4、褐變黑枸杞對(duì)果蠅急性氧化應(yīng)激損傷的影響

雙氧水產(chǎn)生的自由基誘導(dǎo)果蠅產(chǎn)生氧化應(yīng)激損傷。由圖2可知，枸杞能夠有效延長(zhǎng)果蠅存活時(shí)間，且隨著枸杞濃度的增加，果蠅平均存活時(shí)間逐步延長(zhǎng)。其中，相比于紅枸杞組，褐變黑枸杞高劑量組果蠅平均存活時(shí)間最長(zhǎng)。雌、雄性果蠅生長(zhǎng)趨勢(shì)基本一致，且呈劑量依賴關(guān)系。雌性果蠅的平均存活時(shí)間高于同劑量組雄性果蠅。

5、褐變黑枸杞對(duì)果蠅體內(nèi)SOD.CAT等抗氧化酶活力及MDA含量的影響

飼喂含枸杞的培養(yǎng)基45d后，收集果蠅測(cè)定抗氧化相關(guān)酶的活力。由圖3可知，與對(duì)照組相比，各劑量組果蠅體內(nèi)T-SOD和CAT活力均有所提高，脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA含量均有一定程度的降低。與紅枸杞低劑量組相比，褐變黑枸杞高劑量組果蠅體內(nèi)SOD活力顯著提高（P＜0.05），其中，雌性果蠅效果更顯著；與對(duì)照組相比，紅枸杞組果蠅體內(nèi)CAT活力無(wú)顯著性差異，高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高果蠅體內(nèi)CAT活力（P＜0.05），與紅枸杞高劑量組相比，高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高雌性果蠅體內(nèi)CAT活力；與對(duì)照組相比，紅枸杞組果蠅體內(nèi)MDA含量無(wú)顯著性差異，高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高果蠅體內(nèi)MDA含量（P＜0.05），與紅枸杞高劑量組相比，高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高雄性果蠅體內(nèi)MDA含量（P＜0.05）。

6、褐變黑枸杞對(duì)果蠅抗氧化相關(guān)基因表達(dá)水平的影響

由圖4可知，與對(duì)照組相比，各劑量組SOD1、SOD2和CATmRNA表達(dá)水平有一定程度的提高，其中，紅枸杞組無(wú)顯著性差異，褐變黑枸杞組SOD1、SOD2mRNA表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）。與紅枸杞高劑量組相比，高劑量的褐變黑枸杞顯著提升了雌性果蠅體內(nèi)SOD2基因mRNA的表達(dá)。MTH是感應(yīng)細(xì)胞外信號(hào)的偶聯(lián)接受因子，MTH基因的下調(diào)可以增強(qiáng)體內(nèi)抗氧化水平，延緩果蠅衰老。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在飲食中添加一定量的枸杞可以在一定程度上下調(diào)MTH基因的表達(dá)。與對(duì)照組相比，紅枸杞組無(wú)顯著性差異，褐變黑枸杞可以對(duì)果蠅體內(nèi)MTH基因的下調(diào)產(chǎn)生顯著性影響（P＜0.05）。同時(shí)，與紅枸杞低劑量組相比，高劑量組褐變黑枸杞果蠅體內(nèi)MTH基因顯著下調(diào)（P＜0.05）。

三、討論

衰老是個(gè)微妙復(fù)雜的生命進(jìn)程，是指生物體各細(xì)胞、器官和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能隨著年齡的增長(zhǎng)而進(jìn)行的復(fù)雜、緩慢、全身性的退化過(guò)程。在衰老機(jī)制的研究中，自由基學(xué)說(shuō)受到了廣泛關(guān)注。該學(xué)說(shuō)認(rèn)為，清除體內(nèi)過(guò)量自由基是抗衰老、延長(zhǎng)壽命的一個(gè)有效途徑。SOD、CAT是體內(nèi)清除0^2-、H²O²、0H-等自由基的主要抗氧化酶。MDA是自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)的產(chǎn)物，可以引起蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，嚴(yán)重?fù)p害細(xì)胞機(jī)能，通常作為機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化程度的主要指標(biāo)。

果蠅作為典型的抗氧化、抗衰老動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，枸杞能夠延長(zhǎng)果蠅壽命，褐變黑枸杞延壽效果更顯著，且呈劑量依賴關(guān)系。同時(shí)，急性損傷實(shí)驗(yàn)中，褐變黑枸杞能夠有效減輕H₂O₂引起的氧化損傷。酶活力測(cè)定結(jié)果顯示，與紅枸杞組相比，飼喂褐變黑枸杞組果蠅體內(nèi)SOD、CAT酶活力顯著升高，MDA含量明顯下降。Realtime-PCR結(jié)果顯示，褐變黑枸杞組果蠅體內(nèi)抗氧化酶SOD1、SOD2和CATmRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)，MTHmRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)。因此，褐變黑枸杞體內(nèi)抗氧化活性很可能是通過(guò)上調(diào)內(nèi)源性抗氧化酶的基因表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。

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