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氣相色譜-質(zhì)譜在化學(xué)性食物中毒檢驗(yàn)中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-04-07 16:30 編輯者:偉業(yè)計(jì)量

所謂毒物是指在一定條件下(接觸方式、接觸途徑、進(jìn)入體內(nèi)數(shù)量),影響機(jī)體代謝過程,引起機(jī)體暫時(shí)或永久的器質(zhì)性或功能性異常狀態(tài)的外來物質(zhì)。

食物中毒,是指攝入了含有生物性或化學(xué)性有毒物質(zhì)的食品,或者把有毒有害物質(zhì)當(dāng)作食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性(不屬于傳染病)的急性、亞急性疾病。

現(xiàn)全球每天新合成化學(xué)物12000種,化學(xué)物總數(shù)超過6000萬種。2010年4月化學(xué)文摘社收錄的化學(xué)物專利有16%來自中國。人們的生活處處充滿化學(xué)物質(zhì),受到各種化學(xué)物質(zhì)的影響。

化學(xué)性食物中毒是指人們攝入了化學(xué)性有毒物質(zhì)的食品,或者把有毒有害物質(zhì)當(dāng)作食品攝入后出現(xiàn)的中毒,它包括急性中毒與慢性中毒。

化學(xué)性急性食物中毒的主要特點(diǎn):①突然發(fā)生,很多人在幾分至數(shù)小時(shí)內(nèi)相繼發(fā)病,所有病人都有相似臨床癥狀;②經(jīng)過調(diào)查發(fā)現(xiàn)所有病人在相近的時(shí)間吃過同一種食物,與食物關(guān)系比較明顯,發(fā)病范圍局限在食用該種食物的人群中;③停止食用該種食物,發(fā)病人群未再增加;④臨床癥狀除胃腸道癥狀外,一般體溫不升高(不發(fā)燒),但常伴有較明顯的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀;⑤一般沒有嚴(yán)格的季節(jié)性,也不受食物的限制;⑥食物中毒病人對健康人沒有直接的傳染性。

毒物分析的特點(diǎn):①分析目標(biāo)的不確定性,故毒物分析具有探索和研究性質(zhì);②毒物品種繁多,樣品來源各異,分析方法多;③對分析人員的素質(zhì)、經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備和技術(shù)儲(chǔ)備有較高的要求;④對方法的靈敏度、準(zhǔn)確度的要求高,對儀器設(shè)備要求高;⑤責(zé)任重大。

未知毒物分析體系的建立:①實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該配置必備的設(shè)備,建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度并不斷地進(jìn)行完善;②隊(duì)伍建設(shè)、人員配置合理,對實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行教育及培訓(xùn);③技術(shù)儲(chǔ)備、注重信息收集,分析方法的研究;④質(zhì)量保證體系建立及完善。

毒物分析過程:現(xiàn)場調(diào)查→樣品采集→樣品前處理→分析檢測→數(shù)據(jù)處理→報(bào)告結(jié)果(→公安立案、調(diào)查、偵破)。

1、現(xiàn)場調(diào)查

盡可能多地了解現(xiàn)場情況,對于中毒事故的起因、發(fā)展、中毒現(xiàn)場的情況進(jìn)行初步了解和必要可行的流行病學(xué)調(diào)查,有助于后續(xù)包括現(xiàn)場檢測和樣品收集等技術(shù)措施的落實(shí)。

如通過中毒潛伏期及經(jīng)過情況、中毒人數(shù)和癥狀、攝人食物和同食者的癥狀,來推測是誤食還是投毒。如屬誤食,應(yīng)從食物的原料、貯藏的周圍環(huán)境、食物的加工場所及工具包裝容器等方面仔細(xì)觀察,推測可能誤食的毒物來源。如屬投毒,應(yīng)從可疑者的工作情況,推測可疑者可能獲得和投放的毒物。

2、樣品采集

樣品采集的基本原則:完整性、代表性、針對性、安全性、標(biāo)示唯一性。

中毒物檢測采樣:一般應(yīng)采集與可能中毒有關(guān)的所有樣品,包括現(xiàn)場樣品(剩余食品、水、毒誘餌、可疑原料、現(xiàn)場操作器具、中毒患者的嘔吐物等),以及必要的中毒患者的生物樣品(洗胃液或排泄物、血液、組織等)。一般采用密閉性較好的玻璃容器或惰性塑料容器收集和儲(chǔ)存樣品,避免交叉污染。

生物樣品采集:血樣采集時(shí)需及時(shí)混勻,如果采樣容器中已經(jīng)加有抗凝劑,應(yīng)輕輕搖晃使血液與抗凝劑混勻,不要猛力振搖,4℃低溫冷藏。還要注意采血時(shí)間性,儲(chǔ)血容器適用性,容器密閉性,盡量不加防腐劑和抗凝劑血液采集。采血人員應(yīng)核對采樣對象姓名與編號(hào),使用已貼好編號(hào)的采血管。采靜脈血時(shí),成人采血10~15mL,兒童2~5mL,嬰兒0.5~2mL;尿樣采集可直接收集、導(dǎo)出或用注射器抽取,無尿者也可取膀胱沖洗液,取中段尿樣,不少于100mL,必要時(shí)可分裝50mL以下小玻璃或惰性塑料瓶容器,不加防腐劑,記錄采集信息:采樣量、采樣時(shí)間、急救用藥、處理方法、臨床癥狀等。

