著色劑主要分為食用著色劑和工業(yè)染料，由于工業(yè)染料等非食用著色劑價格低廉，著色力強(qiáng)，被越來越多的生產(chǎn)商用于食品生產(chǎn)中。為了更好的發(fā)現(xiàn)食品安全問題，研究合理有效的著色劑的檢測方法至關(guān)重要，文中列出現(xiàn)有的著色劑的檢測方法之間不同的特點，并對著色劑檢測技術(shù)的發(fā)展進(jìn)行了展望。

著色劑主要分為食用著色劑和工業(yè)染料，其中食用著色劑分為天然色素和人工合成著色劑。近年來，不法商販為了降低成本，增加收入，但又考慮到顏色對于人類視覺的沖擊效應(yīng)，違法使用工業(yè)染料等非食品添加劑添加到食品生產(chǎn)中，來增加食品的色澤，著色劑導(dǎo)致的食品安全事件頻發(fā)，造成了消費(fèi)者的恐慌。例如：染色五香花生米，染色鄉(xiāng)巴佬等鹵蛋制品，蘇丹紅的紅心鴨蛋等事件。為了更好更快的發(fā)現(xiàn)問題，對于食用色素的檢驗方法的研究也越來越多。

１色素的檢驗方法

目前，用于食品添加劑色素的檢驗方法有：高效液相色譜法、分光光度法、示波極譜法、薄層色譜法、色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法等。

1.1高效液相色譜法

高效液相色譜法是GB5009.35-2016中規(guī)定使用的食品中合成著色劑的檢驗方法，該方法適用于飲料、硬糖、配制酒、蜜餞中合成著色劑的測定，是目前使用最廣、研究最多的方法。該方法的主要原理是：待測定的樣品通過液－液萃取法或聚酰胺吸附法提取分離出其中的著色劑，采用高效液相色譜法，經(jīng)過反相色譜分離，根據(jù)色素的保留時間與峰面積大小來進(jìn)行定性和定量。該方法的靈敏度高，操作簡單，準(zhǔn)確度高，被一直沿用下來，成為GB5009.35-2016中唯一指定的食品中合成著色劑的檢測方法。

蔣榮華等人采用乙醇－氨溶液提取，乙腈－乙酸銨為流動相，高效液相色譜分離，二極管陣列檢測器可變波長程序，快速測定肉制品中檸檬黃、日落黃等６種人工合成色素。試驗結(jié)果：該方法檢測６種色素相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5%，方法操作簡單，靈敏度高。

孫鵬等人通過液－液萃取法提取分離，高效液相色譜法測定液態(tài)奶中胭脂紅、日落黃２種著色劑。文中對萃取劑的種類、體積、ｐＨ值等條件的影響進(jìn)行了研究，確定了最優(yōu)的萃取條件。結(jié)果表明，該方法的線性相關(guān)系數(shù)在0.999左右，且方法簡單、高效，達(dá)到了試驗預(yù)期的效果。

Waleskade等人采用梯度洗脫技術(shù)分離樣品，高效液相色譜法檢測酸奶和奶味飲品中合成染料的含量。該方法的線性范圍在0.5~25mg/L，線性關(guān)系良好，回收率為８2%~115%。檢驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)大多數(shù)樣品中含有偶氮玉紅，其次是莧菜紅。

Karanikolopoulos等人采用RP-HPLC/DAD測定水產(chǎn)品中人工色素的含量，該方法簡單便捷，回收率大于81%，在低濃度下，精確度較高，為復(fù)雜基質(zhì)食品中合成水溶性色素提供了技術(shù)支持。

Chai等人采用固相萃取法提取，高效液相色譜法檢測飲料中胭脂紅、莧菜紅、日落黃和誘惑紅四種色素含量，對試樣溶液ｐＨ值、吸附劑用量、萃取時間等前處理條件進(jìn)行了優(yōu)化；檢驗結(jié)果：四種色素檢出限為0.20~0.25μg/L，莧菜紅和胭脂紅線性范圍為1~500μg/L，日落黃和誘惑紅線性范圍為0.80~500μg/L，結(jié)果表明，該方法簡單靈敏，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。

