北方偉業(yè)計量集團有限公司
2、紅曲霉液態(tài)發(fā)酵優(yōu)化的正交設計試驗
為了探討紅曲霉液態(tài)發(fā)酵的最適條件,采用七因素三水平對裝液量、接種量、培養(yǎng)時間、硫酸亞鐵添加量及維生素B1添加量5個因素進行正交試驗。正交試驗結果分析見表2。
由表2極差分析可知,D>E>B>C>A,即影響紅曲霉液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)色素的因素順序為:硫酸亞鐵添加量>維生素B1添加量>培養(yǎng)時間>接種量>裝液量。根據(jù)各試驗因子的平均值,得到最佳組合為A3B2C3D1E3,即:裝液量為100mL/250mL,培養(yǎng)時間為7d,接種量為9%,硫酸亞鐵添加濃度為0.005mmol/L,維生素B1添加濃度為0.05%。
3、驗證試驗
由正交表得到的最佳組合(A3B2C3D1E3)與試驗結果得到紅曲色素產(chǎn)量最高的組合(A2B2C3D1E2)不一致,因此對兩個組合進行驗證試驗,驗證試驗結果見表3。
由表3驗證試驗結果可知,組合A2B2C3D1E2與組合A3B2C3D1E3相比,前者對紅曲霉液態(tài)發(fā)酵的效果更佳。即當培養(yǎng)裝量為75mL/250mL,培養(yǎng)時間為7d,接種量為9%,硫酸亞鐵添加濃度為0.005mmol/L,維生素B1的添加濃度為0.03%。在此條件下,紅曲霉的色價可達714.80U/mL。
4、紅曲色素穩(wěn)定性研究
(1)pH對紅曲色素穩(wěn)定性的影響
由圖6可知,在同一時間下,紅曲色素的色價隨著溶液中pH值的升高而呈先增后降的趨勢,當pH為7時,紅曲色價均達到最大值;在同一pH溶液中,紅曲色素的色價基本上隨著時間的延長呈先增后降的趨勢,但是變化趨勢不是很明顯。因此,紅曲色素最適保存的pH為7。
(2)光照對紅曲色素穩(wěn)定性的影響
由圖7可知,不同光照對紅曲色素色價的影響各不相同,在同一時間下,光照對紅曲色素色價的影響如下:紫外光>自然光>18W日光>避光;對于同一種光照方式,紅曲色素的色價均隨著光照時間的延長而逐漸降低。因此,紅曲色素避光保存的效果最佳。
(3)食品添加劑對紅曲色素穩(wěn)定性的影響
由圖8可知,食品添加劑苯甲酸鈉和亞硝酸鈉對紅曲色素具有一定的增色作用,但是添加一定量的EDTA會使紅曲色素的色價降低,維生素C和雙氧水對紅曲色素的影響不大。
三、結論
試驗對紅曲霉的液體搖瓶發(fā)酵工藝進行了初步研究:考察了裝液量、時間、接種量、金屬離子及維生素等因素對紅曲霉液體發(fā)酵產(chǎn)紅曲色價的影響。結果表明:當培養(yǎng)裝液量為75mL/250mL,培養(yǎng)時間為7d,接種量為9%,硫酸亞鐵添加濃度為0.005mmol/L,維生素B1添加濃度為0.03%時最有利于紅曲霉合成紅曲色素,其色價可達714.80U/mL。從光照、pH和食品添加劑對紅曲霉所產(chǎn)紅曲色素的穩(wěn)定性方面進行初步研究,研究結果發(fā)現(xiàn),在同一時間下,紅曲色素的色價隨著溶液中pH值的升高而呈先增后降的趨勢,當pH為7時,紅曲色價均達到最大值;在同一pH溶液中,紅曲色素的色價基本上隨著時間的延長呈先增后降的趨勢,但是變化趨勢不是很明顯。在同一時間下,光照對紅曲色素色價的影響如下:紫外光>自然光>18W日光>避光;對于同一種光照方式,紅曲色素的色價均隨著光照時間的延長而逐漸降低。食品添加劑苯甲酸鈉和亞硝酸鈉對紅曲色素具有一定的增色作用,但是添加一定量的EDTA會使紅曲色素的色價降低,維生素C和雙氧水對紅曲色素的影響不大。這與全桂靜等的研究結果相一致。
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