文冠果研究開發(fā)進(jìn)展（四）

發(fā)布時(shí)間：2021-05-29 23:24 編輯者：特邀作者夏德婷

2藥理作用

文冠果有多方面的藥理活性，如神經(jīng)保護(hù)、抑菌、抗氧化、抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抗HIV、抗凝血等。近年來，對(duì)文冠果三萜類成分防治阿爾茲海默癥（AD）及抗癌的機(jī)制研究較為深入。

2.1神經(jīng)保護(hù)

AD的病因復(fù)雜，已經(jīng)提出的學(xué)說包括Aβ沉積、Tau蛋白異常磷酸化、膽堿能、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等。LI Y等采用行為學(xué)方法研究了Aβ25-35誘導(dǎo)的AD動(dòng)物模型的學(xué)習(xí)記憶功能，并用高爾基染色觀察了CA1錐體神經(jīng)元和Western blotts中樹突棘的形成。結(jié)果表明，口服文冠果提取物（5、10 mg·kg-1）可顯著降低行為測(cè)試中的認(rèn)知損傷，改善海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元的樹突棘密度缺失，上調(diào)突觸中的主要支架蛋白PSD95。其機(jī)制可能是通過激活BDNF/TrkB信號(hào)通路和抑制RhoA/ROCK2信號(hào)通路來實(shí)現(xiàn)的，證明文冠果提取物可以恢復(fù)或重建神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，改善認(rèn)知障礙。LI W等從文冠果分離鑒定了8個(gè)玉蕊醇型三萜，首先測(cè)試了對(duì)H2O2誘導(dǎo)的人SH-SY5Y細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷保護(hù)作用。通過Y迷宮、Morris水迷宮、新物體識(shí)別和被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)篩選出3-O-(3′-O-angeloyl)-β-D-glucopyranosyl,28-O---β-D-glucopyranosyl-16-deoxybarringtogenol C（75）對(duì)ICV-Aβ1-42誘導(dǎo)的學(xué)習(xí)記憶損傷小鼠有明顯的保護(hù)作用。文獻(xiàn)對(duì)文冠果殼苷（76）用于治療阿爾茲海默癥進(jìn)行了機(jī)制的研究。ZHOU H X等研究發(fā)現(xiàn)文冠果殼苷可以調(diào)節(jié)AD大鼠腸道微生物菌群的結(jié)構(gòu)，腸道微生物菌群的變化與內(nèi)源性代謝產(chǎn)物密切相關(guān)，最終緩解AD的癥狀。腸道菌群可能是文冠果殼苷通過微生物-腸道-腦途徑發(fā)揮作用的潛在機(jī)制。齊越等探究發(fā)現(xiàn)文冠果殼苷（0.08～0.32mg·kg-1）顯著提高側(cè)腦室注射Aβ1-42致癡呆模型小鼠Y迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠自發(fā)交替反應(yīng)率；顯著縮短水迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠到達(dá)安全臺(tái)的逃避潛伏期及游泳路程，并顯著增加小鼠在原安全臺(tái)所在象限游泳時(shí)間和游泳路程百分比；文冠果殼苷可顯著抑制模型小鼠海馬促炎癥因子IL-6含量的增加及炎癥抑制因子IL-4含量的減少；抑制大腦皮層及海馬CD11b蛋白的表達(dá)；Western blot結(jié)果顯示，文冠果殼苷可顯著降低誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、環(huán)氧合酶-2（COX-2）蛋白的表達(dá)；抑制NF-κB及MAPK蛋白的激活；RT-PCR結(jié)果顯示，文冠果殼苷可顯著抑制iNOS、COX-2及TLR2mRNA表達(dá)。故認(rèn)為文冠果可作為治療神經(jīng)退行性疾病的藥物。SUN Z、LING J及RONG W W等利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，分別通過測(cè)定大鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)、大鼠血漿中潛在抗阿爾茲海默病活性物質(zhì)—WGA，以及藥動(dòng)學(xué)和代謝組學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)果殼中的三萜皂苷和多酚可能參與了包括神經(jīng)炎癥、能量代謝和抗氧化能力等多個(gè)途徑的調(diào)節(jié)。此外，付琪等研究發(fā)現(xiàn)文冠果柄苷（33）具有改善腦缺血再灌注所致的學(xué)習(xí)記憶障礙作用，其機(jī)制可能與減輕自由基損傷、維持細(xì)胞內(nèi)離子穩(wěn)態(tài)、改善腦能量代謝、減少NO的過量生成、抑制NOS的激活及逆轉(zhuǎn)海馬CA1區(qū)的組織病理學(xué)改變等相關(guān)。

2.2抑菌及抗氧化

酚類成分被普遍認(rèn)為是抑菌、抗氧化活性成分，齊國雨等通過清除DPPH自由基、羥基自由基以及總還原力試驗(yàn)測(cè)定文冠果果殼提取物抗氧化活性，牛津杯法測(cè)定抑菌活性，結(jié)果表明文冠果果殼乙酸乙酯萃取物具有較好的抗氧化活性及抑菌活性，濃度0.75mg·mL-1時(shí)對(duì)DPPH自由基清除率達(dá)97.245%；對(duì)肺炎克雷伯菌，金黃色葡萄球菌以及地衣芽孢桿菌最低抑菌濃度為2.5mg·mL-1。王志玲等使用乙醇/水（75%）、乙酸乙酯、石油醚對(duì)文冠果果殼進(jìn)行溶劑提取，并通過逐步回歸分析法研究提取物中可能的抑菌成分，結(jié)果說明文冠果果殼乙醇提取物具有較強(qiáng)的抑菌活性，其中富含的單寧和皂苷為多數(shù)植物病原菌的影響因子。YANG C Y等從文冠果殼中分離得到37種多酚類化合物，部分化合物在ABTS實(shí)驗(yàn)中顯現(xiàn)出比抗壞血酸更強(qiáng)的清除自由基的活性，是一種具有開發(fā)利用價(jià)值的天然抗氧化劑。