1.2分光光度法

分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在分光光度計中不同波長下的不同吸光度，測定物質(zhì)的含量方法。分光光度計一般分為三個光區(qū)：紫外光區(qū)、可見光光區(qū)和紅外光區(qū)。該方法操作簡單。

鄧平建研究了用乙醇適當(dāng)處理樣品后，用雙波長法直接測定兩種顏色相近的色素共存的混合樣品，該方法準(zhǔn)確、簡便，達(dá)到了預(yù)期的試驗效果。

廖萍堅等人利用波長的選擇優(yōu)化測定硬質(zhì)糖果中三種色素的含量。結(jié)果顯示，三種色素在特定濃度范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上。該方法操作方便、準(zhǔn)確性較高。

Capitán-Vallvey等人建立了同時測定食品中檸檬黃、日落黃和胭脂紅三種色素的分光光度法。樣品經(jīng)過前處理，在波長為400~800nm條件下，線性范圍為50.0~650.0ng/mL，相關(guān)系數(shù)良好，將該方法與高效液相色譜法比較，檢驗結(jié)果在誤差范圍之內(nèi)。

1.3薄層色譜法

薄層色譜，也叫薄層層析，是GB/T5009.35-2003《食品中合成著色劑的測定》中指定的食品中合成著色劑的檢測方法之一。該方法是利用物質(zhì)與物質(zhì)之間吸附力的不同，被測樣品與固定相發(fā)生反復(fù)的吸附與解吸附，從而使樣品達(dá)到分離，形成一系列的斑點進(jìn)而進(jìn)行定性和定量分析。薄層色譜法可以分為薄層吸附層析法、薄層凝膠層析法、薄層離子交換層析法、薄層分配層析法等。一般實驗過程中常用的是薄層吸附層析法。

張?zhí)m天等人采用高效薄層色譜技術(shù)，對簡單處理后的飲料樣品快速進(jìn)行分離、定性和定量。該方法快速、簡便、準(zhǔn)確度高，可以滿足大批量的飲料產(chǎn)品的２６種人工色素的定性定量分析。

劉聃等人通過對提取劑的選擇和提取時間等菠菜中色素提取分離達(dá)不到理論效果的影響因素進(jìn)行了分析，優(yōu)化了檢驗條件，確定了對于菠菜葉中色素提取分離較好的試驗條件。

徐剛等人通過試驗，找到了薄層色譜快速定性篩查藥品中非法添加的６種水溶性色素和５種脂溶性色素的優(yōu)化方法，該方法對兩類色素的分離都達(dá)到了預(yù)期的效果，得到了較低的檢出限。

1.4色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法

色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法是將兩種儀器結(jié)合，利用色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能，達(dá)到對未知物質(zhì)的定性與定量分析，可以更好的確定樣品中潛在的危險和影響。色譜－質(zhì)譜聯(lián)用包括氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用和液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用。氣質(zhì)聯(lián)用儀主要用于小分子、易揮發(fā)的化合物，液質(zhì)聯(lián)用儀與氣質(zhì)聯(lián)用儀互補(bǔ)，主要用于不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和大分子量等的化合物。色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法具有性能高、檢測限低、方便快速等優(yōu)點。

Martin等人采用液－液萃取法提取，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測糖果、冰淇淋、巧克力等食品中的檸檬黃、喹啉黃、赤蘚紅等18種水溶性色素，該方法回收率在83.4%~166.0%之間，滿足復(fù)雜基質(zhì)的食品檢測，為今后的糖果、冰淇淋等食品中合成色素的檢測提供了技術(shù)參考。

針對食用色素容易受到熱、光等環(huán)境的影響，為了克服這些缺點，人們會向天然色素中添加不可用于食品生產(chǎn)的染料活性紅195這一問題，Judith等人研究并建立了快速的篩查方法，可以明確識別目標(biāo)物及其衍生物，為食品摻假鑒別提供了新的方向。

