4、體外抗氧化活性試驗

（1）對DPPH自由基的清除能力

以質(zhì)量濃度為橫坐標，清除率為縱坐標作圖，得到各樣品質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率的關(guān)系，試驗結(jié)果見圖2～5。由圖2～5可知，隨著各樣品質(zhì)量濃度的增加，對DPPH自由基的清除率均逐漸升高。當黑果腺肋花楸提取物供試液濃度為186.40μg／mL，矢車菊素-3-O-葡萄糖苷供試液濃度為15.04μg／mL，氯化矢車菊素供試液濃度為5.19μg／mL，VC供試液的濃度為12.76μg／mL時，清除率均可達到50％，試驗結(jié)果見表3，氯化矢車菊素對DPPH自由基的清除能力最強，黑果腺肋花楸提取物對DPPH自由基具有一定的清除活性。

（2）FRAP法測定總的抗氧化能力
以FeSO₄濃度C為橫坐標，測得的吸光度A為縱坐標，進行線性擬合，得到FeSO₄標準曲線為：A=0.0262C一0.0275，R²=0.9996。將測得的樣品吸光度值帶入標準曲線方程，抗氧化活性以相同吸光度值的FeSO₄當量濃度表示，記為FRAP值。由圖6～9可知，當VC樣品液的濃度為7.27μg/mL，黑果腺肋花楸提取物供試液的濃度為157.7μg／mL，矢車菊素樣品液濃度為11.35μg／mL，氯化矢車菊素樣品液濃度為5.52μg/mL，硫酸亞鐵當量濃度可達到30μg/mL，試驗結(jié)果見表3，說明氯化矢車菊素的還原能力最強，黑果腺肋花楸提取物具有一定的還原能力。

（3）鉬酸銨法測定總的抗氧化能力
以VC質(zhì)量濃度為橫坐標，測得的吸光度A為縱坐標，進行線性擬合，得到VC抗氧化能力標準曲線為：A=240.28C-101.67，R2=0.9966。將測得的樣品吸光度值帶入標準曲線方程，抗氧化活性以相同吸光度值的VC當量濃度表示。由圖10～13可知，當氯化矢車菊素樣品液的濃度為0.082mg／mL，黑果腺肋花楸花青素供試液的濃度為1.63mg／mL，矢車菊素樣品液濃度為0.1722mg／mL，VC當量濃度可達到30μg／mL，試驗結(jié)果見表3，說明說明氯化矢車菊素的還原能力最強，黑果腺肋花楸提取物具有一定的還原能力。
 

三、結(jié)論與討論

1、本試驗對黑果腺肋花楸提取物中氯化矢車菊素含量的HPLC測定方法進行考察，結(jié)果表明建立的含量測定方法操作簡便，精密度高，重復性及線性關(guān)系良好；

2、本試驗采用酸化甲醇溶液經(jīng)沸水浴水解提取花青素，在相關(guān)文獻的基礎上，通過正交試驗進一步考察了水解提取花青素工藝參數(shù)，試驗結(jié)果表明，最佳提取工藝為：水解溫度100℃、水解時間2h、溶劑酸濃度3％鹽酸甲醇。在優(yōu)化水解提取條件下，氯化矢車菊素的含量為1.8570mg／g。該方法操作簡單，具有快速、高效、環(huán)保等優(yōu)點，為黑果腺肋花楸果活性成分的提取提供了一種新方法；

3、體外抗氧化活性的試驗結(jié)果表明：黑果腺肋花楸提取物對DPPH自由基具有一定的清除活性，隨著其質(zhì)量濃度的增加，清除活性明顯增強，并且氯化矢車菊素對DPPH自由基的清除能力強于黑果腺肋花楸提取物；FRAP法和鉬酸銨法測定各樣品液總還原力，結(jié)果表明黑果腺肋花楸提取物具有一定的抗氧化活性，兩種測定方法中氯化矢車菊素的抗氧化性最強。上述試驗結(jié)果為黑果腺肋花楸果在食品、飲料、制藥等領域的應用提供了工作基礎，為黑果腺肋花楸果的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。

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