二、結(jié)果與討論

1、不同制備的黑豆分離蛋白清除DPPH自由基能力

分別用PBS緩沖液配置濃度為：1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg／mL、5mg／mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯(lián)黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對(duì)照物Trolox溶液；以DPPH的清除率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)五種樣品溶液清除DPPH自由基能力進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)表1。

由圖l可見(jiàn)：濃度為lmg/mL～6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率均高于自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白，自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高DPPH自由基清除率無(wú)顯著性變化，濃度為lmg/mL～4mg/mL，酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率隨濃度的增高而增大，濃度為5mg/mL～6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率無(wú)顯著性差異，由表l可知，當(dāng)濃度為6mg/mL時(shí)，酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS⁺清除率達(dá)到最大，Trolox為90.67％，酶法糖基化黑豆蛋白為81.76％，濕熱法糖基化黑豆蛋白為75.37％；當(dāng)濃度為5mg/mL時(shí)自交聯(lián)黑豆蛋白ABTS⁺清除率達(dá)到最大為9.35％，當(dāng)濃度為4mg/mL時(shí)黑豆蛋白ABTS⁺清除率達(dá)到最大為7.73％；五種樣品清除DPP腎自由基能力大小為T(mén)rolox＞酶法糖基化黑豆蛋白＞濕熱法糖基化黑豆蛋白＞自交聯(lián)黑豆蛋白＞黑豆分離蛋白。

2、不同制備的黑豆分離蛋白清除ABTS⁺自由基能力

分別用PBS緩沖液配置濃度為：lmg／mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯(lián)黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對(duì)照物Trolox溶液；以ABTS⁺的清除率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)五種樣品溶液清除ABTS⁺自由基能力進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)表2。

由圖2可見(jiàn)：濃度為lmg/mLL～6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS⁺自由基清除率均高于自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白，自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高ABTS⁺自由基清除率無(wú)顯著性變化，濃度為1mg/mL～4mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白ABTS⁺自由基清除率隨濃度的增高而增大，濃度為5mg/mL～6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白ABTS⁺自由基清除率無(wú)顯著性差異，濃度為lmg/mL～6mg/mL濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS⁺自由基清除率隨濃度的增高而增大；從表2可知，當(dāng)濃度為6mg/mL時(shí)，酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白、Trolox、自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白ABTS⁺清除率均達(dá)到最大，Trolox為76.08％，酶法糖基化黑豆蛋白為60.24％，濕熱法糖基化黑豆蛋白為49.28％，自交聯(lián)黑豆蛋白為4.33％，黑豆蛋白為4.79％；五種樣品清除DPPH⁺自由基能力大小為T(mén)rolox＞酶法糖基化黑豆蛋白＞濕熱法糖基化黑豆蛋白＞自交聯(lián)黑豆蛋白＞黑豆分離蛋白。

3、總還原能力

分別用PBS緩沖液配置濃度為：lmg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg／mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯(lián)黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對(duì)照物Trmox溶液；以吸光度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)五種樣品溶總還原能力進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)表3。

由圖3可見(jiàn)：濃度為lmg/mL～6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及Trolox總還原能力均高于自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白；自交聯(lián)黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高總還原能力無(wú)顯著性變化，濃度為lmg/mL～6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及Trolox總還原能力隨濃度的增高而增大，從表3可知，當(dāng)濃度為6mg/mL時(shí)，酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白、Trolox以及自交聯(lián)黑豆蛋白吸光值達(dá)到最大，總還原能力達(dá)到最強(qiáng)，Trolox為0.6169，酶法糖基化黑豆蛋白為0.4914，濕熱法糖基化黑豆蛋為0.2569，自交聯(lián)黑豆蛋白為0.0573。當(dāng)濃度為2mg/mL時(shí)，黑豆分離蛋白吸光值達(dá)到最大，總還原能力達(dá)到最強(qiáng)為0.0581，五種樣品總還原能力大小為T(mén)rolox＞酶法糖基化黑豆蛋白＞濕熱法糖基化黑豆蛋白＞黑豆分離蛋白＞自交聯(lián)黑豆蛋白。

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