芒果葉為漆樹(shù)科植物芒果（MangiferaindicaL）的樹(shù)葉，含有芒果苷、異芒果苷、金絲桃苷、槲皮素、沒(méi)食子酸、原兒茶酸等大量多酚類化合物，在抗氧化、抗菌、鎮(zhèn)痛、防曬等方面作用顯著，有疏風(fēng)止咳、防暈止吐、降低膽固醇、美容美顏、治療皮膚瘙癢、消積化食等效果。芒果葉資源十分豐富，但是利用率低，在食品、醫(yī)藥領(lǐng)域有很大的開(kāi)發(fā)應(yīng)用價(jià)值。其中多酚的提取方法主要有微波提取和超聲提取等方法，工藝優(yōu)化多采用正交實(shí)驗(yàn)，雖然這些提取方法效率較高，工藝優(yōu)化相對(duì)簡(jiǎn)單，但是由于多酚類遇熱易氧化失去活性，正交試驗(yàn)不能給出模型參數(shù)和實(shí)驗(yàn)預(yù)測(cè)值。因此本實(shí)驗(yàn)采用浸提法，以單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)選芒果葉多酚的最佳提取工藝，為綜合開(kāi)發(fā)利用芒果葉提供參考。

一、儀器與實(shí)驗(yàn)材料

1、儀器

UV-762型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海佑科儀器儀表有限公司）；FA1004B電子精密天平（上海越平科學(xué)儀器有限公司）；DZF-6020型真空干燥箱（上海瑯軒實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；DZKW-D-2型智能數(shù)顯恒溫水浴箱（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）；RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生物儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）。

2、實(shí)驗(yàn)材料

焦性沒(méi)食子酸對(duì)照品（質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99%，成都埃法生物科技有限公司）；芒果葉（采自廣西南寧，經(jīng)西安醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院關(guān)麗博士鑒定為漆樹(shù)科植物芒果MangiferaindicaL的樹(shù)葉）；水為超純水，其他試劑均為分析純。

二、結(jié)果與分析

1、多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取焦性沒(méi)食子酸對(duì)照品10.50mg于100mL容量瓶，加50%乙醇溶解并定容至刻度，搖勻，即為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液（0.1050mg/mL）。精密吸取5mL對(duì)照品溶液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸餾水和5mL酒石酸亞鐵溶液，用pH7.5的NaH₂PO₄-NaHPO₄緩沖溶液定容至刻度，室溫靜置5min后紫外可見(jiàn)光譜掃描，最大吸收波長(zhǎng)為540nm。

精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備溶液0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0mL于25mL量瓶，分別加入4mL蒸餾水和5mL酒石酸亞鐵溶液，用pH7.5的NaH，PO₄-Na₂HPO₄緩沖溶液定容至刻度，配制成0.0126、0.0168、0.0210、0.0252、0.0294、0.03361、0.0378mg/mL系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，以試劑空白作對(duì)照，540nm測(cè)定吸光度。以焦性沒(méi)食子酸濃度C為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為A=19.481C-0.0134，r=0.9998，在0.0126～0.0378mg/mL范圍內(nèi)焦性沒(méi)食子酸濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2、多酚含量測(cè)定，

將芒果葉洗凈晾干研磨成粗粉，裝入索氏提取器中，加入石油醚連續(xù)回流脫色至回流液近無(wú)色，將脫色后的芒果葉粗粉晾干備用。取上述芒果葉粗粉按實(shí)驗(yàn)條件浸提后抽濾，濾液稀釋至適宜濃度，依照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法顯色后測(cè)定吸光度，代入回歸方程中計(jì)算樣品中多酚含量。

3、單因素試驗(yàn)

（1）浸提時(shí)間對(duì)多酚含量的影響

精密稱取1.00g脫色后的芒果葉粗粉5份，在乙醇濃度為60%，料液比1:20，60℃的條件下分別浸提0.5、1、1.5.2、2.5h，將芒果葉洗凈晾干研磨成粗粉，裝入索氏提取器中，加入石油醚連續(xù)回流脫色至回流液近無(wú)色，將脫色后的芒果葉粗粉晾干備用。取上述芒果葉粗粉按實(shí)驗(yàn)條件浸提后抽濾，濾液稀釋至適宜濃度，依照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法顯色后測(cè)定吸光度，代入回歸方程中計(jì)算樣品中多酚含量。測(cè)定芒果葉中多酚的含量，浸提時(shí)間與多酚含量的關(guān)系見(jiàn)圖1。

由圖1可見(jiàn)隨著浸提時(shí)間的增加，多酚含量先增加而后降低，當(dāng)浸提時(shí)間為1.5h時(shí)，多酚含量達(dá)到最大值，因此選取1.5h為宜。

（2）料液比對(duì)多酚含量的影響

精密稱取1.00g脫色后的芒果葉粗粉5份，在料液比分別為1:10、1:20、1:30、1:40、1:50，乙醇濃度為60%，60℃的條件下分別浸提1.5h，按照2.2方法測(cè)定芒果葉中多酚的含量，料液比與多酚含量的關(guān)系見(jiàn)圖2。由圖2可見(jiàn)芒果葉中多酚的含量隨著料液比的增大先增大后減小，可能是因?yàn)殡S著溶劑用量增加，多酚溶解度增大，但溶劑量過(guò)大又會(huì)減弱體系的傳質(zhì)和傳熱，不利于提取。在料液比為1:30時(shí)，多酚含量達(dá)到最大，因此選取料液比1:30浸提。

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