2.5 肝臟組織切片

肝臟是參與D-半乳糖代謝的主要器官，過量D半乳糖可增加活性氧（ROS）的產(chǎn)生，可能導(dǎo)致器官損傷。從圖4a可以看出NC組小鼠的肝臟細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有正常的中心靜脈和肝細(xì)胞，核大而圓；圖4b顯示DG組肝組織有大量脂肪泡蓄積，肝小葉結(jié)構(gòu)不明顯，說明肝臟出現(xiàn)異常。PC組和太子參醇提物干預(yù)各組肝組織情況較DG組好，胞質(zhì)豐富，脂肪蓄積減少，肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝血竇以中央靜脈為中心呈均勻的散狀分布，肝組織形態(tài)得到不同程度的恢復(fù)，其中HPEs組肝組織情況與NC組接近，說明高劑量太子參醇提物對(duì)氧化應(yīng)激造成的肝臟組織損傷修復(fù)效果好。

2.6 UPGMA 聚類分析

通過比較不同樣品間Unifrac距離的遠(yuǎn)近來判斷其微生物構(gòu)成的相似性并聚類，從圖5所示的聚類分析結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，除個(gè)別樣品有重疊外，MPEs組和HPEs組明顯成一簇，相似程度高，而DG組與NC組存在分離，說明NC組、DG組與MPEs和HPEs組微生物構(gòu)成差異較大。

2.7 屬水平群落組成熱

從圖6的上方進(jìn)化樹可以看到，NC、PC和LPEs組聚成一類，MPEs和HPEs組聚成一類，DG組單獨(dú)聚成一類，表明DG組與各組小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)在屬水平上相似程度較低，說明注射D-半乳糖致?lián)p對(duì)小鼠腸道微生物屬水平組成影響較大。在DG組中，甲基桿菌屬（Methylobacterium）、阿爾法變形桿菌（UnclassifiedAlphaproteobacteria）、普雷沃氏菌屬（Paraprevotella）、理研菌屬（Rikenella）等為代表的潛在致病菌屬含量增加。與DG組相比，HPEs組腸道微生物表現(xiàn)為上調(diào)的菌屬有擬桿菌屬（Parabacteroides）、梭菌屬（Anaerotruncus）、另枝菌屬（Alistipes）、糞芽孢菌屬（Coprobacillus）、S24-7等菌屬的豐度，其中Parabacteroides屬SCFAs產(chǎn)生菌，可以產(chǎn)生戊酸，Anaerotruncus能編碼表達(dá)合成丁酸鹽所需要的酶，Alistipes可能具有預(yù)防和治療如結(jié)腸直腸癌等腸道疾病的潛力，相對(duì)于其他腸道微生物具有更強(qiáng)的金屬抗性，而S24-7屬于丁酸鹽產(chǎn)生菌。MPEs組上調(diào)Bifidobacterium、Bacteroides和Prabacteroides，其中Bacteroides為腸道優(yōu)勢(shì)厭氧菌，能幫助宿主分解多糖，與攝入黨參能提高Bacteroides的研究結(jié)果類似。LPEs組盲腸微生物表現(xiàn)為上調(diào)Odoribacter、梭菌屬（Clostridium）和普氏菌屬（Prevotella）。Clostridium可以合成強(qiáng)抗氧化劑3-吲哚丙酸(色氨酸脫氨的產(chǎn)物)，消除D-半乳糖產(chǎn)生的自由基從而保護(hù)大腦免受氧化傷害；而Prevotella可提高SCFAs的合成速率，增強(qiáng)對(duì)組蛋白去乙酰化酶和G蛋白偶聯(lián)受體的抑制作用并減少腦損傷。作為主要益生菌，雙歧桿菌（Bifidobacterium）和乳桿菌（Lactobacillus）能改善健康人的總抗氧化狀態(tài)并降低氧化應(yīng)激指標(biāo)。有報(bào)道人參中的多糖能夠改善某些人參皂苷的腸道生物轉(zhuǎn)化，同時(shí)改善腸道菌群的紊亂情況，特別是促進(jìn)Lactobacillus和Bacteroides生長。本文也有類似試驗(yàn)結(jié)果，特別是與NC組相比，小鼠注射D-半乳糖后腸道Bifidobacterium和Lactobacillus相對(duì)豐度明顯降低，喂食Vc以及高劑量太子參醇提物顯著增加了Bifidobacterium和Lactobacillus的豐度。益生菌的代謝活動(dòng)可通過清除氧化劑化合物或阻止其在腸道中的生成發(fā)揮抗氧化作用。

2.8 小腸組織切片

腸粘膜的完整性受損易使腸內(nèi)微生物易位進(jìn)入淋巴系統(tǒng)，更多有害的致病菌會(huì)粘附在腸道上皮，與Bifidobacterium和Lactobacillus等有益菌競爭。過量的ROS會(huì)減少腸道粘液層厚度，粘液松散會(huì)大大降低粘液屏障的保護(hù)作用。

Bifidobacterium和Lactobacillus均已被證明具有降低動(dòng)物腸道內(nèi)毒素水平和改善粘膜屏障功能。從圖7小腸切片圖可見，NC組小腸組織學(xué)形態(tài)呈正常狀態(tài)，絨毛排列致密，腸絨毛結(jié)構(gòu)完整；DG組絨毛排列較稀疏，絨毛頂部有萎縮現(xiàn)象，說明腸絨毛結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常；PC組較DG組的粘膜損傷情況有所恢復(fù)，但絨毛呈短錐狀，分支仍較少。隨著太子參醇提物劑量的增加，粘膜損傷逐漸修復(fù)，圖7f所示HPEs組小鼠小腸絨毛損傷情況明顯恢復(fù)，致密程度恢復(fù)接近正常水平。

3 結(jié)論

本研究表明，太子參醇提物在一定程度上能增強(qiáng)D-半乳糖模型鼠的抗氧化能力。通過臟器指數(shù)、抗氧化酶活、肝臟組織形態(tài)、小腸微生物等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明太子參醇提物能改善D-半乳糖模型鼠生長遲緩的情況，顯著提高小鼠肝臟、腎臟和腦部的CAT、SOD和GSH-PX酶活，降低MDA含量，保護(hù)肝臟組織免受氧化損傷，小鼠體內(nèi)總抗氧化能力提高。同時(shí)，該太子參醇提物能有效提高小腸內(nèi)容物中Bifidobacterium、Lactobacillus、Bacteroides和Blautia相對(duì)豐度，降低Unclassified-Alphaproteobacteria、Rikenella屬等相對(duì)豐度，盲腸絨毛致密程度恢復(fù)接近正常水平，腸道總體患病風(fēng)險(xiǎn)降低，使得機(jī)體總體抗氧化水平得到提高。

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