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嬰幼兒奶粉中存在的阪崎克羅諾桿菌對(duì)嬰幼兒危害性極強(qiáng),衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該微生物有嚴(yán)格限制,但檢出現(xiàn)象仍然時(shí)有發(fā)生。阪崎克羅諾桿菌在嬰幼兒奶粉生產(chǎn)線(xiàn)中的潛伏存在多種因素,本文闡述了其在生產(chǎn)空間中的暴露特征,重點(diǎn)論述逆境脅迫下該菌耐受表型和活的非可培養(yǎng)表型形成的隱性污染對(duì)監(jiān)測(cè)和清除污染殘留不利。討論了各類(lèi)檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn),強(qiáng)調(diào)檢測(cè)靈敏度、回收率和區(qū)分活的非可培養(yǎng)狀態(tài)菌對(duì)于控制隱性污染的重要性。以期為阪崎克羅諾桿菌的監(jiān)測(cè)和防控提供新思路,為保障嬰幼兒奶粉生產(chǎn)安全提供參考和建議。
嬰幼兒奶粉(Powdered Infant Fomula,PIF)作為嬰幼兒母乳替代品被廣泛使用,其安全性一直是關(guān)注重點(diǎn)。嬰幼兒食品在加工過(guò)程中很容易受到各種致病菌污染,而嬰幼兒自身免疫功能尚不成熟,相比其他人群更容易感染食源性致病菌。阪崎克羅諾桿菌是PIF微生物重點(diǎn)檢測(cè)指標(biāo),感染后能導(dǎo)致嬰幼兒患病甚至死亡,對(duì)嬰幼兒危害性極強(qiáng)。
因此我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB10765-2010《嬰兒配方食品》中嚴(yán)格規(guī)定阪崎克羅諾桿菌在PIF中檢出限為0 CFU/100g,需要高效準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)該菌的檢出。然而目前PIF中阪崎克羅諾桿菌污染途徑和污染控制方法仍然存在許多未知,耐受表型的存在為該菌的清除增加困難,“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”表型阪崎克羅諾桿菌在PIF中的污染情況也沒(méi)有引起足夠的重視,明確細(xì)菌數(shù)量存在困難,形成的隱形污染造成阪崎克羅諾桿菌漏檢,人類(lèi)了解和控制阪崎克羅諾桿菌污染處于不利處境。
目前相關(guān)檢測(cè)方法致力于檢出痕量存在的阪崎克羅諾桿菌,同時(shí)防止“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”表型被漏檢,各種PCR技術(shù)和免疫檢測(cè)方法被運(yùn)用,靈敏度提升和“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”菌的定量研究獲得一定成效,不過(guò)這些方法大多需要長(zhǎng)時(shí)間富集來(lái)提高回收率和靈敏度,增加了時(shí)間消耗,未來(lái)需要在著重提高檢測(cè)靈敏度的同時(shí)簡(jiǎn)化流程、提升效率、區(qū)分“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”菌,開(kāi)發(fā)出具有針對(duì)性的檢測(cè)技術(shù),以期保障嬰幼兒奶粉產(chǎn)品安全。本文通過(guò)PIF生產(chǎn)中阪崎克羅諾桿菌的暴露情況,分析了該菌在PIF生產(chǎn)環(huán)境脅迫下的耐受表型和“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”表型存在的潛在污染,歸納了針對(duì)性的新型檢測(cè)方法應(yīng)用來(lái)提高PIF安全性的方法,為PIF阪崎克羅諾桿菌污染防控提供參考。
阪崎克羅諾桿菌(Cronobacter sakazakii),克羅諾桿菌屬,腸桿菌科,原先被稱(chēng)為阪崎腸桿菌,能引起新生兒、早產(chǎn)兒、低體重出生的嬰兒等免疫力低下人群感染壞死性小腸結(jié)腸炎、敗血癥、腦膜炎和嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥甚至死亡。雖然該菌對(duì)嬰幼兒感染概率低,但致病率死亡率極高,研究報(bào)道阪崎克羅諾桿菌導(dǎo)致新生兒患病后死亡的概率為26.9%~80%,嚴(yán)重威脅嬰幼兒安全。
作為最受關(guān)注的PIF微生物危害,雖然阪崎克羅諾桿菌感染途徑和方式尚不十分明確,但大部分阪崎克羅諾桿菌感染病例與PIF污染的因果關(guān)系已被證實(shí),該菌被FAO-WHO列為與PIF相關(guān)的A類(lèi)致病菌。一項(xiàng)報(bào)道中提到全球絕大多數(shù)病例報(bào)告來(lái)自美國(guó)、英國(guó)、法國(guó)、比利時(shí)和菲律賓五個(gè)國(guó)家,但需要注意一些非發(fā)達(dá)地區(qū)對(duì)該菌的認(rèn)識(shí)和研究有限,如表1近5年國(guó)內(nèi)外關(guān)于阪崎克羅諾桿菌在市售PIF中的部分監(jiān)測(cè)報(bào)道顯示,最常用的檢測(cè)方法是基于選擇性培養(yǎng)和生化鑒定的歐盟或美國(guó)的食品安全標(biāo)準(zhǔn),容易漏檢、靈敏度低,國(guó)內(nèi)外關(guān)于阪崎克羅諾桿菌的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)和感染率報(bào)告仍然不足,可能存在沒(méi)有獲得準(zhǔn)確的分離數(shù)據(jù)和監(jiān)測(cè)研究報(bào)道的情況,所以該菌的污染是全球普遍問(wèn)題。
