（3）pH對(duì)紅花籽粕水解度的影響

在酶用量為2.9%、超聲時(shí)間為10min、超聲溫度為55℃的條件下，分別測(cè)pH為6、6.5、7、7.5、8的情況下水解1h，其水解度和還原力結(jié)果如圖6、圖7所示。

由圖6、圖7可知，隨著pH的升高，紅花籽粕的水解度和還原力出現(xiàn)先升高，后下降的趨勢(shì)，并且在pH為6.5時(shí)，其水解度和還原力最大。這可能與紅花籽粕中含有的蛋白的性質(zhì)有關(guān)。因此，選擇6.5為合適pH。

（4）酶用量對(duì)紅花籽粕水解度的影響

在超聲時(shí)間為10min、pH7.0、超聲溫度為55℃的條件下，分別測(cè)酶用量為0.9%、1.9%、2.9%、3.9%、4.9%的情況下水解1h，其水解度和還原力結(jié)果如圖8、圖9所示。

由圖8可知，隨著酶用量的增加水解度增大，其中在酶用量為2.9%時(shí)水解度最大，圖9可知，隨著酶用量的增大，還原力增大，其中在酶用量為1.9%，還原力最大，其后開始下降，在酶用量2.9%時(shí)有下降趨勢(shì)，但是不明顯。綜合考慮水解度、還原力和節(jié)約成本因素，認(rèn)為1.9%為最合適酶用量。

4、正交試驗(yàn)

由表4正交試驗(yàn)的結(jié)果表明，通過極差分析表明影響水解度的因素為：pH＞超聲時(shí)間＞超聲溫度＞酶用量，影響還原力的因素為：pH＞酶用量＞超聲溫度＞超聲時(shí)間，綜合分析來(lái)看，最佳的工藝條件為超聲時(shí)間10min，超聲溫度65℃，pH6.5，酶用量1.9%。

5、驗(yàn)證試驗(yàn)

根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)結(jié)果，綜合考慮酶的成本，選定在超聲時(shí)間10min，超聲溫度65℃，pH6.5，酶用量1.9%條件下進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，三次平行試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明水解度為51.1%，還原力的吸光度值為0.428。與正交試驗(yàn)中所得的值較為接近，證明正交試驗(yàn)得到紅花籽粕的酶解工藝是可行的。

三、結(jié)果與討論

本試驗(yàn)先是用木瓜蛋白酶、枯草芽孢桿菌中性蛋白酶、胰蛋白酶對(duì)紅花籽粕的酶解進(jìn)行研究，試驗(yàn)結(jié)果證明，在55℃條件下用超聲波處理10min促進(jìn)了酶的分解，提高了蛋白酶的活力，其中木瓜蛋白酶酶解最快，所以選取木瓜蛋白酶進(jìn)行工藝研究。

木瓜蛋白酶酶解紅花籽粕的工藝研究結(jié)果表明，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化提取條件，結(jié)果表明影響木瓜蛋白酶的主次因素為pH＞超聲溫度＞超聲時(shí)間＞酶用量。綜合考慮酶解液的水解度、還原力和成本等因素確定最佳提取條件為：超聲時(shí)間10min，超聲溫度65℃，pH6.5，酶用量1.9%，在此條件下，水解度為51.1%，還原力的吸光度值為0.428。

本試驗(yàn)在研究蛋白酶酶解紅花籽粕的工藝條件的同時(shí)，加入了超聲波輔助水解的研究因素，實(shí)驗(yàn)過程中超聲和水解是同步進(jìn)行的，通過試驗(yàn)結(jié)果表明，加入超聲因素進(jìn)行水解大大提高了所使用的酶的酶活，在節(jié)約成本的同時(shí)，大大提高了紅花籽粕的水解度和還原力。

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