（4）裝液量對菌株MCDA02發(fā)酵產(chǎn)CDA的影響裝液量對菌株MCDA02生長的影響如圖10，裝液量低于20％時，隨著裝液量的增加，菌株的產(chǎn)酶量逐漸升高，當裝液量達到20％時，產(chǎn)酶量達到最高。裝液量繼續(xù)增大，菌株MCDA02的產(chǎn)酶量降低。
 

（5）接種量對菌株MCDA02發(fā)酵產(chǎn)CDA的影響接種量對菌株MCDA02生長的影響如圖11，接種量在0.5％～4％之間時菌株都能比較好地產(chǎn)酶，相對酶活達到70％以上。接種量為1％時，菌株相對酶活最高。
 

（5）響應面優(yōu)化發(fā)酵條件實驗設(shè)計

從單因素中選取碳源、無機鹽和發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH三個因素為因變量，運用DesignofExperiments進行三因素三水平響應面實驗設(shè)計，共計17個試驗點的Box-Behnken響應面分析試驗(表2)。實驗設(shè)計與響應值結(jié)果，如表3。

運用DesignofExperiments進行方差分析和回歸分析(表3)，擬合得到回歸方程如下：

Y=-52.244+8.9515*A+279.125*B+10.807*C-30.5*A*B-0.64*A*C-2l*B*C-1.107*A2-817.5*B2-0.577*C2

由表4可知：模型P＜0.01，表明該方程模型極顯著，不同處理間的差異性極顯著；失擬項P＞0.05，表明模型失擬項不顯著l從F值的大小可以得到，一次項中各因素對幾丁質(zhì)脫乙酰酶酶活的影響順序是C＞A＞B，交互相對酶活影響的主次順序為AC＞AB＞BC。模型的R2為0.9512，說明該模型能解釋95.12％響應值的變化，因而該模型擬合程度良好，試驗誤差小，可以用于預測最優(yōu)發(fā)酵條件參數(shù)。結(jié)果表明，最佳發(fā)酵條件為：木薯淀粉1.09％、ZnS0₄0.05％、pH7.86，預期酶活2.01U／mL。結(jié)合實際，我們將發(fā)酵條件調(diào)整為木薯淀粉1.1％、ZnSO₄0.05％、pH7.9。經(jīng)過后期驗證測得酶活2.06U／mL。與預期基本符合。比優(yōu)化之前提高了1.41倍。優(yōu)化后菌株MCDA02發(fā)酵產(chǎn)CDA水平為2.06U／mL，低于部分報道的細菌發(fā)酵幾丁質(zhì)脫乙酰酶的發(fā)酵水平。

三、結(jié)論

從高公島采集的海泥中，篩選獲得了3株產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶菌株，菌株MCDA02發(fā)酵產(chǎn)酶水平最高。通過形態(tài)學特征、生理生化特性及16SrDNA分析將菌株MCDA02鑒定為Microbacteriumesteraromaticum。優(yōu)化獲得了菌株MCDA02的最佳發(fā)酵條件，優(yōu)化后酶活為2.01U／mL，較優(yōu)化前酶活1.43U／mL，提高了1.41倍。

聲明：本文所用圖片、文字來源《中國食品添加劑》，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請與本網(wǎng)聯(lián)系

相關(guān)鏈接：乙酰酶，無機鹽，菌株