一、流動(dòng)相使用前為什么要脫氣

首先我們了解一下不脫氣可能造成的影響：

氣泡會(huì)增加基線的噪音，造成靈敏度下降，甚至無法分析（噪聲增大，基線不穩(wěn)，突然跳動(dòng)）。

溶解的氧氣還會(huì)導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化，柱中固定相（如烷基胺）發(fā)生反應(yīng)，降解而改變柱的分離性能。

溶解氧能與某些溶劑（如甲醇、四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，此絡(luò)合物會(huì)提高背景吸收（特別是在260nm以下），并導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度的輕微降低，會(huì)在梯度淋洗時(shí)造成基線漂移或形成鬼峰（假峰）。

若用FLD（熒光檢測(cè)器），溶解氧在一定條件下還會(huì)引起淬滅現(xiàn)象，特別是對(duì)芳香烴、脂肪醛、酮等。在某些情況下，熒光響應(yīng)可降低達(dá)95%。

二、脫氣的作用

除去其中溶解的氣體（如O2），以防止在洗脫過程中當(dāng)流動(dòng)相由色譜柱流至檢測(cè)器時(shí)，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。

排出氣泡能減少泵工作的傷害，提高UV檢測(cè)器的性能高，改善靈敏度。

三、脫氣的方式

1、加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染，同時(shí)需要考慮低沸點(diǎn)溶劑揮發(fā)造成的組成變化。

2、抽真空脫氣法：易抽走有機(jī)相。

3、超聲脫氣法：流動(dòng)相放在超聲波容器中（一般500ml溶液需超聲20~30min），此法不影響溶劑組成。超聲時(shí)應(yīng)注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸，以免玻璃瓶破裂，容器內(nèi)液面不要高出水面太多。

4、氦氣脫氣法：在色譜操作前和進(jìn)行時(shí)，將惰性氣體噴入溶劑中。嚴(yán)格來說，此方法不能將溶劑脫氣，它只是用一種低溶解度的惰性氣體（通常是氦）將空氣替換出來。主要利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。

5、在線真空脫氣法：利用在線脫氣機(jī)在線脫氣，智能控制，無需額外操作，成本低，脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法，并適用于多元溶劑體系。

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