)出一定的劑量依賴性解痙作用，進(jìn)一步印證FS ext可以抑制蓖麻油誘導(dǎo)的小鼠腹瀉。ACh是腸神經(jīng)系統(tǒng)中主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，可通過激活毒蕈堿受體（M受體）誘導(dǎo)平滑肌自發(fā)性收縮。腸神經(jīng)系統(tǒng)的副神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)在神經(jīng)元通過釋放ACh、激動(dòng)腸平滑肌細(xì)胞膜上的M受體而增加其收縮活性，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)。在FS ext對(duì)ACh誘導(dǎo)的家兔離體空腸平滑肌自發(fā)性收縮影響實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)S ext試驗(yàn)組空腸收縮變化率呈下降趨勢(shì)，與維拉帕米組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，提示FS ext能夠舒張ACh誘導(dǎo)的離體空腸平滑肌自發(fā)性收縮，因此FS ext舒張腸平滑肌的作用可能與阻斷M受體有關(guān)。平滑肌的收縮取決于細(xì)胞質(zhì)中Ca2+的存在，細(xì)胞外的Ca2+通過細(xì)胞表面的L-型鈣離子通道進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，或是通過細(xì)胞內(nèi)肌漿網(wǎng)釋放Ca2+，從而使得細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高。

因此，鈣通道的阻斷或是細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的Ca2+釋放量減少均會(huì)減弱平滑肌的收縮。在細(xì)胞興奮過程中，L-型鈣離子通道可調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度保持在參考范圍，即鈣穩(wěn)態(tài)的主要離子通道。由之前的文獻(xiàn)可知，高濃度的K+水平可打開電壓依賴性L-型鈣離子通道并允許細(xì)胞外Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，從而促進(jìn)腸平滑肌的收縮。FS ext可松弛高K+誘導(dǎo)的腸平滑肌自發(fā)性收縮，提示可能有鈣拮抗劑的存在。因此，為驗(yàn)證這一猜想，本實(shí)驗(yàn)使用KCl溶液誘導(dǎo)腸管收縮，并將維拉帕米作為對(duì)照組，維拉帕米是一種L-型鈣離子通道阻斷劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，F(xiàn)S ext能松弛KCl誘導(dǎo)的家兔離體空腸平滑肌自發(fā)性收縮，且隨著FS ext濃度的增加，形成的CaCl2量-效關(guān)系曲線向右下方移動(dòng)，這與維拉帕米引起的CaCl2量-效關(guān)系曲線變化類似。提示FS ext抑制家兔離體空腸平滑肌的收縮可能與阻斷L-型鈣離子通道有關(guān)。

綜上，F(xiàn)S ext有明顯的抗小鼠蓖麻油性腹瀉作用，可抑制家兔離體空腸平滑肌的自發(fā)性收縮和ACh和KCl誘導(dǎo)的空腸收縮，其機(jī)制可能與阻斷M受體和抑制L型-鈣離子通道有關(guān)。

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