野菊花為菊科植物野菊的干燥頭狀花序，味苦、辛，性微寒，一般生長于野生地帶，具有抗菌、消炎、解毒、降壓、明目、鎮(zhèn)痛等作用。常被用于治療咽喉腫痛、上呼吸道感染、扁桃體炎等疾病，也可用于預(yù)防感冒、流行性腦脊髓膜炎等，具有較高的藥用保健作用。同時，由于顏色鮮艷，野菊花也被用作食品添加劑。野菊花中的化學(xué)成分比較復(fù)雜，主要成分包括黃酮類成分、萜類成分、有機(jī)酸類成分、揮發(fā)油類成分等，其中黃酮類和有機(jī)酸類成分是野菊花的主要活性成分。隨著野菊花的藥效作用在臨床上獲得認(rèn)可，近年來對野菊花中有效成分含量測定進(jìn)行了大量的研究。

1高效液相技術(shù)測定野菊花中有效成分

研究表明，HPLC法是天然藥物含量測定最為常用的方法，也被用于測定野菊花中黃酮類化合物。例如，宋冷梅等建立同時測定野菊花中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、香葉木素-7-O-β-D-葡萄糖苷、蒙花苷成分含量的方法。采用HPLC法，色譜柱為AgilentEclipseXDB-C18柱（250mm×4.6mm,5μm），流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脫，檢測波長為324nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結(jié)果:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、香葉木素-7-O-β-D-葡萄糖苷、蒙花苷的質(zhì)量分別在2.296～45.920ng、0.403～8.064ng、0.410～8.208ng、4.296～85.920ng與峰面積呈良好的線性關(guān)系，平均加樣回收率分別為100.52%、99.38%、98.79%、101.30%,RSD均小于2.0%(n=6）。該分析方法快速、準(zhǔn)確、重復(fù)好，適用于野菊花黃酮苷類含量測定。

呂文文等通過HPLC法測定不同產(chǎn)地野菊花中蒙花苷與香葉木素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量，控制入藥野菊花的質(zhì)量。采用WelchromC18(4.6mm×250mm,5μm），甲醇-水-醋酸（52∶46∶2）流動相洗脫，流速1.0mL/min，檢測波長334nm，柱溫為室溫，進(jìn)樣量20μL。安徽、山東產(chǎn)的野菊花2種黃酮苷含量較高，約為其他產(chǎn)地的2倍。不同產(chǎn)地野菊花中蒙花苷和香葉木素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量差異較大，入藥時應(yīng)選擇黃酮苷類含量較高的野菊花。

2反相高效液相色譜技術(shù)測定野菊花中有效成分

研究表明，反相高效液相色譜技術(shù)用于野菊花中黃酮類化合物和有機(jī)酸類化合物的含量測定，該法具有精密度高、重現(xiàn)性好、穩(wěn)定可靠等優(yōu)點(diǎn)。例如，武秀麗分析RP-HPLC法用于野菊花中有效成分木犀草苷、綠原酸、蒙花苷含量測定的有效性。采用高效液相色譜儀對野菊花中木犀草苷、綠原酸、蒙花苷含量，以色譜柱（4.6mm×250mm,5μm），波長334nm，流量1.0mL/min，柱溫30℃，流動相（0.05%磷酸溶液-乙腈）梯度洗脫進(jìn)行檢測。不同批次野菊花檢測，綠原酸含量差異較小，而木犀草苷、蒙花苷含量差異較大。RP-HPLC法能準(zhǔn)確測定野菊花中綠原酸、蒙花苷、木犀草苷成分含量。