2.3抗腫瘤

研究顯示文冠果中三萜及其皂苷具有抗腫瘤活性。WANG D對(duì)分離得到的7個(gè)三萜成分進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn)，篩選出一個(gè)玉蕊醇C型化合物對(duì)3種人腫瘤細(xì)胞株（HCT-116、HepG-2和U87-MG）顯示中等抑制活性，其IC50分別為33、48和21μmol·L-1。丁曉彥等采用MTT法對(duì)文冠果果殼中Fr.2、Fr.2-1、Fr.2-1-1 3種提取物進(jìn)行人乳腺癌細(xì)胞MCF-7抑制活性的篩選，分離得到的Fr.2-1-1純度為97.6%，抑制作用最強(qiáng)，F(xiàn)r.2-1次之，F(xiàn)r.2效果最弱，各樣品對(duì)MCF-7細(xì)胞抑制作用均有濃度、時(shí)間依賴性。關(guān)于其構(gòu)效關(guān)系，WANG D等通過3D-QSAR計(jì)算表明，玉蕊醇衍生物C-21和C-22位的當(dāng)歸?；?、C-15和C-16位的羥基以及C-3位的糖鏈在抑制HCT-116細(xì)胞增殖中起關(guān)鍵作用。李占林等從文冠果果殼以及其總皂苷酸水解產(chǎn)物中分離得到齊墩果烷型三萜類成分在體外大多數(shù)具有腫瘤抑制活性，并將其構(gòu)效關(guān)系總結(jié)為①結(jié)構(gòu)中15、16位發(fā)生α-羥基取代以及28位發(fā)生糖苷化后，體外腫瘤抑制活性降低；②結(jié)構(gòu)中24位發(fā)生羥基取代，3位或21位發(fā)生糖苷化后，可以增強(qiáng)其腫瘤抑制活性；③21、22位酰基種類以及取代形式對(duì)其活性也有影響，但在不同類型母核中作用存在差異。對(duì)于抗腫瘤機(jī)制，JIAO Q等發(fā)現(xiàn)文冠果殼苷通過線粒體介導(dǎo)的凋亡途徑，通過下調(diào)IGF-1R/Raf/MEK/ERK級(jí)聯(lián)信號(hào)通路來誘導(dǎo)A375.S2細(xì)胞凋亡。榮語媚研究發(fā)現(xiàn)文冠果殼苷可濃度依賴性地抑制HepG-2、SGC-7902、A375-S2、A431、MCF-7細(xì)胞增殖，其IC50分別為5.10、4.07、3.64、4.56、4.20μmol·L-1，且對(duì)人正常外周血淋巴細(xì)胞沒有增殖抑制作用，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)文冠果殼苷可能主要是通過細(xì)胞壞死的形式誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7死亡，且其誘導(dǎo)的細(xì)胞壞死與線粒體損傷和氧化應(yīng)激有關(guān)，而這種細(xì)胞壞死可能與Fas/TNFR-RIP1途徑無關(guān)。

2.4抗炎鎮(zhèn)痛作用

匡榮等研究顯示文冠木正丁醇提取物對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的原發(fā)性和繼發(fā)性關(guān)節(jié)腫脹均有抑制作用，且能改善大鼠的全身癥狀；灌胃能顯著抑制小鼠單核-巨噬細(xì)胞的吞噬功能、α,κ值均明顯降低、抑制綿羊紅細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠抗體生成、抑制DNCB誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)。陳廣榮等的研究也顯示文冠木抗炎作用與免疫抑制有著密不可分的關(guān)系。YOON J J等采用體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，觀察文冠果提取物（1~50μg·mL-1）對(duì)腫瘤壞死因子-α（TNF-α）誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）血管炎癥的保護(hù)作用，結(jié)果顯示文冠果可能通過抑制NF-κB/ROS通路和激活Nrf-2/HO-1通路來預(yù)防與血管炎癥相關(guān)的血管并發(fā)癥。LI N等對(duì)文冠果葉中潛在的神經(jīng)炎癥抑制活性酚類物質(zhì)進(jìn)行研究，其中quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside、catechin、syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside和4-O-β-D-glucopyranosyl-trans-p-coumaric acid是文冠果抗神經(jīng)炎作用的主要成分，在LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞中抗神經(jīng)炎作用明顯強(qiáng)于陽性對(duì)照米諾環(huán)素。

2.5抗HIV作用

馬朝梅等研究發(fā)現(xiàn)文冠木甲醇提取物具有中度的體外抗HIV-1蛋白酶活性，3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oic acid、oleanolic acid、epigallocatechin-(4β→8,2β→O-7)-epicatechin的IC50分別為20、10、70μg·mL-1。李在留等對(duì)文冠果種皮中的香豆素進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)臭矢菜素B具有較強(qiáng)的體外抗HIV-1活性并對(duì)HIV-1IIIB感染的MT4細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。