取樣量應(yīng)考慮復(fù)查和進(jìn)一步確證的留存量。一般固體樣品采集200g以上用玻璃、聚乙烯或聚四氟乙烯器皿盛裝;液體樣品采集一般采用密閉性較好的玻璃容器,用虹吸或傾倒方法收集和儲(chǔ)存500mL以上的樣品;嘔吐物的采集,依據(jù)嘔吐物在地面上的印漬確定范圍,采集嘔吐物及表層1cIn土樣;洗胃液最好采集最初抽出的液體,所采集的樣本可用玻璃、聚乙烯或聚四氟乙烯器皿盛裝,避免使用金屬器皿,采集量最好達(dá)到100g(mL)以上。

樣品的保存和運(yùn)輸:所有樣品采集后最好在4℃條件下冷藏保存和運(yùn)輸,如無條件冷藏保存運(yùn)輸,樣品應(yīng)該在采集24h內(nèi)及時(shí)送實(shí)驗(yàn)室檢測。所有實(shí)驗(yàn)室檢測完畢的樣品,應(yīng)在冷凍條件下保存一周,以準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)室復(fù)核檢測。

標(biāo)示唯一性,信息的詳細(xì):采樣量、采樣部位、采樣時(shí)間、樣品來源等,以及中毒人員的臨床表現(xiàn)等。

3、樣品前處理

樣品前處理的原則是在不影響測定結(jié)果的情況下,盡量不采用或少采用步驟多的樣品前處理方法,中毒樣品的處理主要應(yīng)體現(xiàn)快速,為最大限度地檢測出中毒物,樣品的處理要簡單、快速,一般不進(jìn)行復(fù)雜的凈化步驟。

盡量消除或減少樣品基質(zhì)對樣品檢測結(jié)果的影響,并對目標(biāo)物進(jìn)行濃縮富集,同時(shí)避免引入新的干擾物質(zhì)或造成樣品污染,復(fù)雜基質(zhì)的樣品前處理技術(shù)是分析檢測成敗的關(guān)鍵點(diǎn)和難點(diǎn)。

4、分析檢測

試驗(yàn)方法的建立:對于有國家標(biāo)準(zhǔn)方法的毒物檢驗(yàn),應(yīng)按國家標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。對沒有國家標(biāo)準(zhǔn)分析方法的毒物,則應(yīng)檢索該毒物分析方法、理化性質(zhì)及有關(guān)衛(wèi)生和產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),搜集標(biāo)準(zhǔn)品,根據(jù)毒物性質(zhì)及所選用的檢測手段確定樣品處理方法,選擇合適的分析手段,并優(yōu)化試驗(yàn)條件,然后對方法的準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。對于自己建立的檢驗(yàn)方法,在正式下檢驗(yàn)結(jié)論前應(yīng)充分考慮檢驗(yàn)過程的可靠性。

5、數(shù)據(jù)處理

嚴(yán)格來說,每個(gè)被鑒定化合物必須由兩種以上不同的分析方法進(jìn)行鑒定,并且不同方法所給出的鑒定結(jié)果應(yīng)該是一致的;其中必須至少有一種方法是譜學(xué)方法(如EI/MS、CI/MS、LC/MS、NMR等)。

在化學(xué)性食物中毒樣品的應(yīng)急檢驗(yàn)中,首先要確定中毒物質(zhì),即定性分析,對切斷中毒物繼續(xù)攝入、確認(rèn)中毒患者搶救措施、有效控制事件發(fā)展等提供依據(jù);然后是定量,為突發(fā)中毒事件的監(jiān)測工作、中毒事件的報(bào)告、開展毒物及突發(fā)中毒事件的公眾健康危害的風(fēng)險(xiǎn)評估等提供支持。

氣相色譜一質(zhì)譜分析在化學(xué)性食品中毒檢驗(yàn)中,主要是對有機(jī)物的分析鑒定發(fā)揮了巨大的作用。

質(zhì)譜定性分析的主要要求:①若采用高分辨質(zhì)譜,則質(zhì)量數(shù)偏差應(yīng)不超過百萬分之十;②若采用全掃描方式,則應(yīng)有至少三個(gè)具有結(jié)構(gòu)特異性的離子與NIST標(biāo)準(zhǔn)參考譜圖中的離子相吻合,匹配度大于80%;③若采用多級(jí)質(zhì)譜,則應(yīng)有不少于兩個(gè)離子對相吻合;④若采用標(biāo)準(zhǔn)譜圖比對(含光譜),則匹配率應(yīng)大于80%;⑤對于鑒定出的化合物,可得到其標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),應(yīng)該配制標(biāo)準(zhǔn)溶液,按照樣品分析時(shí)相同儀器條件,對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分析,應(yīng)增加保留時(shí)間一質(zhì)量數(shù),保留時(shí)間一譜圖匹配度等多因素比照方式進(jìn)行判斷,使匹配度大于80%,保留指數(shù)相差小于20%,以增加確證的準(zhǔn)確性。

