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相關性分析結果(表2)表明,“玫瑰香”品種火龍果的NAD-MDH和PEPC活性與蘋果酸含量呈極顯著正相關(P<0.01),NADP-ME活性與蘋果酸含量呈極顯著負相關(P<0.01):“大紅一號”品種火龍果的NAD-MDH活性與蘋果酸含量呈顯著正相關(P<0.05),PEPC活性與蘋果酸含量呈正相關,NADP-ME活性與蘋果酸含量呈負相關。
采用RT-qPCR測定火龍果蘋果酸代謝相關基因的相對表達量。MDP-ME基因主要參與調控蘋果酸的降解,如圖5a所示,NADP-ME的表達量在“玫瑰香”品種和“大紅一號”品種火龍果中均呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢,在貯藏第8天,該基因在“玫瑰香”品種中的表達量顯著高于“大紅一號”,且相關性分析(表2)表明“玫瑰香”品種NADP-ME的相對表達量與酶活呈極顯著正相關:“大紅一號”品種的NADP-ME相對表達量與酶活呈顯著正相關,表明NADP-ME基因的表達水平與火龍果果實貯藏過程中蘋果酸含量密切相關,直接影響果實的口感和風味。
PEPC和NAD-MDH基因是果實發(fā)育過程中蘋果酸代謝的關鍵基因,與蘋果酸的合成相關。PEPC和NAD-MDH主要參與蘋果酸的合成。由圖5b可知,PEPC相對表達量在貯藏過程中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。細胞質內的丙酮酸被還原為乳酸,導致細胞質內可轉化為蘋果酸的丙酮酸含量降低,問接導致細胞質內的蘋果酸含量的降低。在貯藏第6天,“玫瑰香”品種的NAD-MDH相對表達量達到峰值,與PEPC酶活性呈負相關:在貯藏第4天,“大紅一號”品種的相對表達量達到峰值,與PEPC酶活呈正相關。如圖5c所示,NAD-MDH相對表達量總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢,相關性分析表明,“玫瑰香”品種的NAD-MDH相對表達量與酶活呈極顯著正相關:“大紅一號”品種的NAD-MDH相對表達量與酶活呈顯著正相關,這與Famiani等的研究結果一致。PEPC和NAD-MDH2個基因的相對表達水平與火龍果果實貯藏過程中蘋果酸的積累密切相關,直接影響果實的口感和風味。
紅肉火龍果采后品質劣變由果皮和果肉硬度下降及可滴定酸、抗壞血酸、總酚含量降低共同導致。蘋果酸為紅肉火龍果果實中有機酸的主要成分,其含量變化導致果實有機酸含量下降。負責蘋果酸合成的NAD-MDH和PEPC的酶活性與蘋果酸含量呈正相關。而負責蘋果酸降解的NADP-ME則與蘋果酸含量呈負相關。進一步研究測定蘋果酸相關代謝酶NADP-ME、PEPC和NAD-MDH基因水平變化,發(fā)現(xiàn)蘋果酸代謝相關基因水平的變化與酶活的變化趨勢一致。火龍果采后貯藏過程中,PEPC和NAD-MDH的基因水平呈下降趨勢,而NAD-MDH的基因水平呈上升趨勢,使得果實中蘋果酸合成受阻,降解加劇,最終導致蘋果酸含量下降,火龍果在貯藏過程中品質變劣。
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