3超高效液相色譜技術(shù)測定野菊花中有效成分

研究表明，UPLC法用于測定野菊花中黃酮類成分和有機(jī)酸類成分；該法具有操作簡單、分析速度快、結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。例如，戴勝等建立UPLC同時測定野菊花藥材中綠原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎寧酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3,4-二咖啡?？鼘幩?、3,5-二咖啡酰奎寧酸、4,5-二咖啡?？鼘幩?、木犀草素、蒙花苷及芹菜素10個成分含量的方法。采用AgilentE-clipsePlusC18色譜柱（2.1mm×100mm,1.8μm）；以甲醇（A)-0.3%磷酸水溶液（B）為流動相，梯度洗脫，流速0.4mL/min；檢測波長326nm；柱溫25℃。10個成分在38min內(nèi)均達(dá)到基線分離，線性關(guān)系良好（r>0.9992,n=6）；平均回收率均在96.4%～103.2%(RSD<2.0%,n=6）；測定的6批樣品中上述10個成分含量范圍分別為1.018～3.430、0.079～0.365、0～0.269、1.198～2.754、0.185～0.765、1.135～6.659、0.587～2.808、0.103～1.663、0.495～13.050、0.214～0.933mg/g。本方法操作簡單，準(zhǔn)確性和重復(fù)性良好?？捎糜谝熬栈ㄋ幉牡亩喑煞滞綔y定，為野菊花的全面質(zhì)量評價和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

范帥帥等建立同時測定野菊花中新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸C、木犀草苷、蒙花苷、芹菜素8種活性成分含量的方法。采用超高效液相色譜法。色譜柱為WatersACQUITYUPLCBEHC18，流動相為0.1%磷酸溶液-乙腈（梯度洗脫），流速為0.3mL/min，檢測波長為335nm，柱溫為35℃，進(jìn)樣量為1μL，樣品室溫為8℃。新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸C、木犀草苷、蒙花苷、芹菜素進(jìn)樣量檢測線性范圍分別為0.1401.680ng、2.21126.532ng、0.1782.136ng、0.0560.672ng、0.4605.520ng、1.26015.120ng、2.72532.700ng、0.1200.144ng(r>0.9996）；檢測限分別為0.02ng、0.02ng、0.02ng、0.01ng、0.01ng、0.01ng、0.04ng、0.01ng，定量限分別為0.06ng、0.07ng、0.07ng、0.03ng、0.04ng、0.04、0.13ng、0.02ng；精密度、穩(wěn)定性（10h）、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均<2%(n=6），平均加樣回收率為97.05%102.04%(RSD為1.03%1.65%,n=9）。建立的方法分析速度快、靈敏度和分辨率較高、重復(fù)性好、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于野菊花中8種活性成分含量的同時測定。

夏伯候等評價野菊花中綠原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷、芹菜素5種成分的抗氧化能力，同時建立其UPLC含量測定方法。采用ABTS+法評價5種成分的抗氧化能力；采用UPLC法進(jìn)行5種成分的含量測定，以ACQUITYUPLCBEHC18(100mm×2.1mm,1.7μm)為色譜柱，以乙腈-0.02%磷酸溶液為流動相進(jìn)行梯度洗脫，流速0.4mL/min，檢測波長360nm，柱溫30℃。結(jié)果是5種成分均具有一定清除ABTS+自由基能力，以綠原酸、木犀草苷、木犀草素的清除能力最強(qiáng)。綠原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷、芹菜素的進(jìn)樣量分別在0.0012～0.0960μg、0.0023～0.1808μg、0.0011～0.0904μg、0.0039～0.3144μg、0.0013～0.1056μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系；平均加樣回收率分別為99.37%、99.25%、99.46%、100.18%、99.70%,RSD均小于2.0%。該方法可以同時測定野菊花中5種抗氧化活性成分的含量，結(jié)果準(zhǔn)確、快速、重現(xiàn)性好，可以作為野菊花藥材的質(zhì)量控制方法之一。