黃方取等人將葡萄酒樣品稀釋高速離心后過膜進(jìn)樣，在特定的參數(shù)下淋洗、分離、離子化，定性和定量分析。建立了葡萄酒中常見的７種人工合成色素的簡單樣品前處理、高靈敏度的定性定量分析檢驗方法，滿足了市場對于快、準(zhǔn)、精等食品檢測要求，為食品中葡萄酒檢測技術(shù)提供了新的可行方法。

張杉在對豆制品中７種違禁色素的檢測方法研究中發(fā)現(xiàn)，采用甲醇－甲酸水為流動相，梯度淋洗，正離子掃描模式，得到的方法線性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上，加標(biāo)回收率在80%以上，該方法前處理簡單，滿足同時測定豆制品中７種違禁色素的試驗要求。

1.5示波極譜法

示波極譜法又可稱為單掃描極譜分析法，它是一種快速加入電解電壓的極譜法。采用滴汞電極，在電解過程中，加入鋸齒形脈沖電壓，得到在示波管組成的熒光屏上顯示的極譜圖，因此被稱為示波極譜法。該方法靈敏度高。

宋新等人研究中，運(yùn)用示波極譜法測定食品中檸檬黃、日落黃、胭脂紅、莧菜紅和亮藍(lán)５種合成著色劑。經(jīng)過試驗論證顯示采用示波極譜法測定食品中的合成著色劑靈敏度高、操作簡單，適合在基層工作中應(yīng)用。

文君等人采用示波極譜法檢測食品中的合成著色劑赤蘚紅。赤蘚紅在特定條件下的精密度和準(zhǔn)確度符合定量分析的要求。

1.6其他檢測方法

除了上述方法之外，還有毛細(xì)管電泳法、試劑盒法等。

毛細(xì)管電泳法是依據(jù)各組分之間在電場驅(qū)動力下的差異，通過毛細(xì)管通道，進(jìn)而對樣品中各組分進(jìn)行分離的技術(shù)。陳林情等人采用毛細(xì)管電泳法，優(yōu)化試驗條件，得到了檢測飲料中３種合成著色劑的檢測方法，該方法可以快速分離目標(biāo)色素，且回收率在９７％以上，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

試劑盒法是一種快速簡便，適合現(xiàn)場檢驗或?qū)悠返暮唵纬鹾Y的檢驗方法。龍朝陽等人用試劑盒法和液相色譜法，對飲料等多種食品樣品進(jìn)行了常見的檸檬黃等４紅合成著色劑的檢測，通過檢驗結(jié)果的比對分析發(fā)現(xiàn)，試劑盒法數(shù)據(jù)與液相色譜法數(shù)值吻合，而且較液相色譜法方便、快速。

２展望

在眾多食品安全問題中，禁限用著色劑超范圍和超限量使用的問題不容小覷。著色劑作為一類食品加工生產(chǎn)中重要的食品添加劑，被廣泛的應(yīng)用于天然色素在食品加工和貯存運(yùn)輸過程中損失的食品的增色中，為該類食品提供鮮艷、持久、穩(wěn)定的色澤。然而，一些著色劑可能危害人體健康，在過去的數(shù)年中，通過法律法規(guī)，安全標(biāo)準(zhǔn)等的建立，世界多個國家嚴(yán)格控制食品中合成著色劑的使用，嚴(yán)令禁止有毒的合成著色劑在食品生產(chǎn)中應(yīng)用。但是，現(xiàn)階段，著色劑檢測技術(shù)相對成熟，但存在檢測范圍小，對于國家標(biāo)準(zhǔn)中沒有規(guī)定的藥物無法進(jìn)行篩查；實驗過程較復(fù)雜，對于不同種樣品的不同種藥物的檢測需要反復(fù)進(jìn)行前處理和進(jìn)樣檢測；不能進(jìn)行快速檢測，時效性差等缺點。因此，為保證食品安全，需要繼續(xù)研究建立準(zhǔn)確可靠的著色劑的測定方法。

聲明：本文所用圖片、文字來源《河北省科學(xué)院學(xué)報》2019年3月，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系

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