我國(guó)自2011年將阪崎克羅諾桿菌加入嬰幼兒配方奶粉微生物限量指標(biāo)后,該菌在奶粉中的污染情況有所好轉(zhuǎn),檢出率由2004年時(shí)的12.64%降低到2020年的0.6%,但商品PIF檢出阪崎克羅諾桿菌指標(biāo)不合格而被召回的情況仍有發(fā)生,PIF中存在的阪崎克羅諾桿菌污染和危害仍然需要警惕。
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檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室通過(guò)了中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)(CNAS)認(rèn)可,表明其作為第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),所出具的報(bào)告具有權(quán)威性和公信力。檢測(cè)報(bào)告作為實(shí)驗(yàn)室最終輸出的產(chǎn)品,其質(zhì)量關(guān)系到實(shí)驗(yàn)室的信譽(yù)和競(jìng)爭(zhēng)力,而報(bào)告中檢測(cè)結(jié)果的有效性控制又是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理工作的重中之重。
了解更多> >采樣器的放置。在放置采樣器時(shí)需要保持一定的距離,避免測(cè)量結(jié)果相比實(shí)際情況有過(guò)大的誤差。比如,電機(jī)磨損就會(huì)增加碳類(lèi)污染物數(shù)量,導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高,因此在增加氣泵、電機(jī)的氣流條件下,還需要適當(dāng)將采樣器移遠(yuǎn)一些再進(jìn)行測(cè)量。另外,還需確保采樣管材料的穩(wěn)定性,在采集SO2時(shí)的溫度一般可達(dá)120℃,這就需要采樣管有一定的穩(wěn)定性,以確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
了解更多> >標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在檢驗(yàn)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中已經(jīng)被廣泛地使用,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)則等文件的規(guī)定,對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理何使用需要以嚴(yán)格的規(guī)范制度為保障。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理而言,一般會(huì)從物品的采購(gòu)與驗(yàn)收、臺(tái)賬的建立以及核查等方面入手,為檢驗(yàn)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理提供借鑒方法。
了解更多> >選取科學(xué)合理的檢驗(yàn)方法。如果某種食品存在著幾種可用的檢驗(yàn)方法,那么如何選擇最適合的檢測(cè)方法也是極為重要的。選擇過(guò)程中要綜合考量檢測(cè)性質(zhì)、檢測(cè)效能、實(shí)驗(yàn)室中所具備條件、檢測(cè)人員的分配等因素。例:在檢測(cè)樣品中水分含量時(shí),就會(huì)有超過(guò)兩種的檢測(cè)方法,這種情況下,就要對(duì)是哪種物質(zhì)進(jìn)行的檢測(cè),如果是測(cè)糖類(lèi)的水分含量,那么就應(yīng)選擇減壓干燥法;如果是對(duì)具有揮發(fā)性物質(zhì)樣品,就要采用蒸餾法;如果是谷類(lèi),就要采用直接干燥法。所以在選擇中還要注意主體食品的屬性,選擇最合適的檢測(cè)法。
了解更多> >將所制備的EAEC菌體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分別存放于25℃和37℃條件下,于1、3、5、7天各抽取3個(gè)樣品,通過(guò)螺旋涂布進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果如表5所示,EAEC菌體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在25°C條件下保存7天穩(wěn)定性良好,在37℃環(huán)境下5天內(nèi)穩(wěn)定情況良好,第7天活菌數(shù)量下降出現(xiàn)不穩(wěn)定現(xiàn)象,但菌含量仍能維持在103CFU/樣品水平條件,即滿(mǎn)足定性樣品的要求。
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