4近紅外光譜分析技術(shù)測定野菊花中有效成分

近紅外光譜是一種綠色分析技術(shù)，具有分析速度快、操作簡單、試劑消耗低等優(yōu)點(diǎn)，已被用于野菊花中黃酮類化合物的含量測定。例如，毛佩芝等應(yīng)用近紅外光譜技術(shù)建立一種野菊花藥材中水分及有效成分含量的快速分析方法。采集45批野菊花藥材的近紅外光譜，分別用烘干法和HPLC測得藥材中水分及蒙花苷含量值作為參考，運(yùn)用偏最小二乘法（PLS）建立野菊花藥材水分及蒙花苷的定量模型，并用未知樣品進(jìn)行驗(yàn)證。野菊花藥材水分和有效成分蒙花苷含量PLS模型得到的NIR預(yù)測值與實(shí)測值有較好的相關(guān)性，模型的交互驗(yàn)證誤差均方根（RMSECV）分別為0.568、0.282；相關(guān)系數(shù)R2為0.9761、0.9551;RESP均控制在10%以內(nèi)，完全符合中藥生產(chǎn)過程實(shí)時分析的精度要求。研究表明，近紅外光譜技術(shù)能夠快速測定野菊花藥材水分和蒙花苷含量，有助于藥材入庫的快速檢驗(yàn)，節(jié)省人力物力。

胡小莉等運(yùn)用近紅外光譜技術(shù)（NIRS）測定不同產(chǎn)地野菊花總黃酮含量。分別采集6個不同產(chǎn)地的野菊花樣品，采用近紅外漫反射光譜法采集不同產(chǎn)地野菊花近紅外圖譜；以蘆丁為對照品，利用傳統(tǒng)的分析方法紫外-可見分光光度法在502nm處測定不同產(chǎn)地野菊花藥材中總黃酮含量作為參考值，將近紅外圖譜與野菊花中總黃酮含量值進(jìn)行關(guān)聯(lián)，采用偏最小二乘法（PLS）建立定量分析模型，并對模型進(jìn)行驗(yàn)證。所建總黃酮定量分析模型的相關(guān)系數(shù)（R～2）、校正均方差（RMSEC）、預(yù)測均方差（RMSEP）、交叉驗(yàn)證均方差（RMSECV）分別為0.98927、0.131、0.163、0.292；驗(yàn)證集樣品的總黃酮含量近紅外預(yù)測值的平均相對偏差為2.08%。近紅外光譜技術(shù)測定快速，操作簡單，預(yù)測結(jié)果準(zhǔn)確度高，可用于不同產(chǎn)地野菊花藥材中總黃酮含量的快速測定。

呼海濤等運(yùn)用近紅外漫反射光譜技術(shù)（NIRS）結(jié)合偏最小二乘法（PLS）建立野菊花藥材中蒙花苷含量的快速測定方法。采集野菊花藥材的近紅外漫反射光譜，采用HPLC測定野菊花藥材中蒙花苷含量作為參考值，將近紅外光譜與蒙花苷含量參考值進(jìn)行關(guān)聯(lián)，建立野菊花藥材中蒙花苷含量的定量預(yù)測模型，并對模型進(jìn)行驗(yàn)證。所建立的定量分析模型的內(nèi)部交叉驗(yàn)證決定系數(shù)（R2）為0.9991，校正均方根偏差（RMSEC）為0.0136，內(nèi)部交叉驗(yàn)證均方差（RMSECV）為0.0397，驗(yàn)證集樣品預(yù)測相關(guān)系數(shù)（r）為0.9976，預(yù)測均方偏差（RMSEP）為0.0185。近紅外光譜法操作簡便，測定快速準(zhǔn)確，可以用于河南產(chǎn)野菊花藥材中蒙花苷含量的快速測定。

綜上所述，野菊花中有效成分含量測定方法有高效液相色譜法、反相色譜法、超高效液相色譜法、近紅外光譜法等。野菊花中的黃酮類化合物作為野菊花質(zhì)量控制的指標(biāo)，所以關(guān)于野菊花含量測定的研究也是圍繞黃酮類化合物開展的。雖然上述研究取得了一定的成果，但是揮發(fā)油類化合物和有機(jī)酸類化合物也是野菊花發(fā)揮藥效的有效成分，應(yīng)該進(jìn)行深入的研究，為野菊花的綜合評價提供指導(dǎo)。

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