北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃) |
| 傳代方法 | 1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl無(wú)菌水溶解質(zhì)粒，室溫放置1min； 2、從-80°C冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標(biāo)記； 3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min; 4、42°C熱激90s，再冰浴2min; 5、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min; 6、6000rpm離心5min，僅留100μl上清混勻菌體沉淀； 7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體； 8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h～16h; 9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。 注意：如果第二天轉(zhuǎn)化平板長(zhǎng)的過(guò)多，請(qǐng)將質(zhì)粒按比例稀釋后再轉(zhuǎn)化。 |
| 生長(zhǎng)條件 | 37℃；18-24h；好氧 |
| 存儲(chǔ)條件 | 2-8℃ |
| 安全等級(jí) | 0 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 科研 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書(shū)下載 | 說(shuō)明書(shū)文件 |
pVAX1
(pVAX1)
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pCMV-HA-Ub
(pCMV-HA-Ub)
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(Escherichia coli Stbl3（LentiCRISPR V2）)
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(Escherichia coli DH5ɑ（pLVX-IRES-puro）)
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(BJ5183 Chemically Competent Cell)
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(BJ5183-AD-1 Chemically Competent Cell)
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