天然植物提取物是指采用一定的溶劑和方法，以植物(植物全部或者某一部分)為原料，經(jīng)過提取、分離、純化過程，得到的活性成分(如酚酸、黃酮、精油、生物堿、多糖等)…，具有含量穩(wěn)定、無污染、無殘留、易吸收等優(yōu)點。天然植物提取物種類繁多，來源廣泛，具有抗氧化、抗腫瘤、抗癌等作用。如：天然葉黃素目前主要來源于萬壽菊，不僅使用效果較好，且能有效對人們慢性疾病予以防治，尤其是在保護視力以及增強免疫力方面，具有非常顯著的應用效果；天然番茄紅素目前主要來源于茄科植物西紅柿，是一種很強的抗氧化劑，具有較強的消除自由基的能力，還具有防癌、抗癌、預防心腦血管等疾病，美容祛皺等功效，有“植物黃金”之稱；葡萄籽中富含原花青素及抗癌物白藜蘆醇，其中多酚含量在95％以上；咖啡豆中除含有揮發(fā)性物質(zhì)外，還含有多酚類化合物…，綠原酸作為其中主要的活性成分，具有抗病毒…、抗氧化活性，還可以降低患有自發(fā)性高血壓鼠和人的血壓；姜黃提取物姜黃素類物質(zhì)具有降血脂、抗凝、抗氧化、利膽、抗癌等作用。因此，隨著人民生活水平的提高和健康意識的增強，天然植物提取物的使用范圍日益廣泛，市場需求量日益增加，目前，天然植物提取物已被廣泛應用于食品添加劑、食品保鮮、養(yǎng)殖業(yè)、農(nóng)藥殺蟲劑、醫(yī)藥等領域。

多環(huán)芳烴(PAHs)是廣泛存在于環(huán)境中的一種持久性有機污染物，具有很強的致畸、致突變、致癌性，由于性質(zhì)穩(wěn)定、難于降解，PAHs在空氣、水體、土壤中呈不斷積累的趨勢，并主要通過根部吸收和植物葉片吸收，進入植物體內(nèi)。在植物提取加工過程中，植物體內(nèi)多環(huán)芳烴隨有機溶劑遷移至天然植物提取物中，嚴重影響天然植物提取物行業(yè)的健康發(fā)展。我國強制性食品安全標準GB 2762—2017《食品安全國家標準食品中污染物限量》中單純以苯并［α］芘含量為評價指標，而歐盟委員會835／2011號文件規(guī)定了食品中PAHs污染的另一個評價指標為PAH4苯并［α］蒽(BaA)，苯并［α］熒蒽(BbF)，苯并［α］芘(BαP)的總含量，相較于歐盟以PAH4的總含量作為評價指標而言，我國單純以BαP的含量作為評價指標得出的結(jié)果較為片面。因此，研究能夠快速同時測定PAH4總含量的方法具有重要意義。

目前，關于多環(huán)芳烴的檢測方法主要包括氣相色譜法、氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜一三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜法和高效液相色譜法等，檢測對象主要是環(huán)境、空氣、土壤、水體、植物油等，尚未見關于天然植物提取物中多環(huán)芳烴檢測方法的文獻報道，由于天然植物提取物基質(zhì)復雜，有關多環(huán)芳烴檢測的標準方法及文獻方法不能直接應用，如何準確測定天然植物提取物中多環(huán)芳烴，是亟需解決的問題。本文采用高效液相色譜法檢測5種天然植物提取物中4種多環(huán)芳烴，方法對天然植物提取物適用性強，檢測準確性高，對天然植物提取物的質(zhì)量控制具有十分重要的意義。

一、材料與方法

1、材料與試劑

丙酮(色譜純，美國SR)；甲醇(色譜純，美國SR)；正己烷(色譜純，美國SR)；二氯甲烷(色譜純，美國SR)；乙醇(色譜純，美國SR)；乙腈(色譜純，美國SR)；環(huán)己烷(分析純，天津市永大化學試劑有限公司)；乙酸乙酯(分析純，天津市永大化學試劑有限公司)；超純水(18．2MΩ，實驗室純水機自制)；16種多環(huán)芳烴標準品混標(200μg/mL，o2si)、多環(huán)芳烴固相萃取柱(SPE)(500mg，6mL，上海安譜實驗科技股份有限公司)。

2、儀器與設備

Waters E2695高效液相色譜儀，配備2475熒光檢測器；濟寧天華超聲電子儀器有限公司TH一600型超聲波清洗器；島津制作所AUY220型分析天平；大龍興創(chuàng)實驗儀器(北京)有限公司Mx—S型漩渦混合器；天津泰斯特儀器有限公司DK一98一IIA型電熱恒溫水浴鍋；長沙湘儀離心機儀器有限公司H一2050R型高速冷凍離心機；北京萊伯泰科儀器有限公司GPC800一Vonex型凝膠滲透色譜儀；上海申生科技有限公司R213B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

3、色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse PAH C18(4.6×250mm，5μm)；柱溫：40℃；檢測波長：淈：激發(fā)波長270nm，發(fā)射波長385m；苯并(b)熒蒽、苯并(a)蒽、苯并(a)芘：激發(fā)波長288nm，發(fā)射波長430nm；進樣量：100μL；流速：1.5mL／min；運行時間：40min；流動相A：水；流動相B：乙腈。

4、前處理方法

（1）萬壽菊提取物

精確稱取0.19萬壽菊提取物樣品(精確至0.00019)于25mL容量瓶中，用玻璃移液管加入2mL色譜純丙酮促溶，渦旋使其混合均勻后，加入GPC流動相定容，搖晃混合均勻，超聲溶解。使用玻璃注射器，用0.22um濾膜過濾至GPC進樣管中，經(jīng)GPC凈化。

收集液使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至近干，氮氣吹干，用2mL 88％乙腈水溶液準確定容，超聲溶解，樣品液使用一次性注射器過0.22μm濾膜，裝小瓶進樣檢測。

（2）番茄提取物

精確稱取0.2～0.39番茄提取物樣品(精確至0.00019)于25mL具塞玻璃試管中，用玻璃移液管加入2mL色譜純二氯甲烷促溶，渦旋使其混合均勻后，加入GPC流動相定容，搖晃混合均勻，在40℃以上的超聲波清洗機中超聲提取30min。在3500r／min、5℃條件下離心5min。使用玻璃注射器，用0.22μm濾膜過濾至GPC進樣管中，經(jīng)GPC凈化。

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