目的建立高效液相色譜法同時(shí)測定奶味飲料中的香蘭素和乙基香蘭素的檢測方法。方法樣品經(jīng)含5%乙酸的乙腈溶液提取液提取,超聲處理后,使用乙腈定容,高速離心后上清液過0.22μm微孔濾膜。使用高效液相色譜檢測,檢測波長308 nm,外標(biāo)法定量。結(jié)果本方法前處理簡便易操作,香蘭素和乙基香蘭素在0.1~100μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.999,以3 S/N作為最低檢出限,方法的檢出限均為0.02μg/mL,加標(biāo)回收率分別為97.0%~101.1%、96.0%~100.5%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%。結(jié)論該方法操作簡便,準(zhǔn)確度高,重現(xiàn)性好,適合奶味飲料中的香蘭素和乙基香蘭素的快速測定。

1引言

香蘭素和乙基香蘭素作為食品用香料類的食品添加劑,由于能夠極大的增強(qiáng)飲料的奶香氣息,在奶味飲料中的應(yīng)用非常廣泛。但香蘭素和乙基香蘭素的大量攝入會導(dǎo)致頭暈、惡心、嘔吐、呼吸困難等反應(yīng),甚至對人體的肝、腎等代謝器官帶來極大損傷。

目前常見的香蘭素和乙基香蘭素的檢測方法有紫外分光光度法、氣相色譜法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。分光光度法進(jìn)行聯(lián)合檢測時(shí)無法將兩者區(qū)分,存在相互的干擾,在食品檢測中應(yīng)用較少;氣相色譜法前處理周期長,容易造成被測物在空氣中的氧化,因而容易帶來精密度差的問題;液相色譜法操作簡單,精密度高,重復(fù)性好,但目前多應(yīng)用于嬰幼兒乳粉和乳制品中,在奶味飲料中應(yīng)用不多,而且存在著前處理繁瑣的問題;液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對設(shè)備要求較高,操作繁瑣,在基層檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)中推廣困難。

奶味飲料,尤其是奶茶近些年在年輕人群體中日漸風(fēng)靡,其中也不乏有一些不良商家過度添加香蘭素和乙基香蘭素作為奶味增加劑,增加飲料的口感,極大的危害了人民的健康。建立一種簡便的香蘭素和乙基香蘭素的快速聯(lián)合檢測方法,能夠及時(shí)的獲得奶味飲料中的奶味添加劑含量,對于奶茶行業(yè)的監(jiān)督、指導(dǎo)和規(guī)范具有重要意義。

本研究建立了一種利用高效液相色譜法同時(shí)測定奶味飲料中的香蘭素和乙基香蘭素的方法,以期對奶味飲料中的香蘭素和乙基香蘭素的檢測和監(jiān)管提供了一種簡便有效的方式。

2材料與方法

2.1儀器與試劑

Agilent 1260型高效液相色譜儀(配DAD檢測器)、Ultrasonic Cleaner超聲波發(fā)生器、TB-215D分析天平[丹佛儀器(北京)有限公司];TG16WS高速離心機(jī)(長沙湘智離心機(jī)儀器有限公司)。

香蘭素(純度≥99.0%)、乙基香蘭素(純度≥98.0%)(上海麥克林生化科技有限公司)。

乙腈、甲醇(色譜純)、乙酸、甲酸、正己烷、乙酸銨(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);0.22μm有機(jī)濾膜(天津津滕有限公司);實(shí)驗(yàn)室用水超純水。

無添加純牛奶、養(yǎng)樂多、奶昔、多種口味奶茶均為市售。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1溶液配制

混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液配制:分別準(zhǔn)確稱取500 mg的香蘭素和乙基香蘭素于100 mL的容量瓶中使用含有5%乙酸的乙腈溶液溶解,定容,配制成分別含有香蘭素和乙基香蘭素均為5 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)貯備液,避光,4℃保存。

混合標(biāo)準(zhǔn)中間液配制:精確量取2 mL香蘭素和乙基香蘭素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液于100 mL的容量瓶中使用含有5%乙酸的乙腈溶液定容,配制成分別含有香蘭素和乙基香蘭素均為100μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,避光,4℃保存。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制:分別量取適量的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液,使用含有5%乙酸的乙腈溶液配制成含有0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10、20、50、100μg/mL香蘭素和乙基香蘭素的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

2.2.2樣品前處理

準(zhǔn)確量取2 mL的奶味飲料,置于10 mL的離心管中,加入2 mL 5%乙酸的乙腈溶液,充分振搖,超聲處理5 min,使用乙腈定容后,將溶液充分振蕩均勻后,10000 r/min離心10 min。取上清,過0.22μm有機(jī)濾膜后,供高效液相色譜測定。

2.2.3液相色譜條件

色譜柱:SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);柱溫:30℃;流量:1.0 mL/min;流動相:乙腈+水+甲醇+乙酸+甲酸+乙酸銨=100 mL+600 mL+300 mL+12.5 mL+0.4 mL+0.6 g;檢測波長:308 nm;進(jìn)樣量:10μL;以色譜峰的保留時(shí)間定性,采用外標(biāo)法峰面積定量。

聲明：本文所用圖片、文字來源《食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)》2020年9月，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系

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