北方偉業(yè)計量集團有限公司
培養(yǎng)基 | 90%DMEM-H+10%FBS |
傳代方法 | 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1分鐘內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm/min離心5分鐘,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,加入5-6毫升完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
生長條件 | 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; |
生長特性 | 貼壁生長 |
存儲條件 | 液氮 |
安全等級 | 1 |
形態(tài) | 成纖維細胞樣,梭形 |
分離基物 | 胚胎 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 該系產(chǎn)生了一種可以感染小鼠細胞的載體。Psi2 DAP 細胞產(chǎn)生編碼人胎盤堿性磷酸酶基因和新霉素抗性基因的載體。該細胞系通過插入重組逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組 (DAP) 衍生自 Psi2 細胞。用 Psi2 DAP 細胞產(chǎn)生的載體感染的細胞表達組織化學(xué)可檢測的堿性磷酸酶,可用作跟蹤其體內(nèi)命運的標(biāo)記。細胞可產(chǎn)生輔助病毒。 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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