（3）茚三酮顯色法

取膠囊內(nèi)容物200mg，加水10mL溶解，過濾，取濾液5mL，于10mL具塞試管中，作為樣品溶液；取鹽酸氨基葡萄糖對照品25mg，于10mL具塞試管中，加水5mL溶解，制成對照品溶液；按樣品配方和工藝制成不含鹽酸氨基葡萄糖膠囊內(nèi)容物200mg，與樣品同法制成陰性樣品溶液的方法實驗后觀察，樣品和對照品溶液為藍紫色，陰性樣品則無此反應(yīng)，如圖4所示。

（4）薄層色譜法

取膠囊內(nèi)容物50mg于分液漏斗中，加水10mL溶解，加石油醚（30～60⁰C）20mL，振搖，靜置分層，取下層液過濾，作為樣品溶液；取鹽酸氨基葡萄糖對照品10mg，加水5mL溶解，作為對照品溶液；按樣品配方和工藝制成不含鹽酸氨基葡萄糖膠囊內(nèi)容物50mg，與樣品同法制成陰性樣品溶液的方法實驗后觀察，整個薄層色譜圖層次分明，斑點清晰可見，樣品和對照品只有一個斑點，位置在一條線上，R_f值一致，均顯相同深紅色斑點，陰性樣品不顯色，如圖5所示。

該項研究與現(xiàn)有的國家藥品標準GB/T20365-2006在樣品提取、展開劑和顯色方式上作了較大改進。因為藥品是化學(xué)純品，可以用水直接提取，展開劑為甲醇-濃氨水=（9:1，V:V），展開，晾干后噴以茚三酮顯色劑。而勁骨膠囊是多種原料混合物，若按此法分離顯色效果較差，背景棕黑色，斑點模糊不清。本法樣品先用石油醚脫脂和除去脂溶性色素，以正丁醇-乙醇-冰醋酸-水=（4:1:1:2，V:V:V:V）為展開劑，茚三酮顯色劑溶解在展開劑中，展開與顯色同時進行，遠比噴灑顯色要均勻，便于操作，背景白色，斑點深紅色，反差大，圖譜更清晰。

這些鑒別方法都從不同角度證明樣品中真實存在鹽酸氨基葡萄糖。同時所有方法的陰性樣品都不顯色，說明這些方法專屬性強。

2、薄層色譜法鑒別白芍提取物

取膠囊內(nèi)容物2g，加乙醇40mL，超聲提取20min，過濾，濾液水浴蒸干，殘渣加水20mL溶解，加水飽和正丁醇溶液振搖提取2次，每次20mL，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇1mL溶解，作為樣品溶液；取白芍對照提取物1g，加乙醇30mL，與樣品同法制成對照提取物溶液；取白芍對照藥材0.5g，加乙醇10mL，與樣品同法制成對照藥材溶液；取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成1mg/mL溶液，作為對照品溶液；按樣品配方和工藝制成不含白芍及白芍提取物膠囊內(nèi)容物2g，與樣品同法制成陰性樣品溶液。的方法實驗后觀察，樣品色譜中，在與白芍對照提取物，白芍對照藥材，芍藥苷對照品相應(yīng)位置上顯相同顏色的藍紫色斑點，Rf值一致，陰性樣品不顯色，如圖6所示。

國內(nèi)外關(guān)于白芍及白芍提取物報道較少，Yan等用HPLC、LC-MS等方法測定白芍中芍藥苷等化學(xué)成分，而不是白芍提取物的鑒別。中國藥典一部有鑒別白芍單味藥材的薄層色譜法，實驗中僅設(shè)計芍藥苷1個對照物。但由于本研究樣品是多種原料混合物，之間相互干擾，如直接應(yīng)用，無法分離。參考相關(guān)文獻，采用水飽和正丁醇萃取，除去樣品中干擾物質(zhì)，可使芍藥苷得到了很好分離。結(jié)果顯示，樣品與對照組的芍藥苷斑點位置、顏色均保持一致，這比單一對照品鑒別方法更加可信。

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