一、毒鼠強(qiáng)中毒樣品的氣相色譜-質(zhì)譜分析測定

毒鼠強(qiáng)化學(xué)名為四次甲基二砜四胺,是德國拜爾公司1949年合成的劇毒急性中樞神經(jīng)興奮性殺鼠劑,哺乳動(dòng)物半數(shù)致死量(LD50)為0.1~0.3mg/kg,對人的口服致死量為0.1~0.2mg/kg體重。因其有明顯的二次藥害,我國早已將其列為禁用滅鼠劑,禁止其生產(chǎn)、銷售和使用。由于其合成過程比較簡單,至今仍有不法商販生產(chǎn)、銷售以毒鼠強(qiáng)為主要成分的滅鼠藥,民間自行配制的毒鼠藥如“三步倒”“一掃光”“王中王”“邱氏鼠藥”等均含有毒鼠強(qiáng)成分。毒鼠強(qiáng)無色無味,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,由其導(dǎo)致的誤服、投毒、自殺等中毒事件在全國,在山東省也有類似中毒事件,主要中毒事件均由筆者所在理化所承擔(dān)檢驗(yàn)。

常見的中毒原因有:①誤食用毒鼠強(qiáng)制作的毒餌;②誤食因毒鼠強(qiáng)中毒死亡的動(dòng)物;③自殺;④投毒而引起中毒。

食源性為毒鼠強(qiáng)中毒的主要原因,胃腸道是其主要侵入途徑。攝入后以原形無明顯選擇性地分布于各組織器官,血液中不與蛋白結(jié)合。排出速率緩慢,主要通過腎臟以原形排出,少量可經(jīng)呼吸道排出或隨膽汁排入腸道。

毒鼠強(qiáng)中毒潛伏期較短,一般為5~60min,多數(shù)中毒者在進(jìn)食30min左右發(fā)病。嚴(yán)重中毒者會(huì)因劇烈的強(qiáng)直抽搐導(dǎo)致呼吸衰竭而死亡。

毒鼠強(qiáng)中毒的臨床表現(xiàn)為頭痛、頭暈、乏力、胸悶、心悸、惡心、嘔吐、腹痛、煩躁不安、四肢抽搐等。嚴(yán)重者會(huì)突然昏倒、意識(shí)喪失,常伴有劇烈抽搐和強(qiáng)直性驚厥。有的人在抽搐間歇期內(nèi)神志可轉(zhuǎn)清,有的人可因劇烈抽搐致呼吸衰竭死亡。

毒鼠強(qiáng)中毒無特效解毒劑。治療原則是要盡早徹底清除毒物,及早采取催吐、洗胃、導(dǎo)瀉等措施。洗胃要徹底、反復(fù),并應(yīng)留置胃管24h以上。除上述緊急治療措施外,還應(yīng)使用苯巴比妥鈉和地西泮,迅速控制病人癲癇發(fā)作,并維持治療7~14d,嚴(yán)重者應(yīng)持續(xù)1個(gè)月。對于中毒嚴(yán)重患者,要進(jìn)行血液灌流,根據(jù)血液中毒鼠強(qiáng)濃度,可以進(jìn)行多次血液灌流。此外,要積極防治呼吸衰竭與腦水腫,保護(hù)心、肝等臟器功能。

毒鼠強(qiáng)的測定沒有國家標(biāo)準(zhǔn)方法,早期的測定方法為比色法,因靈敏度低、顏色的變化受多種因素干擾、有假陽性、假陰性結(jié)果出現(xiàn),在測定毒鼠強(qiáng)方面現(xiàn)已逐步淘汰。比色法只在沒有氣相色譜一質(zhì)譜儀的實(shí)驗(yàn)室作為初步判斷:“硫酸一變色酸定性測定食品、嘔吐物等毒鼠強(qiáng)”,作為初步判斷事件性質(zhì)的參考,不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。20世紀(jì)80年代開始用氣相色譜法氮磷檢測器測定毒鼠強(qiáng),靈敏度提高,通過采用不同的前處理方法可對各種樣品進(jìn)行測定:“液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量測定血漿中毒鼠強(qiáng)”,“液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量分析食品、血和尿樣品中氟乙酰胺和毒鼠強(qiáng)”。隨著氣相色譜-質(zhì)譜儀器的普及,現(xiàn)在全國各地毒鼠強(qiáng)的測定確認(rèn)均通過氣相色譜-質(zhì)譜法,與氣相色譜相比,氣相色譜-質(zhì)譜法可提供毒鼠強(qiáng)的質(zhì)譜圖,結(jié)論更加可靠,可排除由于氣相色譜僅用保留時(shí)間定性而出現(xiàn)的假陽性結(jié)果。

參考資料:氣相色譜-質(zhì)譜在儀器安全監(jiān)測中的應(yīng)用,如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請與本網(wǎng)聯(lián)系。

相關(guān)鏈接:化學(xué)物質(zhì),現(xiàn)場檢測防腐劑,毒鼠強(qiáng)

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