近年的研究表明，存在于十字花科植物中的異硫氰酸酯具有較強(qiáng)的抗癌、抗氧化功效，能有效抑制霉菌、酵母菌和細(xì)菌的活性，對(duì)寄生蟲(chóng)有殺滅作用﹔也有少量研究表明，異硫氰酸酯有降血脂、降血糖的作用，所以異硫氰酸酯在食品和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域都具有較好的應(yīng)用前景。在眾多種類的異硫氰酸酯中，研究較多的是存在于西藍(lán)花中的萊藤硫烷，因其良好的抗氧化和抗癌作用，現(xiàn)已被開(kāi)發(fā)生產(chǎn)為抗癌藥物。萊服素屬于異硫氰酸酯，主要存在于蘿卜籽中，與萊藤硫烷是同分異構(gòu)體，但因萊藤素在結(jié)構(gòu)上比萊藤硫烷多了一個(gè)雙鍵，所以其抗氧化性能比萊藤硫烷約強(qiáng)1～2倍，同時(shí)也具有很好的異硫氰酸酯的其它性能。但萊藤素的水溶性差、性質(zhì)不穩(wěn)定，限制了其在食品中的應(yīng)用。羥丙基-β環(huán)糊精（HP-B-CD）水溶性強(qiáng)，在口服液制劑、緩釋及靶向制劑、注射制劑等方面具有無(wú)可替代的優(yōu)勢(shì)，是一種理想的注射劑增溶劑和藥物賦形劑。目前萊藤素膠囊類制劑已有研究，但是以HP-B-CD做壁材制備萊藤素包合物的研究尚無(wú)報(bào)道。本文主要研究用HP-B-CD做壁材，萊藤素粗提物做芯材，通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)制備萊藤素-HP-B-CD包合物，并用紅外光譜進(jìn)行表征，為萊藤素在食品及醫(yī)用行業(yè)的應(yīng)用提供依據(jù)。

一、材料和方法

1、儀器與設(shè)備

FA2104電子天平：上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司，MultifugeX1R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)：美國(guó)ThermoScientific公司；TENSOR27紅外光譜儀：德國(guó)Bruker公司；RE-5299旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；河南智誠(chéng)科技發(fā)展有限公司；Alpha1-2LD冷凍干燥機(jī)：德國(guó)CHRIST公司。

2、材料與試劑

蘿卜籽：籽粒飽滿，不發(fā)霉（武漢蔬菜研究所），純羥丙基-β-環(huán)糊精﹔二氯甲烷、無(wú)水乙醇、無(wú)水乙醚、碘化鉀，以上試劑均為分析純。

3、試驗(yàn)方法

（1）萊藤素的制備

工藝流程：蘿卜籽→干燥→粉碎→脫脂→碎渣→加水酶解→二氯甲烷浸提→冷凍離心→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)→萊葭素粗提物

操作要點(diǎn)：

①把去除油脂的碎渣加入一定量的水放在25℃的水浴鍋中，酶解50min；

②按照1∶15的比例加入二氯甲烷，震搖5～10min；

③在10000r/min條件下，冷凍離心3min，取下層透明液體；

④在35℃的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到萊藤素粗提物。經(jīng)檢驗(yàn)萊藤素的純度是60%。

（2）包合物的制備工藝

芯材:用電子分析天平精密稱取10mg萊藤素于試劑管中，加入少量無(wú)水乙醇使其充分溶解。

壁材:按一定比例稱取適量HP-β-CD，用10倍去離子水在60℃將其溶解。

包合:把芯材逐滴加入到HP-β-CD水溶液中，一定溫度下包合一定時(shí)間后取出，待溶液冷至室溫后，放在5℃冰箱中靜置24h。真空抽濾后于冷凍干燥器中干燥，得萊藤素與HP-β-CD的包埋產(chǎn)物，放入冰箱中備用。

（3）包埋率的測(cè)定方法

準(zhǔn)確稱取萊藤素與HP-β-CD包合物（W1）至干燥的小燒杯中，加入20mL熱水，攪拌使其溶解后，依次加入10mL無(wú)水乙醇、10mL無(wú)水乙醚和10mL石油醚萃取萊藤素。重復(fù)萃取兩次，合并萃取液移入恒重的小燒杯中（W2），蒸干溶劑至恒重，得到純化后的包合物（W3）。

根據(jù)下列公式計(jì)算包埋率﹔包埋率=（W3W—W2）*100W%（1—1）

式中：W1為制備的包合物質(zhì)量/g：W2為小燒杯質(zhì)量/g，W3為純化后的包合物質(zhì)量/g。

（4）包合得率的測(cè)定方法

用精密電子天平準(zhǔn)確稱取萊藤素的質(zhì)量、HP-β-CD的質(zhì)量以及包合物的質(zhì)量，按以下公式計(jì)算包合得率。

其計(jì)算公式為：包合得率=W3/（W1+W2）*100%（1-2）

式中：W1為萊藤素的質(zhì)量/g，W2為HP-β-CD質(zhì)量lg，W3為純化后的包合物質(zhì)量/g。

（5）包合物的紅外光譜分析

分別取適量的HP-β-CD、萊藤素、萊藤素與HP-β-CD的包合物和物理混合物，用溴化鉀壓片后于400～4000cm^-1范圍內(nèi)進(jìn)行紅外吸收光譜掃描。

二、結(jié)果與分析

1、單因素試驗(yàn)

（1）芯、壁材比對(duì)包合物的影響

萊藤素（芯材）與HP-β-CD（壁材）的比例直接影響到包埋效果。在60℃包合1.5h，按照不同的芯、壁材比例制備包合物，試驗(yàn)結(jié)果如圖1。包合得率和包埋率隨著芯、壁比的增大，呈現(xiàn)先增大后降低的趨勢(shì)，在1∶7時(shí)達(dá)到最大，所以選擇芯、壁比1∶7為最佳。

（2）包合時(shí)間對(duì)包合物的影響

一定條件下，包合時(shí)間對(duì)包合得率及包埋率有影響。在芯、壁比1∶7，包合溫度60℃，不同包合時(shí)間條件下，制備包合物，試驗(yàn)結(jié)果如圖2。從圖2中可以看出，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，包埋得率及包合率都有所增加，在2.5h時(shí)達(dá)到最大，隨后又有所降低，所以，確定最佳包合時(shí)間為2.5h。

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