北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
食品添加劑已被廣泛使用于食品加工的很多領(lǐng)域;近年來(lái),消費(fèi)者對(duì)食品中各種添加劑的安全性日益關(guān)注,特別是人工合成的添加劑越來(lái)越受到人們的重視。目前,飲料生產(chǎn)廠(chǎng)家向飲料中添加的甜味劑主要有糖精鈉、甜蜜素和安賽蜜,添加的防腐劑主要有山梨酸和苯甲酸。
這幾種添加劑的測(cè)定,目前中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品理化檢驗(yàn)方法GB/T5009.28,29-2003、GB/T5009.97-2003、GB/T5009.140-2003分別規(guī)定了食品中山梨酸、苯甲酸和糖精鈉的測(cè)定、食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉(又名甜蜜素)的測(cè)定以及飲料中乙?;前匪徕?/span>(又名安賽蜜)的測(cè)定,山梨酸和苯甲酸的測(cè)定,國(guó)標(biāo)第一法是氣相色譜法,樣品提取比較麻煩,而且毒性也較大,第二法用的是液相色譜法,而糖精鈉和乙?;前匪徕泧?guó)標(biāo)法采用的也是高效液相色譜法,由于測(cè)定方法不一樣,所用的儀器條件也不一樣,應(yīng)分別進(jìn)行測(cè)定,而甜蜜素的測(cè)定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用的是氣相色譜法,樣品處理比較麻煩,要進(jìn)行衍生化處理,而且所用試劑毒性也比較大,也費(fèi)時(shí)間;也有文獻(xiàn)報(bào)道采用反相高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定乙?;前匪徕浖疤蔷c、苯甲酸、山梨酸含量,但不能同時(shí)測(cè)定環(huán)己基氨基磺酸鈉,因此建立一種同時(shí)測(cè)定碳酸飲料中多種添加劑的方法十分必要。在此我們建立了一種新的測(cè)定方法,即采用自動(dòng)淋洗、電導(dǎo)抑制離子色譜法,同時(shí)對(duì)碳酸飲料中5種添加劑進(jìn)行測(cè)定,并應(yīng)用于實(shí)際樣品的檢測(cè),結(jié)果令人滿(mǎn)意。
1材料與方法
1.1儀器設(shè)備與試劑
儀器設(shè)備ICS2500離子色譜儀,配置ED50電導(dǎo)檢測(cè)器,EG50淋洗液發(fā)生器,GP50梯度泵,Chromeleon色譜工作站(美國(guó)戴安公司);MILLIPORE超純水機(jī)(法國(guó))。試劑苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉和乙?;前匪徕洠ò操惷郏┑臉?biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液由相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品(美國(guó)Sigma公司生產(chǎn))配制,標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度為苯甲酸、山梨酸和乙?;前匪徕浘鶠?mg/ml,甜蜜素和糖精鈉均為2mg/ml;高純水(電阻率大于18MΩ*cm)。
1.2方法
1.2.1測(cè)定原理
碳酸飲料中苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉和乙?;前匪徕浗?jīng)AS19色譜柱分離后,以保留時(shí)間定性,峰面積定量。
1.2.2色譜條件
色譜柱:IonPacRAS194×250mm,保護(hù)柱:IonPacRAG194×50mm;ASRS-ULTRA抑制器,抑制電流50mA,淋洗液為18mM的氫氧化鉀溶液,流速1.0ml/min,柱溫30℃,進(jìn)樣量25μl,保留時(shí)間定性,峰面積定量。
1.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備
1.2.3.1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
準(zhǔn)確吸取苯甲酸和山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各25.0ml、糖精鈉和甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各12.5ml、乙?;前匪徕洏?biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液5.0m置于100ml容量瓶中,加高純水至刻度,混勻備用,此溶液含苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉各250μg/ml,乙?;前匪徕洖?0μg/ml。
1.2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備
吸取甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml,分別置于50ml容量瓶中,加高純水定容至刻度混勻,甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的濃度各為5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0μg/ml,乙酰磺胺酸鉀濃度為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μg/ml,以此作為標(biāo)準(zhǔn)系列應(yīng)用液,按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定,每個(gè)濃度重復(fù)3次,以濃度為橫坐標(biāo),峰面積均值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)。
1.2.4樣品測(cè)定
將試樣加熱,攪拌除去二氧化碳或超聲脫氣,然后吸取一定體積除去二氧化碳后的試樣,用高純水稀釋10倍(根據(jù)試樣中被測(cè)物含量高低進(jìn)行稀釋?zhuān)?.45μm微孔濾膜過(guò)濾,濾液供離子色譜測(cè)定,進(jìn)樣25μl。
1.2.5結(jié)果計(jì)算
根據(jù)樣品峰的峰面積,在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)上查含量,再換算出樣品中甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和乙?;前匪徕浀暮?。
2結(jié)果
2.1標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果及標(biāo)準(zhǔn)色譜圖
苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉和乙?;前匪徕洠ò操惷郏┑臉?biāo)準(zhǔn)線(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1和表2,線(xiàn)性范圍分別為,苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉均為5.0~30μg/ml,安賽蜜為1.0~6.0μg/ml。標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見(jiàn)圖1。
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